[發(fā)明專利]測定工業(yè)冷循環(huán)水中細(xì)菌總數(shù)的簡便方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200610147720.6
• 申請日: 2006-12-21
• 公開（公告）號: CN101205554A
• 公開（公告）日: 2008-06-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉亭伶
• 申請（專利權(quán)）人: 上海寶鋼工業(yè)檢測公司
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06
• 代理公司: 上海天協(xié)和誠知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所
• 代理人: 張恒康

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及測定水中細(xì)菌總數(shù)的方法，尤其涉及一種測定工業(yè)用水中細(xì)菌總數(shù)的方法。

背景技術(shù)

細(xì)菌滋生是影響工業(yè)循環(huán)水質(zhì)量的一個主要問題。在菌藻大量滋生、繁殖的情況下，對冷卻水系統(tǒng)的后果是十分嚴(yán)重的。其主要危害形式就是形成生物粘泥和對系統(tǒng)材質(zhì)的腐蝕，進而導(dǎo)致水質(zhì)惡化、管道堵塞、設(shè)備腐蝕和系統(tǒng)傳熱效率下降。主要應(yīng)對措施就是使用多種氧化和非氧化殺菌劑進行綜合殺菌處理。而有效地進行殺菌處理的基礎(chǔ)就是及時地掌握循環(huán)水系統(tǒng)細(xì)菌滋生情況，即迅速準(zhǔn)確地監(jiān)測水系統(tǒng)的細(xì)菌總數(shù)。

目前，“GB/T14643.1工業(yè)循環(huán)冷卻水中粘液形成菌的測定“平皿計數(shù)法”是國標(biāo)中允許的檢測工業(yè)冷循環(huán)水中細(xì)菌總數(shù)的唯一標(biāo)準(zhǔn)方法。平皿計數(shù)法的測定步驟為：以無菌操作方法吸取1mL粘液制成的水樣，注入盛有9mL滅菌水的試管中，混勻成1∶10的稀釋液。然后再吸取1∶10的稀釋液1mL，注入盛有9mL滅菌水的試管中，混勻成1∶100的稀釋液，按同法稀釋成1∶1000、1∶10000稀釋液等備用。用滅菌管吸取2～3個適宜濃度的稀釋液1mL，分別注入滅菌的培養(yǎng)皿中，在20分鐘之內(nèi)傾注10～15mL已融化并冷卻到45℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，立即旋搖培養(yǎng)皿；使水樣與培養(yǎng)基充分混合，帶冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿翻轉(zhuǎn)過來，底面向上，放入37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)72小時，選擇合適密度的平皿，操作人員手動進行菌落計數(shù)。

平皿培養(yǎng)法雖然比較穩(wěn)定、可靠。但其需要在29±1℃條件下培養(yǎng)72小時，分析時間比較長；同時需對多個梯度進行稀釋培養(yǎng)，工作量也比較大。夏季細(xì)菌滋生迅速，如化工冷循環(huán)系統(tǒng)的硝化細(xì)菌滋生時，只需數(shù)天時間就會將系統(tǒng)中的亞硝酸鹽緩蝕劑轉(zhuǎn)化殆盡。利用國標(biāo)分析方法進行細(xì)菌監(jiān)測，分析周期滯后于現(xiàn)場要求的快速、基本準(zhǔn)確的要求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在解決國標(biāo)方法分析工作量大、速度慢，滯后于現(xiàn)場要求的缺陷，提供一種測定工業(yè)冷循環(huán)水中細(xì)菌總數(shù)的簡便方法。本發(fā)明的測定簡便方法能減少工作量，較快地測定細(xì)菌量，簡化工作程序。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：

一種測定工業(yè)冷循環(huán)水中細(xì)菌總數(shù)的簡便方法，它按照下述步驟執(zhí)行：

步驟一：根據(jù)GB/T?14643.1工業(yè)循環(huán)冷卻水中粘液形成菌的測定的平皿計數(shù)法，制備一系列細(xì)菌濃度的試樣平皿；

步驟二，對步驟一制備的試樣平皿拍攝顯微照片作為標(biāo)準(zhǔn)照片；

步驟三，直接用無菌操作方法用滅菌刻度吸液管吸取1ml被測工業(yè)水粘液制成的水樣，注入到滅菌后的培養(yǎng)皿中；

步驟四，在步驟三的培養(yǎng)皿中，傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，立即旋搖培養(yǎng)皿，使水樣與培養(yǎng)基充分混合，冷卻；

步驟五，將步驟四中經(jīng)過冷卻的培養(yǎng)皿翻過來，底面向上，放入37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時，從培養(yǎng)箱取出培養(yǎng)皿，在顯微鏡下觀察并參照步驟二獲得的標(biāo)準(zhǔn)照片比較確定細(xì)菌濃度數(shù)量級。

所述的測定工業(yè)冷循環(huán)水中細(xì)菌總數(shù)的簡便方法的步驟四和步驟三之間的時間間隔小于20分鐘。

所述的測定工業(yè)冷循環(huán)水中細(xì)菌總數(shù)的方法的步驟一當(dāng)中所述的細(xì)菌濃度系列為10⁰個/mL、10¹個/mL、10²個/mL、10³個/mL、10⁴個/mL和10⁵個/mL。

所述的測定工業(yè)冷循環(huán)水中細(xì)菌總數(shù)的簡便方法的步驟四所用的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基為10～15mL已融化并冷卻到45℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

所述的測定工業(yè)冷循環(huán)水中細(xì)菌總數(shù)的簡便方法，當(dāng)被測水樣的細(xì)菌濃度＞10⁶個/mL時，在步驟三之前需要對被測水樣按照GB/T?14643.1工業(yè)循環(huán)冷卻水中粘液形成菌的測定的平皿計數(shù)法中的稀釋方法作一次稀釋。

所述的測定工業(yè)冷循環(huán)水中細(xì)菌總數(shù)的簡便方法，在第二次測定時候，只需從步驟三開始。