[發明專利]一種對變形鏈球菌電擊轉化方法無效
| 申請號： | 200610147744.1 | 申請日： | 2006-12-22 |
| 公開（公告）號： | CN101205546A | 公開（公告）日： | 2008-06-25 |
| 發明（設計）人： | 黃正蔚;劉正 | 申請（專利權）人： | 上海交通大學醫學院附屬第九人民醫院 |
| 主分類號： | C12N15/87 | 分類號： | C12N15/87;C12N1/21;C12R1/46 |
| 代理公司： | 上海翼勝專利商標事務所 | 代理人： | 翟羽 |
| 地址： | 20001*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 變形 鏈球菌 電擊 轉化 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種對變形鏈球菌電擊轉化方法，包括以下步驟：
(1)提供變形鏈球菌UA159株、外源性DNA、電轉緩沖液；
(2)變形鏈球菌感受態細胞的制備；
(3)電擊轉化感受態細胞。
2.根據權利要求1所述的電擊轉化方法，其特征在于：步驟(2)中變形鏈球菌接種至BHI培養基內，于37℃搖床孵育至吸光度OD660nm＝0.5，加入甘氨酸溶液。
3.根據權利要求2所述的電擊轉化方法，其特征在于：甘氨酸溶液濃度為8％-12％。
4.根據權利要求3所述的電擊轉化方法，其特征在于：甘氨酸溶液濃度為10％。
5.根據權利要求1所述的電擊轉化方法，其特征在于：步驟(1)中外源性DNA是pGL3?basic質粒。
6.根據權利要求1所述的電擊轉化方法，其特征在于：步驟(1)中電轉緩沖液EPB配制如下：5mM磷酸鉀，0.4M山梨醇，10％甘油，調節pH至4.5，4℃下保存，使用時冰浴中預冷。
7.根據權利要求1所述的電擊轉化方法，其特征在于：步驟(3)中電轉條件：1.6KV，200Ω，25μF。
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