[發(fā)明專利]用于特異地檢測抗性生物的培養(yǎng)基

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200680004645.6
• 申請日: 2006-02-09
• 公開（公告）號: CN101115844A
• 公開（公告）日: 2008-01-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: S·奧倫加;C·羅歇－達(dá)爾貝特;J·佩里;V·尚特佩德里;G·扎姆巴爾迪;N·巴爾
• 申請（專利權(quán)）人: 拜奧默里克斯公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 胡國群

本發(fā)明領(lǐng)域是通過生物化學(xué)方法的微生物學(xué)分析的領(lǐng)域，并且特 別是檢測和鑒定微生物例如尤其是細(xì)菌或酵母的領(lǐng)域。

細(xì)菌對抗生素的抗性是主要的公共衛(wèi)生問題。感染性微生物對治 療的抗性與抗感染分子同時形成，并且目前代表了治療中的主要障礙。 這種抗性負(fù)責(zé)多種問題的根源，包括實(shí)驗(yàn)室檢測的困難，有限的治療 選擇和對臨床結(jié)果的有害影響。

特別地，在過去20年中致病性細(xì)菌抗性的快速且抑制不住的增加 代表了醫(yī)學(xué)中的主要流行問題之一。由這些生物引起的感染是住院時 間延長的原因，并且與治療失敗后的高發(fā)病率和死亡率相關(guān)。

在一個菌株中可以同時涉及幾種抗性機(jī)制。它們一般分為3類：抗 生素不能滲透到細(xì)菌中，通過細(xì)菌的酶系統(tǒng)來使抗生素失活或排出， 以及細(xì)菌靶和抗生素之間缺乏親和力。

就所涉及的物種和抗生素的數(shù)目而言，酶促失活是獲得性抗性的 最常見的機(jī)制。因此，染色體C類頭孢菌素酶目前構(gòu)成革蘭氏陰性菌中 占優(yōu)勢的抗性機(jī)制之一，革蘭氏陰性菌表達(dá)對頭孢菌素類具有抗性的 此類酶。類似地，β-內(nèi)酰胺酶是由某些細(xì)菌表達(dá)的酶，其能夠水解β -內(nèi)酰胺環(huán)(其是β-丙氨酸類家族的抗生素的基本結(jié)構(gòu))的C-N鍵，從 而產(chǎn)生在微生物學(xué)上失活的產(chǎn)物。已開發(fā)了幾種β-內(nèi)酰胺酶抑制劑 (BLI)，例如克拉維酸(CA)、三唑巴坦和舒巴坦，以增加抗微生物 活性并擴(kuò)展與之相關(guān)的β-丙氨酸類的譜系。由于這些抑制劑充當(dāng)β- 內(nèi)酰胺酶的自殺底物，因而防止了抗生素的酶促降解并允許它們有效 對抗最初有抗性的細(xì)菌。然而，由于菌株持續(xù)暴露于抗生素壓力，所 以細(xì)菌通過β-內(nèi)酰胺酶的連續(xù)且動態(tài)的產(chǎn)生而表現(xiàn)出它們的適應(yīng)能 力，所述β-內(nèi)酰胺酶在形成新分子的同時進(jìn)行進(jìn)化。

因此，產(chǎn)生高水平染色體C類頭孢菌素酶(céphalosporinases chromosomiques?de?classe?C?haut?niveau)的革蘭氏陰性細(xì)菌(稱 為Case?HN細(xì)菌)，以及產(chǎn)生廣譜β-內(nèi)酰胺酶(β-lactamases?à spectre?étendu)的革蘭氏陰性細(xì)菌(因而稱為BLSE細(xì)菌)，已成為 日益增加的威脅，特別是因?yàn)樗婕暗募?xì)菌種類數(shù)目日益增加。Case HN和BLSE細(xì)菌不僅對基于第1代和第2代青霉素類和頭孢菌素類的治療 有抗性，還對第3代頭孢菌素類(C3G)(頭孢噻肟CTX、頭孢他啶CAZ、 頭孢泊肟CPD、頭孢曲松CRO)和單環(huán)內(nèi)酰胺類(氨曲南ATM)有抗性。 相反地，7α-甲氧基頭孢菌素類(頭霉素：頭孢西丁、頭孢替坦)和 碳青霉烯類(亞胺培南、美羅培南、厄他培南(ertapenem))一般保 持了其活性。BLSE被β-內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)抑制，這使得能夠?qū)? 它們與其他頭孢菌素酶區(qū)別開。

因此，這些細(xì)菌最常同時表現(xiàn)出針對幾種治療的抗性，這對于建 立相關(guān)治療和避免治療失敗造成了困難。因此，大腸桿菌(Escherichia coli)可以是Case?HN和BLSE。此外，因?yàn)锽LSE陽性腸細(xì)菌有通過菌株 的克隆傳遞或質(zhì)粒結(jié)合轉(zhuǎn)移而散布抗性的趨勢，所以它們代表了傳染 控制方面的問題。在大多數(shù)研究中，大腸桿菌和肺炎克雷伯氏菌 (Klebsiella?pneumoniae)仍是最常見的產(chǎn)生BLSE的物種。然而，幾 年以來，BLSE已大大擴(kuò)展了它們的宿主物種的名單。因?yàn)椋S多腸細(xì) 菌和非發(fā)酵型革蘭氏陰性桿菌(例如銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa))物種也已報道為BLSE的生產(chǎn)者。

除了這些BLSE細(xì)菌外，還可以提及的是金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus?aureus)，它也是形成了許多抗性機(jī)制的致病性細(xì) 菌，例如對于甲氧西林、青霉素、四環(huán)素、紅霉素、萬古霉素的抗性。 屎腸球菌(Enterococcus?faecium)是在醫(yī)院環(huán)境中發(fā)現(xiàn)的另一種多 重抗性的細(xì)菌，它可以抵抗青霉素、萬古霉素和利奈唑胺。結(jié)核分枝 桿菌(Mycobacterium?tuberculosis)通常對異煙肼和利福平具有抗 性。其他病原體提供了某些抗性，例如沙門氏菌屬(Salmonella)、 彎曲桿菌屬(Campylobacter)和鏈球菌屬(Streptococcus)。

因此，從公共衛(wèi)生觀點(diǎn)看來，能夠盡快地鑒定此類微生物和此類 抗性機(jī)制是非常必要的。

一般地，對治療有抗性的微生物的尋找按照下列步驟進(jìn)行：