[發(fā)明專利]血液凝固促進(jìn)劑及血液檢查用容器

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200680008053.1
• 申請(qǐng)日: 2006-03-15
• 公開（公告）號(hào): CN101137902A
• 公開（公告）日: 2008-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 源政明;嶋田一彥
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 積水化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社
• 主分類號(hào): G01N33/48
• 分類號(hào): G01N33/48
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務(wù)所
• 代理人: 張平元;趙仁臨

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及血液凝固促進(jìn)劑及血液檢查用容器，更詳細(xì)地，涉及在血清生物化學(xué)檢查等臨床檢查等中使用的血液凝固促進(jìn)劑以及容納有該血液凝固促進(jìn)劑的血液檢查用容器。

背景技術(shù)

在血清生物化學(xué)檢查等臨床檢查等中，想要在更短時(shí)間內(nèi)從血液中采取血清時(shí)，使用血液凝固促進(jìn)劑，并且使用酶作為血液凝固促進(jìn)劑。作為血液凝固促進(jìn)劑使用的酶，是可以將肽鏈中的精氨酸與任意氨基酸殘基的鍵和/或賴氨酸與任意氨基酸殘基的鍵水解的酶，作為代表性的酶，可舉出凝血酶。凝血酶的血液凝固活性比二氧化硅等為代表的無(wú)機(jī)類血液凝固促進(jìn)劑高，可以快速將血液凝固，從而可以在極短時(shí)間內(nèi)得到血清。

但是，凝血酶是不穩(wěn)定的酶，難以穩(wěn)定地保存，難以長(zhǎng)期穩(wěn)定地發(fā)揮高的血液凝固性能。作為穩(wěn)定地保存凝血酶的方法，以往使用冷凍干燥，但為了得到長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定性，有必要用鋁包裝或玻璃容器等保存，并總是維持適當(dāng)?shù)谋４嫘螒B(tài)，特別是用具有透濕性的容器保存時(shí)，難以穩(wěn)定地保存。

另外，作為在水溶液中穩(wěn)定地保存凝血酶的方法，例如，公開了含有糖和氨基酸作為穩(wěn)定化劑的凝血酶水性液態(tài)組合物(參照專利文獻(xiàn)1)。可是，該方法雖然對(duì)于在低溫下短時(shí)間保存是有效的，但并不適用于特別是要求在常溫或常溫以上的過(guò)于苛刻的條件下長(zhǎng)時(shí)間的保存穩(wěn)定性的血液凝固促進(jìn)劑和血液檢查用容器。

另外，作為凝血酶的干燥制劑的穩(wěn)定化技術(shù)，例如，公開了包含糖類、堿性氨基酸和有機(jī)酸鹽的干燥制劑(參照專利文獻(xiàn)2)。

可是，該干燥制劑雖然對(duì)于在低溫下短時(shí)間保存是有效的，但并不適用于特別是要求在常溫或常溫以上的過(guò)于苛刻的條件下長(zhǎng)時(shí)間的保存穩(wěn)定性的血液凝固促進(jìn)劑和血液檢查用容器。另外，由于容易受溫度的影響，因此特別是在具有透濕性的容器中保存時(shí)，在穩(wěn)定性上存在問(wèn)題。

專利文獻(xiàn)1：特開昭64-40433號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)2：特開平2-53732號(hào)公報(bào)

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種血液凝固促進(jìn)劑和容納有該血液凝固促進(jìn)劑的血液檢查用容器，所述血液凝固促進(jìn)劑即使在常溫或常溫以上的過(guò)于苛刻的條件下，長(zhǎng)時(shí)間的保存穩(wěn)定性也優(yōu)異，可以長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定地發(fā)揮高的血液凝固性能。

本發(fā)明的血液凝固促進(jìn)劑的特征在于，包含酶、通過(guò)放射線照射而使上述酶失活的酶失活物、以及β-丙氨酸，所述酶能夠水解肽鏈中的精氨酸與任意氨基酸殘基的鍵和/或賴氨酸與任意氨基酸殘基的鍵。

上述血液凝固促進(jìn)劑由于具有快速使血液凝固的性能，因此具有微小的活性不同就可使血液的凝固性能產(chǎn)生大的變化的性質(zhì)。如果活性高，則血液的凝固過(guò)快而成為不均勻的凝固，離心分離后有可能引起血纖維蛋白向血清中析出。如果活性低，則血液的凝固變慢，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)有可能不能獲得必要的血清。在品質(zhì)上看，優(yōu)選上述血液凝固促進(jìn)劑總是具有一定的活性，希望制成從剛制造后到使用期限內(nèi)活性變動(dòng)盡可能小的血液凝固促進(jìn)劑。

本發(fā)明提供一種從剛制造后其活性變化就很小的品質(zhì)極其優(yōu)異并且穩(wěn)定的血液凝固促進(jìn)劑。

作為上述具有水解性的酶，例如可舉出，胰蛋白酶、凝血酶、蛇毒凝血酶這樣的酶等的絲氨酸蛋白酶；組織蛋白酶B、無(wú)花果蛋白酶(フイシン)等巰基蛋白酶；激肽酶I等金屬蛋白酶等，這些當(dāng)中，優(yōu)選絲氨酸蛋白酶，其中特別優(yōu)選使用凝血酶。凝血酶的制備方法沒(méi)有特別限制，例如可使用從動(dòng)物(人、牛等)的血漿精制而得到的凝血酶。也可以同時(shí)使用2種以上的酶。

本發(fā)明的血液凝固促進(jìn)劑中的上述酶的使用量如果變少，則血液凝固所需要的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，而如果變多，則血液凝固變得過(guò)快而成為不均勻的凝固等，有可能對(duì)檢測(cè)值帶來(lái)不良影響，因此，作為使用量的標(biāo)準(zhǔn)，以活性值計(jì)，優(yōu)選0.1～100IU(國(guó)際單位：以下記為“單位”)，例如，使用凝血酶作為酶時(shí)，其使用量?jī)?yōu)選每1mL血液為0.5～50單位，更優(yōu)選為1～20單位。

在本發(fā)明的血液凝固促進(jìn)劑中，添加通過(guò)放射線照射而使上述酶失活的酶失活物和β-丙氨酸作為上述酶的穩(wěn)定化劑。所謂放射線照射中的放射線，例如可舉出γ射線、電子射線等。也可以同時(shí)使用2種以上的酶失活物。

作為添加到本發(fā)明的血液凝固促進(jìn)劑中的酶失活物的量，優(yōu)選每1單位的凝血酶為0.001～100μg，更優(yōu)選0.01～10μg，最優(yōu)選0.03～5μg。添加量多時(shí)，由于在制造成本上是不利的，因此優(yōu)選可以實(shí)現(xiàn)期望性能的最小必要量。作為酶失活物，可以添加通過(guò)放射線照射而失活的酶失活物，也可以是通過(guò)放射線照射而使添加的具有活性的酶的一部分失活的酶失活物。