[發明專利]命名為番茄Torrado病毒的植物病毒

無效

• 申請號: 200680007452.6
• 申請日: 2006-01-09
• 公開（公告）號: CN101151363A
• 公開（公告）日: 2008-03-26
• 發明（設計）人: J·F·J·M·范登赫費爾;P·C·馬里斯;M·費爾貝克;A·M·杜勒曼斯;R·A·A·范德弗魯格特
• 申請（專利權）人: 德魯伊特種子研發有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C07K14/08;C07K16/10;C12N15/11;C12N15/63;A01H5/08;G01N33/569;G01N33/68;C12Q1/04;C12Q1/68
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司
• 代理人: 林曉紅

1.一種稱作番茄torrado病毒(ToTV)的植物病毒，于2004年11月24日保藏在德國微生物保藏中心，保藏號為ToTV-E01(DSM16999)。

2.一種病毒，其包含選自以下序列組成的組的至少一種核酸序列：SEQ?ID?NO：1，SEQ?ID?NO：2，及與其具有至少50％核苷酸序列同源性的序列。

3.權利要求2的病毒，其中所述病毒與已知稱作“Torrado”、“Marchitez”和/或“巧克力斑病”的番茄疾病相關，和/或其中基于基本如表1所述的分類學描述符的數字分類分析，所述病毒顯示出與其同任何其它病毒的相關性相比，其與權利要求1所述病毒更加密切相關，并且其中所述病毒與導致番茄壞死損害的疾病相關。

4.一種分離的或重組的核酸或其ToTV-特異性片段，包含選自以下序列組成的組的核酸序列：SEQ?ID?NO：1、SEQ?ID?NO：2、與SEQ?IDNO：1或SEQ?ID?NO：2具有至少50％核苷酸序列同源性的序列、其互補鏈和ToTV特異性片段。

5.一種表達載體，其包含權利要求4的核酸。

6.一種多核苷酸，其能在嚴格條件下與權利要求4的核酸雜交。

7.一種可得自權利要求1-3任一項的病毒的分離的或重組的多肽，或其ToTV-特異性片段。

8.權利要求7的多肽，其中所述多肽選自ToTV的23、26和35kDa的衣殼蛋白、解旋酶、RNA依賴性RNA聚合酶及推定的運動蛋白(MP)及其ToTV特異性片段組成的組。

9.一種包含權利要求7或8的多肽的抗原。

10.一種特異性抗權利要求9的抗原的抗體。

11.產生抗ToTV的抗體的方法，所述方法包括如下步驟：

a)提供ToTV病毒，或其蛋白質或肽片段；

b)用所述病毒、其蛋白質或肽片段免疫合適的脊椎動物宿主；和

c)從所述脊椎動物宿主的血液或脾細胞收獲抗所述病毒、其蛋白質或肽片段的抗體。

12.權利要求11的方法，進一步包括以下步驟：選擇產生抗體的脾細胞、將所述脾細胞與永生化雜交瘤細胞系融合，及使得所述雜交瘤融合體產生單克隆抗體。

13.可通過權利要求11或12的方法獲得的抗體。

14.將病毒分離株鑒別為ToTV病毒的方法，包括將所述病毒分離株或其成分與權利要求10或13的抗體反應。

15.將病毒分離株鑒別為ToTV病毒的方法，包括將所述病毒分離株或其成分與權利要求6的多核苷酸反應。

16.檢測樣品中ToTV的存在的方法，包括通過將所述樣品與權利要求6的多核苷酸或權利要求10或13的抗體反應而確定所述樣品中ToTV病毒或其成分的存在。

17.一種鑒別ToTV-抗性植物的方法，所述方法包括如下步驟：

a)將植物或植物部分暴露于感染劑量的ToTV，

b)在所述暴露后，當出現如下任一現象時鑒別所述植物為ToTV-抗性植物：

-所述植物或植物部分中疾病癥狀保持不存在、或者延遲表現、或者至少嚴重程度降低、或者相對于易感對照植物而言是局部化的，和/或

-ToTV病毒或ToTV基因組序列不存在于所述植物或植物部分中，或者ToTV病毒的存在相對于易感對照植物而言至少在數量上降低。

18.權利要求17的方法，其中在步驟b)中所述植物或植物部分中ToTV的存在通過進行權利要求16的方法而確定。

19.一種產生ToTV-抗性植物的方法，包括如下步驟：

a)通過進行權利要求17或18的方法鑒別ToTV-抗性供體植物，

b)將所述ToTV-抗性供體植物與受體植物雜交，和

c)通過進行權利要求17或18的方法從后代植物中選擇抗性植物。

20.權利要求19的方法，其中所述供體植物是茄科(Solanaceae)或葫蘆科(Cucurbitaceae)的植物。