[發明專利]用于SCI和PNT再生的透明質酸衍生物和神經干細胞

無效

• 申請號: 200680002504.0
• 申請日: 2006-01-18
• 公開（公告）號: CN101106955A
• 公開（公告）日: 2008-01-16
• 發明（設計）人: A·帕維西奧;A·維斯科威;F·格萊因;M·韋爾伽
• 申請（專利權）人: 菲迪亞高級生物聚合物有限公司
• 主分類號: A61F2/02
• 分類號: A61F2/02
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所
• 代理人: 黃革生;林柏楠

技術領域

本發明涉及移植支架后脊髓損傷和外周神經損傷的再生，所述支架由 透明質酸衍生物單獨制成或者在其中接種了神經干細胞。

發明背景

透明質酸(HA)是圍繞正在遷移和增殖細胞的細胞外基質的主要成分。 它是非常長并且帶負電荷的多糖，其每個分子包含多達50,000個由葡糖醛 酸和N-乙酰葡萄糖胺組成的簡單二糖的重復。事實上，重點要提及的是在 體內它的衍生物成功應用于創傷愈合、糖尿病性潰瘍、白斑治療、預防腹 腔鏡檢粘附、抗黏附表面包被、軟骨再生。

一類HA衍生物被稱為自交聯的多糖。這種情況下，通過產生交聯鍵 來獲得聚合物的穩定性，而沒有另外的化學物質涉及乙酰透明質酸鏈的橋 接。沿著多聚鏈，以相同或不同乙酰透明質酸分子的羥基直接酯化某一百 分比的葡糖醛酸羧基，從而完成穩定作用。這些材料是高度粘性的懸浮液， 其為可變濃度在30到60mg/mL之間的自成網微粒懸浮于無菌蒸餾水中。

獲得HA衍生物的可選方法涉及偶聯反應的使用，其中通過化學反應 (例如酯化作用、硫酸化作用、酰胺化作用等等)修飾多糖的特殊官能團(例 如羧基、羥基、N-乙酰基)。

所有這些HA修飾的生物材料在體內通過酶活性或水解作用被自發地 降解，形成HA分子的片段和先前結合的官能團(苯甲基或乙醇、酰胺等)。

HA衍生物的合成通常涉及兩步驟的操作：HA四價鹽的制備和其在受 控溫度下、在非質子溶劑中與一種化學劑的后繼反應(酯化、酰胺化等)。 多種醇可用于酯化作用(脂肪族、芳香脂肪族(araliphatic)、脂環族和其它)。 根據EP?1095064能夠制備酰胺化的HA。例如從EP?216453已知透明質酸 酯。從EP?702699已知HA的O-硫酸化衍生物。

從EP?1339753已知HA的過羧酸酯化衍生物。

根據在化學反應中取代的化學基團(以及取代的百分比)，產生的生物 材料能夠提供完全不同的機械性質：例如，在酯化的HA情況下，通過增 加疏水性和降低羧基的負電荷來增加停留時間。

已經證明角質形成細胞、成纖維細胞、軟骨細胞、間充質干細胞、內 皮細胞、肝細胞、urethlial細胞和神經細胞能在HA修飾的生物材料上有 效地增殖。然而，絕大多數前面提到的交聯的HA衍生物表現為高度水合 的材料，其為非細胞黏附的，因而最初被考慮用作預防外科粘連的可再吸 收材料。

我們的第一個組織工程方法是測試完全可生物降解生物材料的這一重 要的多樣性?；贖A的產品已經獲得歐共體的臨床應用許可，且三種產 品已經被FDA認可。

SCI(脊髓損傷)可以表征為受損部位周圍的組織破壞、不完全修復和 創傷愈合持續過程的結果。顯著的身體證據證明SCI涉及自始至終的三個 時期：急性期、續發期和慢性期。最初的中心損傷進行性地擴展，并且SCI 發展進入其慢性期。白質表明導致傳導缺陷的部分或全部的脫髓鞘作用。 大約25％的SCI患者發展出中央定位的囊，其進行性擴展導致脊髓空洞 癥。

更多的組織病理學特征包括灰質分解、結締組織沉積和神經膠質增生。 損傷的范圍和位置決定整體上的神經缺陷、過度興奮性的發展和慢性疼痛 綜合征。

如果目的研究的主要領域是對損傷的生理學應答或者繼發性損傷的病 理生理學，那么研究者可以選擇挫傷模型，因為其近似于人類SCI。然而， 在挫傷模型中對再生軸突的清楚證明，尤其是對多余和再生軸突的描述提 出了新的挑戰。

對于運動感覺途徑恢復的行為研究和統計評價也是挫傷模型非常關鍵 的步驟，其中動物對照組(受損但是未治療)自發地恢復部分其損失的神經 連接。

如果應用設備，部分或完整的橫切模型可能最適合于設備安置。對于 某種實驗性的范例，可以設計模型的組合。例如，探測軸突再生的實驗設 計早期可以利用橫切模型清楚證明再生的軸突和鑒別最有希望的療法，隨 后能夠在挫傷模型中通過分析技術對其測試。

在橫切模型中，從再生的軸突中區分多余軸突的能力不是重點。對于 某一應用，單側半切除損傷是對于完全橫切的可行的備選。該方法的主要 優點是保留一側脊髓的結構完整性和功能。單側脊髓通常保留足夠維持膀 胱和腸的功能，其可以減少對手術動物的照料。