[發明專利]香蕉枯萎病菌分子檢測基因及其檢測方法

無效

• 申請號: 200610135361.2
• 申請日: 2006-12-22
• 公開（公告）號: CN101205558A
• 公開（公告）日: 2008-06-25
• 發明（設計）人: 陳慶河;翁啟勇;趙健;李本金;蘭成忠;邱榮洲;呂新
• 申請（專利權）人: 福建省農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司
• 代理人: 王義星

1.一種香蕉枯萎病菌分子檢測基因，其特征在于具有如下所述的基因序列的香蕉枯萎病菌的特異檢測基因。

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??1??TGCCGAGCTG?AGTATAAAGA?CTTTACTGAT?GTACATATGA?ATGACTCGTG

?51??GCACGGTACT?TGCTGTGCGG?GGATCATCCA?GGGGATGTAT?GAGGAGGCTA

101??GGCTATACAT?CGCAAGGGTC?TTTGAACGGG?ACCACGCGGA?TGAGATTGAA

151??GGACCTCTTC?GAATGGCAAG?AGTCTGTTTC?CGATACCTGT?GAAGTCGCAG

201??TTTATACTGA?ATGTTCAATT?AGGCTATTCA?CTGGGCTATT?GAGCCACCGC

251??GCTCCGTCGA?CATCATCAGC?ATCTCCGCTG?GCTTCCGAAA?CTACTCCAAG

301??GAACTAGACG?ACGCTGTCAC?AAGAGCCAAA?GCTTCTGGTG?TTCTTGTCAT

351??AGCTGCAGCG?TCAAACTGGC?AGAACAAAAA?TACCGTCGCA?TTCCCAGCTC

401??GGCA

2.一種香蕉枯萎病菌的檢測基因的PCR引物，其特征在于PCR引物序列為：

FOC-F：5’-ATA?TGA?ATG?ACT?CGT?GGC?ACG-3’；

FOC-R：5’-GCT?GGG?AAT?GCG?ACG?GTA?T-3’。

3.一種香蕉枯萎病菌分子檢測基因的檢測方法，包括：

1)從被所述的香蕉枯萎病菌、被香蕉枯萎病菌感染的香蕉組織和存在香蕉枯萎病菌的土壤中提取DNA；

2)以該DNA為模板用一對引物FOC-F/FOC-R通過聚合酶鏈式反應(PCR)擴增出香蕉枯萎病菌的特異基因產物；

3)然后取適量步驟2)的PCR擴增產物用瓊脂糖電泳分離，經溴化乙錠染色后于紫外燈下觀察，根據擴增產物的大小判定結果，如果能特異性地擴增出364bp的產物，即可判斷所述的香蕉植株組織或土壤樣品中存在了香蕉枯萎病菌。

4.根據權利要求2所述的香蕉枯萎病菌的檢測基因的PCR引物，其特征在于其靈敏性檢測巢式PCR的引物及其序列為：

FOC-NF：5’-GAT?GAG?ATT?GAA?GGA?CCT?CTT?CG-3’；

FOC-NR：5’-TCT?AGT?TCC?TTG?GAG?TAG?TTT?CGG-3’。