[發(fā)明專利]用于分析與血液密度相關(guān)的諸如紅細(xì)胞沉降率和/或紅血球聚集率的血液參數(shù)的儀器校準(zhǔn)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200680025374.2
• 申請(qǐng)日: 2006-07-12
• 公開（公告）號(hào): CN101228426A
• 公開（公告）日: 2008-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 阿爾弗雷多·喬蒂;P·伽里亞諾;朱塞佩·喬蒂
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 阿里法克斯國(guó)際股份公司
• 主分類號(hào): G01N15/05
• 分類號(hào): G01N15/05;G01N21/82
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 顧晉偉;劉曉東

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及用于校準(zhǔn)或設(shè)定和控制適于對(duì)血液樣品進(jìn)行分析并用于例如測(cè)量血液細(xì)胞部分的沉降速率的儀器的方法。

更確切而言，該測(cè)量涉及紅細(xì)胞的沉降速度(紅細(xì)胞沉降率，ESR)和/或紅血球的聚集率，并通過(guò)利用稱為透射光強(qiáng)度-時(shí)間曲線(syllectogram)的光密度動(dòng)力學(xué)來(lái)進(jìn)行。

背景技術(shù)

在血液分析領(lǐng)域，測(cè)量血液細(xì)胞部分的沉降速度(ESR)以評(píng)估例如炎癥病態(tài)的存在是公知的。

用于測(cè)量ESR的儀器和技術(shù)是公知的，例如在以本申請(qǐng)人的名義公布的歐洲專利申請(qǐng)EP-A-1098188中描述的，其使用置于測(cè)量體積相對(duì)兩側(cè)的光發(fā)射裝置和檢測(cè)裝置。

待分析的血液樣品被注入測(cè)量體積中，突然停止其流動(dòng)，引起檢測(cè)樣品中存在的細(xì)胞部分的光密度特征動(dòng)力學(xué)，該動(dòng)力學(xué)稱為透射光強(qiáng)度-時(shí)間曲線(syllectogram)。

可采用吸光度或透光度的單位測(cè)量光密度。吸光度的單位利用朗伯-比爾定律來(lái)確定，其中吸光度值通過(guò)A＝-log(I/I°)×L計(jì)算，其中I°是入射到待測(cè)樣品上的光功率，I是從待測(cè)樣品發(fā)出的光功率，L是光程或光道的長(zhǎng)度，即樣品的厚度。

檢測(cè)裝置與測(cè)量待測(cè)樣品的所述光密度特征動(dòng)力學(xué)的處理裝置相關(guān)聯(lián)，并利用特定算法來(lái)計(jì)算ESR值或紅血球聚集速率，其特征在于儀器自身的參數(shù)和其測(cè)量特性。

為對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，已知以并行方式使用科學(xué)承認(rèn)的用于測(cè)量相同血液樣品ESR的傳統(tǒng)參照方法，例如韋斯特格倫氏法(Westergren?method)。

當(dāng)使用韋斯特格倫氏法作為參照時(shí)，所測(cè)量的ESR值對(duì)進(jìn)行測(cè)試的環(huán)境溫度的變化特別敏感。實(shí)際上，這些測(cè)量值受進(jìn)行測(cè)試的溫度變化的影響很大，如斯托克斯公式所分析描述的，利用該公式由疊連(Rouleaux)、懸浮流體密度、液體粘度等知識(shí)開始計(jì)算沉降速度。

也已經(jīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，對(duì)同一樣品的一次測(cè)試和另一次測(cè)試之間3～5攝氏度的溫度變化足以損失達(dá)30～50％的測(cè)量準(zhǔn)確度。

為此，國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(NCCLS，H2-A4?Vol.20n°27，page?1“Scope?ESR?procedures?cannot?be?calibrated”)認(rèn)為用于測(cè)量ESR的程序不能被校準(zhǔn)，因?yàn)橛糜跍y(cè)定ESR的程序?qū)Ω鞣N誤差很敏感。

如果由透射光強(qiáng)度-時(shí)間曲線(syllectogram)所描述的紅細(xì)胞沉降和聚集現(xiàn)象只限于新鮮血液且是短暫的，則在目前的情況下不可能實(shí)現(xiàn)用于對(duì)該測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)化校準(zhǔn)的材料。

盡管韋斯特格倫氏法保留用于測(cè)量沉降的參照方法，但是也應(yīng)該注意到該方法工作量極大，容易犯錯(cuò)，假定含有血液樣品的試管在分析期間完全豎直，則該方法至多能夠在采集血液樣品后4小時(shí)內(nèi)進(jìn)行，并且該方法花費(fèi)比該類型的自動(dòng)儀器長(zhǎng)得多的時(shí)間用于分析。

一些生產(chǎn)商已經(jīng)生產(chǎn)并建議對(duì)用于紅細(xì)胞沉降的不同測(cè)量系統(tǒng)使用控制器：從用于韋斯特格倫氏法的玻璃管到測(cè)量ESR的其它設(shè)備。但是，使用這些控制器，所使用的每個(gè)測(cè)量系統(tǒng)獲得不同的ESR值。因此，對(duì)相同的血液樣品使用不同系統(tǒng)得到的測(cè)量值根據(jù)所使用的測(cè)量系統(tǒng)而互不相同，而校準(zhǔn)的目標(biāo)應(yīng)該是對(duì)相同的血液樣品提供校直的ESR值，就是說(shuō)，可重復(fù)的且與不同環(huán)境中測(cè)量的ESR值相一致，而與使用測(cè)量裝置的環(huán)境無(wú)關(guān)。

從公開的專利申請(qǐng)EP-A2-0887637，還已知使用具有約1至8微米之間的平均粒度、窄顆粒分布和約1.35至1.45的低折射率的合成聚合物球形顆粒，以校準(zhǔn)在其中對(duì)包含在血液樣品中的紅血球、網(wǎng)織紅血球、白血球和血小板的尺寸、直徑和體積進(jìn)行計(jì)數(shù)和測(cè)量的流式細(xì)胞計(jì)數(shù)器。

該已知的校準(zhǔn)方法適用于流式細(xì)胞計(jì)數(shù)器或血球計(jì)數(shù)器，其中通常在液流中流動(dòng)的細(xì)胞或其它生物顆粒具有通常在1至10微米之間的極小尺寸，使得每個(gè)顆粒實(shí)際上是一次一個(gè)細(xì)胞穿過(guò)檢測(cè)區(qū)，此時(shí)測(cè)量每次穿過(guò)的顆粒的物理和化學(xué)特征，在該情況下測(cè)量數(shù)量、直徑和/或體積。

由于血液樣品中存在的顆粒在檢測(cè)區(qū)域中沉降，該流動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)器不能評(píng)價(jià)光密度的變化，因?yàn)樗鼈円淮沃荒芊治鲆粋€(gè)顆粒的化學(xué)物理特征，而不是檢測(cè)涉及顆粒質(zhì)量的諸如紅細(xì)胞沉降的現(xiàn)象。

而且，利用單個(gè)顆粒的該校準(zhǔn)技術(shù)無(wú)論如何不允許模擬和重建待分析血液樣品中光密度的發(fā)展。