[發明專利]重組人白介素－2與聚乙二醇的偶合物

無效

• 申請號: 200610091042.6
• 申請日: 2006-07-12
• 公開（公告）號: CN101104077A
• 公開（公告）日: 2008-01-16
• 發明（設計）人: 李廣善;靳雪峰;傅李芳
• 申請（專利權）人: 北京紫辰醫藥生物技術研究所;北京美倍他藥物研究有限公司
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;C07K17/08;A61K38/20;A61P35/00
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技術領域

本發明涉及重組人白介素-2通過氨基酸或寡肽與單甲基聚乙二醇連接形成的偶合物；這種偶合物具有較好的血漿穩定性，能夠在體內緩慢釋放重組人白介素活性發揮藥理作用。

背景技術

重組人白介素-2具有促進T細胞的成熟和分化，激活淋巴因子激活的殺傷細胞，促進干擾素的產生等生物活性，是免疫療法中最重要的細胞因子之一，臨床具有較好的抗腫瘤活性。

但是，作為蛋白類藥物，重組人白介素-2在體內易被酶解失活，生物半衰期短，影響了其藥理作用的發揮。

聚乙二醇(PEG)是具有良好的生物兼容性的中性聚合物，具有高度的親水性，在水溶液中有較大的水動力學體積，并且沒有免疫原性。將PEG與多肽和蛋白類藥物分子偶聯后，能夠提高藥物在血漿中的穩定性，減少藥物的酶解；避免免疫系統對藥物的識別和清除，降低免疫原性；同時避免藥物在腎臟的代謝清除，從而顯著延長多肽或蛋白類藥物在體內的半衰期。

目前PEG對多肽或蛋白的化學修飾均是通過PEG的活性衍生物與藥物分子中的氨基形成酰胺鍵或氨基甲酸酯鍵。由于蛋白或多肽分子中存在多個氨基，因此得到的偶合物是多種交聯產物的混合物。而且，由于對活性位點的直接修飾或空間位阻作用，被修飾藥物的生物活性損失較大。

發明內容

本發明的目的是提供聚乙二醇通過氨基酸或寡肽的連接子與rhIL-2連接形成的偶合物。通過選擇適當的連接子可以保持偶合物在血漿中的穩定性；到達靶組織后，連接子可以在細胞內釋放活性形式的rhIL-2分子，產生藥理作用。

本發明一方面提供式I所示的單甲氧基聚乙二醇衍生物通過氨基酸或寡肽的連接子與rhIL-2分子中的氨基連接形成的偶合物：

CH₃O-PEG-OCH₂CONH-(AA)_n-CONH-(rhIL-2)

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本發明另一方面提供式II所示的單甲氧基聚乙二醇衍生物通過氨基酸或寡肽的連接子與rhIL-2分子中的氨基連接形成的偶合物：

CH₃O-PEG-OCH₂CH₂OCONH-(AA)_n-CONH-(rhIL-2)

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式I、II中，PEG代表平均分子量5000-40000的聚乙二醇，AA代表L-氨基酸殘基n為1-6的整數。

本發明還提供含有式I、II所示的單甲氧基聚乙二醇與rhIL-2的偶合物作為活性成分的藥物組合物。

本發明最后還提供含有式I、II所示的單甲氧基聚乙二醇與rhIL-2的偶合物，以及含有式I、II所示的單甲氧基聚乙二醇與rhIL-2的偶合物作為活性成分的藥物組合物作為抗腫瘤藥物的用途。

具體實施方式

本發明中聚乙二醇與rhIL-2的偶合物的制備可以分為聚乙二醇衍生物的合成及其與rhIL-2的交聯兩個部分。

式I所示的偶合物可以按照如下方法制備：單甲氧基聚乙二醇在叔丁醇鉀作用下，與溴乙酸乙酯反應；反應產物經氫氧化鈉水解，然后將水解產物酸化，得到羧甲基取代的單甲氧基聚乙二醇衍生物CH₃O-PEG-OCH₂COOH；通過接肽反應，制備寡肽衍生物CH₃O-PEG-OCH₂CONH-(AA)_n-COOH；CH₃O-PEG-OCH₂CONH-(AA)_n-COOH與N-羥基琥珀酰亞胺反應成活潑酯CH₃O-PEG-OCH₂CONH-(AA)_n-COOSu，后者再與rhIL-2分子中的游離氨基連接，形成偶合物CH₃O-PEG-OCH₂CONH-(AA)_n-CONH-(rhIL-2)(I)。