[發明專利]一種丹參酮ⅡA化學對照品的分離制備方法

無效

• 申請號: 200610135121.2
• 申請日: 2006-12-27
• 公開（公告）號: CN101210041A
• 公開（公告）日: 2008-07-02
• 發明（設計）人: 肖紅斌;高明哲
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C07J73/00
• 分類號: C07J73/00;B01D15/08
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司
• 代理人: 許宗富;周秀梅

技術領域

本發明涉及一種從丹參提取物中分離獲得純度大于98％的丹參酮IIA化學對照品的制備方法。

背景技術

丹參是我國傳統藥學中常用藥物之一，其制劑在臨床上應用非常廣泛，丹參具有活血調經，祛瘀止痛，養心安神的功效，丹參酮IIA是丹參中主要藥效成分之一，是中國藥典中規定的含量測定成分。研究表明丹參酮IIA對多種心腦血管疾病及皮膚病征有良好治療效果，廣泛應用于醫藥和化妝品領域。

目前丹參酮IIA的分離方法主要為正相色譜法、大孔吸附樹脂法、超臨界二氧化碳萃取法和高速逆流色譜法。

正相色譜法使用硅膠作為填料，以甲醇-氯仿作為洗脫液，可以獲得98純度的丹參酮IIA，在分離過程中容易產生不可逆吸附，具有樣品易損失，易污染，洗脫液毒性大的缺點。大孔吸附樹脂法使用不同比例乙醇洗脫，具有上樣量大，毒性小的特點，但只能獲得的是丹參酮IIA含量低的混合物。超臨界二氧化碳萃取具有綠色環保的特點，同時可以避免高溫分解和氧化，有利于保持丹參酮IIA的化學穩定性。但由于缺少在線監測手段，丹參酮IIA的純度難以穩定達到98％以上。高速逆流色譜法不需使用固定填料，所以沒有不可逆吸附，具有樣品無損失，無污染的特點，目前高速逆流色譜多局限于實驗室規模，難以大量獲得98％純度以上丹參酮IIA化學對照品。

發明內容

為克服現有技術的缺陷，優化分離條件，本發明的目的在于提供一種分離時間短、分離效果好、產品純度高(純度在98％以上)的丹參酮IIA化學對照品的分離制備方法。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案：分離制備方法，以重量含量50～97％的丹參酮IIA提取物為原料，以制備型高效液相色譜為分離手段，以甲醇-水溶液為洗脫體系，具體步驟為：

(1)樣品預處理：將重量含量50～97％的丹參酮IIA提取物用甲醇、乙醇或氯仿溶液溶解，配置成重量濃度為8～60mg/ml的丹參酮IIA提取物溶液，經0.22～0.45μm微孔濾膜過濾；

(2)色譜柱處理：高效液相色譜柱選擇制備型高效液相色譜柱，以5-20倍柱體積的洗脫體系溶液平衡色譜柱；洗脫體系溶液為甲醇水溶液，其體積濃度為60～85％；

(3)進樣：將過濾后的樣品溶液通過六通閥或泵進樣，進樣體積為1～100ml；

(4)洗脫：采用洗脫體系溶液洗脫色譜柱，流速控制在10～600ml/min，在線紫外監測，收集含有丹參酮IIA的洗脫液；

(5)丹參酮II?A化學對照品的獲取：減壓濃縮所收集到的丹參酮IIA洗脫液，至干，即獲得純度大于98％的丹參酮IIA。

丹參酮IIA的結構式如下：

所述制備型高效液相柱可以選用商品化或自己裝填的制備型高效液相柱；其填料可為C8或C18鍵合相填料；自己裝填的制備型高效液相柱裝填方式為濕法裝柱，制備型高效液相柱的填料粒徑可為5-20μm，柱效在2000以上；在線紫外監測，其監測波長為220nm～290nm；丹參酮II?A洗脫液收集后，減壓濃縮，濃縮溫度控制在55～70℃。

以本方法從丹參提取物中分離丹參酮IIA化學對照品具有如下優點和進步：

1.本發明以制備型高效液相為分離手段，采用5～20μm?C18作為固定相，同時優化色譜條件，使丹參酮II?A得到高效分離，可以穩定獲得純度在98％以上的丹參酮IIA化學對照品，同時縮短分離時間，單次進樣制備時間少于40分鐘。

2.本發明所述的甲醇-水洗脫體系能有效的保證丹參酮IIA與其他成分得到有效分離，從而保證分離的效果。

3.本發明采用紫外監測器在線監測，使丹參酮IIA的分離情況可以直接監測，并可以選擇性收集，顯著提高收集效果。

4.本發明所述方法操作簡便，條件溫和，能有效的保證丹參酮IIA的穩定性。

5.可產業推廣。色譜柱規格為50×250mm時，其規模可達到10克/月以上。

附圖說明

圖1為本發明實施例1制備的丹參酮IIA化學對照品的純度分析色譜圖。

具體實施方式

下面通過實施例和附圖對本發明做進一步詳細說明。

實施例1：

本實施例中，以50％的丹參酮IIA提取物為原料，以5μmC18鍵合相填料為吸附劑，以含有甲醇-水(75∶25，體積比)溶液為洗脫溶劑，具體工藝步驟如下：

1.樣品預處理

丹參酮IIA提取物用氯仿溶解，配置成濃度為60mg/ml的丹參酮IIA溶液，經0.22μm微孔濾膜過濾。

2.色譜柱處理