[發明專利]用于降低細胞因子免疫原性和去除細胞表面標記的方法

無效

• 申請號: 200680010757.2
• 申請日: 2006-04-24
• 公開（公告）號: CN101151275A
• 公開（公告）日: 2008-03-26
• 發明（設計）人: F·A·哈丁
• 申請（專利權）人: 金克克國際有限公司
• 主分類號: C07K14/52
• 分類號: C07K14/52;C07K14/54;C07K14/705;C07K14/73
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 趙蓉民;路小龍

【01】本發明要求2005年4月27日提交的美國臨時專利申請序列號(United?States?Provisional?Patent?Application?Serial?No.)60/675,156的優先權。

發明領域

【02】本發明提供了對蛋白酶的相對變應原性進行評估的方法。具體而言，本發明提供用于定性評估任何蛋白酶在人體誘導過敏反應的潛能的方法。另外，本發明提供選擇具有降低的變應原性的蛋白酶、用于各種不同應用中的方法。

發明背景

【03】蛋白質(proteins)，包括蛋白酶(proteases)，具有誘導潛在的威脅生命的免疫反應的能力。該局限性阻礙了它們在消費者終端應用中和產品中的廣泛使用。事實上，該誘導免疫反應的潛能已引起了美國食品和藥物管理局(U.S.Food?and?Drug?Administration(FDA))的注意，因此要求：新的蛋白質治療劑在批準前和批準后都要進行變應原性測試。雖然有很多動物模型可用于評估蛋白質的變應原性，然而，還沒有有效的方法可用于辨別人體內的相對變應原性。

【04】事實上，蛋白質，包括蛋白酶的變應原性(allergenicity)，一直受到酶生產工業的關注。有記錄顯示，職業上暴露給蛋白質(例如蛋白酶)導致產業工人和實驗室人員致敏。對特定蛋白的致敏(sensitization)，通常通過測試來評估(例如皮膚點刺試驗)，這可以顯示個體是否對該蛋白發動免疫應答。

【05】已經表明工業蛋白酶的生產可以誘導被暴露工人的致敏(參見，例如Novey?et?al，J.Allergy?Clin.Immunol.，63：98[1979]；Pepyset?al，Clin.Allergy?15：101[1985]；Vanhanen?et?al，Occup.Environ.Med.，57：121[2000]；Schweigert?et?al，Clin.Exp.Allergy?30：1511[2000]；和Sarlo?et?al，Fund.Appl.Toxicol.，39：44[1997])。美國政府工業衛生學家學會(American?College?of?American?Government?Industrial?Hygienists)制定的職業暴露指導劑量，現在是60ng/m³(Groux?et?al，Nature?389：737[1997])。操作規程和管理措施的貫徹執行降低了職業暴露工人的過敏反應病例數(參見Sarlo，Ann.Allergy?Asthma?Immunol.，90：32[2003]；和Yamagiwa?et?al，J.Immunol，166：7282[2001])。依據加工原料的不同，每年報道的致敏率從3％到11％的范圍上變化(參見，例如Sarlo，Ann.Allergy?Asthma?Immunol.，90：32[2003]和Robinson?et?al，Toxicol.ScL，43：39[1998])。兩種高度相關的蛋白酶，緩慢芽孢桿菌(B.lentus)枯草桿菌蛋白酶和BPN’Y217L，已知在接觸的操作工人中引起完全不同的致敏率。然而，在職業暴露期間所遇到的蛋白酶數量，與體內和體外對細胞表面標記產生作用并起動Th2反應所必須的酶量不一致。因此，對于與T細胞分化、尤其是Th細胞分化有關的因子，以及關于該過程與蛋白水解活性的關系，很多東西還是未知狀態。