[發明專利]預防與治療肺癌細胞侵襲轉移的反義寡核苷酸的結構及用途

無效

• 申請號: 200610146013.5
• 申請日: 2006-11-03
• 公開（公告）號: CN101113159A
• 公開（公告）日: 2008-01-30
• 發明（設計）人: 江其生
• 申請（專利權）人: 江其生
• 主分類號: C07H21/02
• 分類號: C07H21/02;A61K48/00;A61P35/00
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本發明涉及生物工程藥物領域，具體地說是一種針對uPA基因的反義寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide，ASODN)的序列結構及其成為治療肺癌等惡性腫瘤細胞侵襲轉移的新型藥物。

惡性腫瘤細胞的侵潤轉移是一個多因素參與的復雜過程，但啟動這一過程的首要條件和必需步驟是 腫瘤細胞穿越基底膜侵入周圍基質，因此如能在此階段控制腫瘤細胞侵潤，就有可能阻止或抑制腫瘤轉 移。資料顯示，腫瘤侵入周圍基質與腫瘤細胞分泌基質降解酶溶解基質引起腫瘤周圍組織“再塑” (remodeling)密切相關。絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶和基質金屬蛋白酶等是目前認為較為重要的 三類基質降解酶。其中與多種類型惡性腫瘤侵潤轉移相關的一種絲氨酸蛋白酶-尿激酶型纖溶酶原激活 物(urokinase?plasminogen?activator，uPA)近來頗為引人關注。

1976年Astedt和Holmberg即發現癌細胞可產生及釋放uPA，近來Gershtein等發現在檢測的所有 乳腺癌、卵巢癌、非小細胞肺癌患者腫瘤組織中uPA表達均明顯升高；Zhang等證實uPA在肝癌組織中 高表達；其他作者也相繼報道了uPA在胃癌、結腸癌、食道癌、前列腺癌、胸腺癌、膀胱癌、頭頸部鱗 癌等腫瘤中高表達，并發現uPA活性高低與部分腫瘤(如：非小細胞肺癌、胃癌、乳腺癌、結腸癌等) 大小、分化狀態、轉移能力及患者臨床分期、生存周期長短等明顯相關，可作為判斷腫瘤惡性程度和患 者預后狀況的重要指標；實驗研究亦發現轉染uPA基因可促進腫瘤轉移，而應用uPA抑制劑或抗uPA 抗體可阻止或抑制腫瘤細胞侵潤轉移。上述這些涵蓋基礎與臨床，涉及正反兩方面的研究資料均說明 uPA高表達在腫瘤細胞侵潤轉移中發揮著重要作用。因此，以uPA為靶點降低其表達水平就有可能成為 抑制腫瘤侵襲轉移的一種手段(Han?B，et?al.Oncol?Rep.2005；14(1)：105-112.Dano?K，et?al.J.Thromb Haemost.2005；93(4)：676-681.Duffy?MJ..Curr?PharmDes.2004；10(1)：39-49).

反義寡核苷酸(ASODN)在導入細胞后能與靶基因mRNA結合形成DNA-RAN雜合體，封閉或抑制 靶基因復制或表達，從而減少其“下游”產物-蛋白或酶的表達水平。目前ASODN在惡性腫瘤、病毒感染 性疾病(肝炎，流感等)、某些遺傳性疾病及其它基因表達異常所致疾病的實驗治療中已取得較理想療效， 且與傳統治療藥物相比彰顯出作用時間長、作用特異性強、毒副作用小等優點，自1998年8月美國FDA 批準首個抗病毒反義藥物進入床應用以來，國外已有一批反義藥物進入臨床II-III期試驗或臨床試用 (Joensen?H，Ann?Med.?2000，32(1)：31-33.Morris?MJ，et?al.Clin?CancerRes.2002，8(3)：679-683.Corey?DR. Telomerase?inhibition，oligonucleotides，and?clinical?trials.Oncogene?2002，21(4)：631-637)。

人uPA?mRNA為2304bp(NM-002658)，利用生物信息學軟件可模擬uPA?mRNA二級結構，作為設 計ASODN的重要依據。但由于uPA?mRNA在細胞內的狀態難以預測，因此所設計的ASODN能否接近 uPA?mRNA并與之雜交以封閉或減少uPA表達尚有待體內外實驗做進一步篩選與評價。

本發明的目的在于尋找能特異高效抑制肺癌細胞侵潤轉移的新型反義藥物，即對uPA?mRNA表達有 較好抑制效應的ASODN及能改善其生物活性的化學修飾衍生物。