[發(fā)明專利]多孔微球的用途及裂解液以及裂解液的使用方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810111626.8
• 申請日: 2018-02-05
• 公開（公告）號: CN108531563A
• 公開（公告）日: 2018-09-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 溫維佳;楊小雪;高一博;張李娟;佟蕊
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市尚維高科有限公司
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686
• 代理公司: 石家莊旭昌知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 13126
• 代理人: 張會強

本發(fā)明提供了一種多孔微球的用途及裂解液以及裂解液的使用方法。多孔微球的用途，是應(yīng)用于對生物樣本核酸進行裂解的裂解液中，所述生物樣本為血液或唾液或咽拭子。將多孔微球，應(yīng)用在裂解液中，以在裂解液對生物樣本裂解后，能夠有效的將裂解后的細胞碎片、蛋白等阻礙后續(xù)PCR反應(yīng)的物質(zhì)進行吸附、沉淀，從而減小這些物質(zhì)對后續(xù)反應(yīng)的影響，以使裂解后的、含有裂解出的DNA或RNA的上清液，可以直接用于后續(xù)的PCR反應(yīng)中，有效的提高了使用效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基因快速檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種多孔微球的用途；同時，本發(fā)明還涉及應(yīng)用該多孔微球的裂解液，以及該裂解液的使用方法。

背景技術(shù)

細菌和病毒感染威脅著人類的健康。隨著人口密度不斷上升，呼吸道病原體、食源性致病菌的傳播變得更將廣泛。隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展以及對于快速、準確的疾病診斷的需求，分子生物檢測技術(shù)被越來越多運用于病原體診斷中。分子生物檢測技術(shù)分為很多種，傳統(tǒng)的檢驗方法包括分離培養(yǎng)法，經(jīng)過將病原體分離出來，在培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，通過血凝實驗等確認病原體。但傳統(tǒng)方法操作時間較長，對實驗人員操作要求較高，并且特異性比較差。分子生物技術(shù)中，實時熒光PCR技術(shù)經(jīng)常被運用于針對病原體基因進行擴增，而后采集信號，這種技術(shù)可以快速而又準確的確定病原體種類，甚至對病原體定量。但是用于實時熒光PCR技術(shù)中的模板必須是經(jīng)過提取后的DNA樣本。因此，各種生物樣本采集后必須提取DNA或者RNA處理后再進行PCR反應(yīng)。

一般提取DNA或者RNA需要對目標(biāo)樣品進行消化或是裂解，需要用到比較強效的、例如鹽酸胍或者表面活性劑的解離液，而后利用有機溶劑將DNA與其他雜質(zhì)分離，最后將DNA沉淀。一些其他的提取技術(shù)包括用膜將DNA分離后，進行洗脫，或者用磁珠將DNA富集后進行洗脫。這些方法均可以獲得比較純凈的DNA樣品，排除雜質(zhì)的干擾。然而對于時間和操作的要求也比較高，往往需要花費較長時間由專業(yè)人士在實驗室中操作完成。另一方面，在對病原體DNA或者RNA進行純化過程中，有時由于樣品量或者載量的限制，在純化過程中會損失掉一部分DNA樣本，如果在樣品量少或者載量低的情況下，很容易造成提取效果不佳，后續(xù)PCR實驗失敗。

為了盡可能準確的檢測出樣品中的病原體基因，市場上陸續(xù)推出了針對于少量病毒載量所用的膜，以及具有特異性富集的磁珠。但是這些產(chǎn)品成本較高，而且操作也較為復(fù)雜，很大程度上限制了應(yīng)用場景。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明旨在提出一種多孔微球的用途，以提高裂解液裂解生物樣品后的使用效果以及使用效率。

為達到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的：

一種多孔微球的用途，所述多孔微球應(yīng)用于對生物樣本核酸進行裂解的裂解液中，所述生物樣本為血液或唾液或咽拭子。

進一步的，所述多孔微球應(yīng)用于對所述裂解液裂解所述樣本產(chǎn)生的雜質(zhì)的吸附。

多孔微球，也即高分子多孔微球，是以苯乙烯和丙烯酸酯為單體，加入二乙烯苯為交聯(lián)劑，甲苯、二甲苯為致孔劑，它們相互交聯(lián)聚合形成了多孔骨架結(jié)構(gòu)。聚合物形成后，致孔劑被除去，在樹脂中留下了大大小小、形狀各異、互相貫通的孔穴。

本發(fā)明的設(shè)計思想，是將多孔微球，應(yīng)用在裂解液中，以在裂解液對生物樣本裂解后，能夠有效的將裂解后的細胞碎片、蛋白等阻礙后續(xù)PCR反應(yīng)的物質(zhì)進行吸附、沉淀，從而減小這些物質(zhì)對后續(xù)反應(yīng)的影響，以使裂解后的、含有裂解出的DNA或RNA的上清液，可以直接用于后續(xù)的PCR反應(yīng)中，有效的提高了使用效率。

本發(fā)明的另一目的，在于提供一種裂解液，以在對生物樣本裂解后，能夠直接進入后續(xù)的PCR反應(yīng)，提高裂解液的使用效率。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的裂解液，用于對生物樣本的裂解，所述生物樣本為所述樣本為血液或唾液或咽拭子，所述裂解液中添加有多孔微球。

進一步的，所述多孔微球呈游離態(tài)的存在于所述裂解液中。