[發明專利]用于免疫色譜的試驗器具以及使用該器具的半定量方法

有效

• 申請號: 200680003344.1
• 申請日: 2006-01-27
• 公開（公告）號: CN101120253A
• 公開（公告）日: 2008-02-06
• 發明（設計）人: 佐藤尚文;牧野純一
• 申請（專利權）人: 持田制藥株式會社
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 龐立志;李平英

技術領域

本發明涉及使用免疫學色譜(免疫色譜法)，對檢樣中的測定對象物 質進行半定量的試驗器具，以及使用該試驗器具進行的半定量方法。

背景技術

免疫色譜用試驗器具是以含有血清或血漿的血液、尿等體液等作 為檢樣，用于檢測血清檢樣中的抗HBs抗原、檢測血清或血漿檢樣中 的抗梅毒密螺旋體抗體、判定血型、檢測尿檢樣中的人絨毛膜促性腺 激素(hCG)等。

圖5是以往的免疫色譜用試驗器具的一個例子的示意圖，圖5(a) 是免疫色譜用試驗器具的平面圖，圖5(b)是其側面圖。圖5(c)是與圖 5(a)同樣的圖，但表示使用后的免疫色譜用試驗器具。

圖5(a)和(b)所示的免疫色譜用試驗器具11中，在片狀的基體12 上設置樣品墊13。使用試驗器具11時，將該樣品墊13浸漬在作為測 定對象的檢樣中。被樣品墊13吸收的檢樣由于毛細管現象而向與該樣 品墊13相鄰接設置的試劑墊14移動。試劑墊14中擔載有標記抗體或 抗原。

被樣品墊13吸收的檢樣到達試劑墊14，則擔載于試劑墊14的標 記抗體或抗原溶出。檢樣中的測定對象物質與標記抗體或抗原形成復 合物。含有這些物質的檢樣通過毛細管現象向與試劑墊14相鄰接設置 的多孔體15移動。到達多孔體15的復合物通過毛細管現象向下游方 向移動(圖中，以樣品墊13一側為上游一側)。

多孔體15上設置有固定了抗體或抗原的反應區域16。通過毛細管 現象而移動至多孔體15中的抗原、抗體或上述復合物被反應區域16 捕獲。如圖5(c)所示，該捕獲可通過在該區域16的顯色16’確認。這樣， 通過目視即可確認檢樣中是否有測定對象物質。

在試驗器具11的更下游一側，設置有吸收檢樣中其它成分和未被 捕獲的測定對象物質等的吸收墊17。

使用圖示的免疫色譜用試驗器具，還可以對檢樣中的測定對象物 質進行半定量。例如，設置多個對各種測定對象物質的檢測靈敏度不 同的反應區域16，根據產生顯色16’的區域16的數目，可以對檢樣中 測定對象物質進行半定量。

上述免疫色譜用試驗器具、以及使用該試驗器具檢測檢樣中的測 定對象物質的方法、或對該測定對象物質進行半定量的方法記載于專 利文獻1-6中。

專利文獻1中，記載的是使用以免疫色譜法為原理的片狀試驗器 具，對液體中的抗原或抗體進行測定的方法。但是，該文獻中并沒有 公開、暗示對抗原或抗體進行半定量，也未公開、暗示在多孔體上具 有顯示標準顯色的區域的試驗器具。

專利文獻2中記載的是使用色素標記的抗原或抗體測定液體中是 否存在抗原或抗體的試驗器具。但是，該文獻中并未公開、暗示對抗 原或抗體進行半定量，也未公開、暗示在多孔體上具有顯示標準顯色 區域的試驗器具。

專利文獻3記載的是用于對檢樣溶液中的抗原或抗體進行定量的 試驗器具。該試驗器具的特征在于：由上游至下游具有多個固定有逐 漸增加的量的捕獲試劑的反應區域，根據顯色的反應區域數目對分析 對象進行定量。其必須要件是反應區域為多個，但設置多個反應區域 使得制備步驟繁雜，不優選。另外，對于該試驗器具，并未公開、暗 示在多孔體上具有顯示標準顯色的區域。

專利文獻4記載的是用于對檢樣溶液中的抗原或抗體進行半定量 的試驗器具。該試驗器具沿顆粒標記的抗原或抗體、檢樣溶液的展開 方向具有排成一列的多個反應區域，通過夾層法的原理，半定量地推 測抗原或抗體的量。其必須要件是反應區域為多個，但設置多個反應 區域使得制備步驟繁雜，不優選。另外，對于該試驗器具，并未公開、 暗示在多孔體上具有顯示標準顯色的區域。

專利文獻5記載的是：使用在同一個膜上具備呈現一定色調的部 分和呈現檢樣濃度依存性的色調的部分的免疫學色譜分析片，向該免 疫學色譜分析片上注入未知濃度的檢樣，進行色譜展開，然后對呈現 一定色調的部分的色調和呈現檢樣濃度依存性色調的部分的色調進行 光學濃度測定或者目視讀取，以測定未知檢樣的濃度的方法。該方法 的特征在于：在同一個膜上具有對照顯色區域和檢樣濃度依存性顯色 區域，但該對照顯色區域是使用與檢樣不同的固定化抗體和標記抗體 進行顯色，步驟繁雜，同時調節成相當于特定檢樣濃度的顯色并不容 易。