[發明專利]一種可原位同時檢測多種常見小分子藥物的酶標芯片法無效
| 申請號: | 200610145038.3 | 申請日: | 2006-11-30 |
| 公開(公告)號: | CN101078730A | 公開(公告)日: | 2007-11-28 |
| 發明(設計)人: | 杜宏武;魏玉芝;李紹旭 | 申請(專利權)人: | 杜宏武;魏玉芝;李紹旭 |
| 主分類號: | G01N33/94 | 分類號: | G01N33/94;G01N33/547 |
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| 地址: | 100071北京*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 原位 同時 檢測 多種 常見 分子 藥物 芯片 | ||
1.一種在96孔酶標板孔底粘貼點樣后薄膜進行檢測生物分子的新型裝置。特征為采用三維高分子多聚物薄膜或無機聚合物膜,將生物探針分子用機械手按照設計點陣進行點樣,經切割后粘貼于酶標板孔底,用抗體、配體、配對核酸等進行特異識別,然后用原位顯色方法結合圖像采集設備判定被測物的濃度。
2.根據權利要求1所述的薄膜包括聚丙烯酰胺凝膠、聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜)、硝酸纖維素膜(NC膜)、聚四氟乙烯、聚苯乙烯塑料、納米陶瓷、瓊脂糖凝膠等。
3.根據權利要求1所述的點樣采用機械手進行,樣品點直徑可以介于75微米到300微米之間,每個酶標孔可以容納的樣品點為1-81個。
4.根據權利要求1所述的薄膜經過點樣后進行機械切割,制得與酶標孔直徑吻合的均勻的圓形芯片,使用粘貼方式將圓形芯片粘貼于酶標板底部,制成酶標芯片。
5.根據權利要求1所述的檢測方法為原位顯色。加入被檢測樣本,然后通過特異抗小分子藥物抗體和辣根過氧化物酶(HRP)等的標記二抗或者是標記核酸,利用直接法或競爭抑制法進行檢測。采用可以原位呈色反應的底物,如二胺基聯苯胺(DAB)等,使陽性點出現有顏色的斑點(直接法)或使陽性點出現無顏色的斑點(競爭抑制法)。
6.根據權利要求1所述的圖像采集設備包括數碼相機、CCD等,根據灰度值和配套軟件,判定檢測樣品中含有代測生物分子的濃度。
7.根據權利要求1所述的方法采用通用的96孔酶標板,因此在加樣和操作上易于被人接受并廣泛推廣應用。同時又增加了生物芯片高通量的優勢,通過機械手在一個孔中同時點多個樣品點,同時檢測多種代測物質,使得酶標板的檢測通量大大提高。
8.根據權利要求1所述的方法可以適合多種檢測領域,如常見毒品、自身免疫原、腫瘤標志物、細胞因子系列的檢測等。
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