[發明專利]化妝品中磺胺類藥物的高效液相色譜檢測方法

無效

• 申請號: 200610122942.2
• 申請日: 2006-10-24
• 公開（公告）號: CN101169400A
• 公開（公告）日: 2008-04-30
• 發明（設計）人: 鄭偉東
• 申請（專利權）人: 廣東省?；瘷z測中心有限公司
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明是一項利用高效液相色譜儀檢測化妝品中磺胺類藥物的新技術，尤其適用于化妝品中微量磺胺類藥物多組分分離后的定性及定量分析。

背景技術

磺胺類藥物(Sulfonamides，SAs)是指具有對氨基苯磺酰胺結構的一類藥物的總稱，作為一種廣譜高效的抗菌藥物被廣泛應用到藥品、飼料、和化妝品中。國家衛生部頒布的2002年版《化妝品衛生規范》規定，化妝品中不得添加磺胺類藥物?；前奉愃幬镉捎谄鋸V譜高效的殺菌作用，被添加到祛痘類產品以達到消炎、祛痘、除螨及抗粉刺的目的。但這類藥物的不良反應較多，可能導致過敏反應，使患者出現藥物熱和皮疹，可致肝、腎損害，并可能導致畸胎，另外，磺胺類藥物還會導致許多病原微生物產生抗藥性。因此，為保護化妝品消費者的健康安全，建立靈敏、準確、快速的化妝品中磺胺類藥物的檢測方法是十分緊迫和必要的。

目前磺胺類藥物的檢測方法主要有紫外分光光度法、薄層色譜法、永停滴定法、氣相色譜法等。紫外分光光度法是比較經典的方法，但靈敏度不高，由于磺胺類藥物具有極其相近的吸收峰容易造成相互干擾，不利于多組分磺胺類藥物的同時分析。薄層色譜法靈敏度高、選擇性好，但重復性差，且檢測步驟繁瑣。永停滴定法所用試劑毒性大，技術難于掌握，且測定的是磺胺類藥物的總量，并不能區分是哪種磺胺類藥物，也不適用于化妝品中多組分磺胺類藥物的分析。

由于化妝品種類繁多，基質復雜，各成分的理化性質差別較大，尤其是磺胺類藥物作為禁用成分添加到化妝品中，其含量較低，以上所述各種方法無法檢測出化妝品中微量的磺胺類藥物成分。因此，目前還沒有一種行之有效的方法能檢測化妝品中的微量禁用成分——磺胺類藥物。

發明內容

本發明的目的是提供一種檢測化妝品中磺胺類藥物的分析方法，該項技術利用高效液相色譜儀不僅可以對化妝品中的磺胺類藥物進行準確的定性分析，而且還可以進行微量的定量分析。

本發明是用一定濃度的甲醇提取化妝品中的磺胺類藥物，然后將提取液過濾，濾除固體雜質，直至濾液澄清，取制備好的樣液上機，用磷酸二氫鉀-甲醇溶液進行洗脫分離。所用高效液相色譜儀的主要配置包括十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的反相色譜柱、紫外檢測器和二極管陣列檢測器。

本發明方法的主要分析步驟如下：

(1)稱取一定量的化妝品(乳、膏、霜或水劑)于10ml刻度離心管中，加入60％甲醇-水(鹽酸調節水的pH＝2.0)。渦旋混勻，超聲提取20min，0.45μm濾膜過濾(如果超聲后溶液很渾濁，則先用布氏漏斗抽濾后取續濾液，再用濾膜過濾)。取續濾液進樣。

(2)高效液相色譜儀采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的反相色譜柱，紫外檢測器與二極管陣列檢測器串聯使用。

(3)采用磷酸二氫鉀0.05mol/L溶液(用三乙胺調節pH值為4.0-6.0)-甲醇(70∶30)流動相平衡色譜柱約20min，使基線平穩，該條件下保留時間適合，峰形對稱，分離度好(R＞1.5)。

(4)選用262nm波長作為檢測波長。(磺胺類藥物都含有對氨基苯磺酰胺結構，在波長250～285nm內有強紫外吸收。用二極管陣列檢測器測定磺胺、磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑四種標準物質混合標液的吸收光譜，測得磺胺在259nm處有最大吸收，磺胺嘧啶在263nm處有最大吸收，磺胺二甲嘧啶在260nm處有最大吸收，磺胺甲噁唑在265nm處有最大吸收。最終選定262nm作為檢測波長，在此波長下，4種磺胺類藥物均有較高的檢測靈敏度。)

(5)取磺胺、磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑四種標準物質混合標液上機，得到四種標準物質的色譜圖和光譜圖。

(6)分別取四種標準物質配制成一定梯度濃度的標準液，做四種標準物質的峰面積-濃度標準曲線。

(7)取制備好的樣液上機，用磷酸二氫鉀0.05mol/L溶液(用三乙胺調節pH值為4.0-6.0)-甲醇(70∶30)流動相以1.0ml/min的流速進行洗脫，同時在262nm的檢測波長下采集數據。

(8)將樣品的色譜圖和標準品的色譜圖進行比較，樣品中與標準品保留時間相近(誤差范圍：標準品保留時間±0.5分鐘)的組分即為相應的磺胺類成分。

(9)將樣品色譜圖中磺胺類組分的光譜圖和標準品的光譜圖進行比較，若兩者的最大吸收波長及光譜圖特征相似，可進一步確定樣品中的磺胺類藥物成分。

(10)將磺胺組分的色譜峰面積帶入(6)中的標準曲線中，計算樣品中各磺胺組分的濃度。