[發明專利]一種稠油降粘菌菌數測試瓶的生產方法

無效

• 申請號: 200610078123.2
• 申請日: 2006-04-26
• 公開（公告）號: CN101063082A
• 公開（公告）日: 2007-10-31
• 發明（設計）人: 易紹金;鄧勇
• 申請（專利權）人: 長江大學
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12Q1/06
• 代理公司: 北京市中實友知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 熊成香

技術領域：

本發明涉及一種稠油降粘菌菌數測試瓶的生產方法，屬應用微生物檢測方法技術領域。

背景技術：

目前，在科研和生產實際工作中，常常需要對微生物數量進行測定。對水體、空氣、土壤等環境中的微生物測定可以監測和評價其污染程度；對飲用水中的微生物測定可以評價其是否達標；對油田污水注水中微生物數量的測定則可以監測和評價污水注水的水質。在稠油微生物開采過程中常常需要測定采油菌劑和地層水中稠油降粘菌菌數，稠油降粘菌的存在與否及其數量多少，很大程度上決定著稠油微生物開采的效果。

傳統的微生物測定方法十分煩瑣、費時，工作效率極低且不準確可靠。如平板菌落計數法是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計，取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然后將定量的稀釋液進行平板培養，根據培養出的菌落數及稀釋倍數，計算出培養物中的活菌數。而絕跡稀釋法是將待測定的水樣逐級注入到試管中進行接種稀釋，直到最后一個試管中無菌生長為止，然后根據細菌生長情況和稀釋倍數，計算出水樣中細菌的數目。

在油氣勘探開發、尤其是稠油微生物開采中，存在著大量的微生物菌數測試工作，經常需要測定地層水和采油菌劑等中的稠油降粘菌菌數，現有的傳統測試技術和測試手段遠不能滿足實際生產的要求。

發明內容：

為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種稠油降粘菌菌數測試瓶的生產方法，使所生產的測試瓶能夠快速準確地測定稠油降粘菌菌數，用于油氣勘探開發、尤其是稠油微生物開采中稠油降粘菌數量的測定。

本發明是通過如下技術方案來實現上述目的的。

在常溫下分別取氯化鈉(NaCl)0.5％、磷酸二氫鉀(KH₂PO₄)0.1％、硝酸鉀(KNO₃)0.06％、磷酸三鈉(Na₃PO₄)0.15％、蒸餾水(H₂O)99.19％，然后依次用蒸餾水(H₂O)將其溶解，并加入到容器中混合、充分搖勻，用酸液或堿液將溶液的pH值調節到7.5，配制成培養液；將7ml模制西林瓶清洗干凈、干燥，用液體分裝器將所配制的培養液按每瓶4.5ml裝入瓶中，再向瓶中加入0.2ml的黑色稠油，然后加蓋、封口；將經加蓋封口的測試瓶用高溫蒸汽滅菌鍋在121℃、0.105Mpa條件下進行高溫滅菌15分鐘，冷卻后即制成稠油降粘菌菌數測試瓶。

本發明與現有的技術相比具有如下有益效果：

1、本發明所述的一種稠油降粘菌菌數測試瓶的生產方法，生產過程簡單，可靠性強，經濟實用。

2、本發明所生產的稠油降粘菌菌數測試瓶能夠快速準確地測定稠油降粘菌的菌數，使用操作簡單、結果直接準確，可用于油田采油菌劑及地層水中稠油降粘菌菌數的測定。

3、本發明所生產的稠油降粘菌菌數測試瓶中只有稠油為微生物生長的唯一碳源，所培養出的微生物只是以稠油為唯一碳源的稠油降粘菌，測試工作不會受到其它微生物的干擾。

具體實施方式：

在常溫下(以配制1L培養液為例，以此類推)，分別稱取氯化鈉(NaCl)5.0g、磷酸二氫鉀(KH₂PO₄)1.0g、硝酸鉀(KNO₃)0.6g、磷酸三鈉(Na₃PO₄)1.5g，然后依次用蒸餾水(H₂O)將其溶解，并加入到1L容量瓶中混合、再用蒸餾水(H₂O)定容到1L刻度線，充分搖勻，用酸液或堿液將溶液的pH值調節到7.5，即配制成稠油降粘菌菌數測試瓶所需的培養液。將7ml模制西林瓶清洗干凈、干燥，用液體分裝器將所配制的培養液按每瓶4.5ml裝入瓶中，再向瓶中加入0.2ml的黑色稠油，然后用A-13型藥用膠塞加蓋，用普通抗生素玻璃瓶鋁蓋經專用封口器封口，最后用高溫蒸汽滅菌鍋在121℃、0.105MPa條件下將測試瓶集中進行高溫滅菌15分鐘，冷卻后即制成稠油降粘菌菌數測試瓶。

采用稠油降粘菌菌數測試瓶測定待測水樣中稠油降粘菌的菌數時，可采用絕跡稀釋法原理，將待測水樣用無菌注射器逐級注入測試瓶中稀釋培養，直到最后一個測試瓶無菌生長為止，根據稀釋的倍數計算出待測水樣中細菌的數目。可采用以下的方法和步驟：

(1)準備數支相同的1ml醫用注射器，用蒸餾水(H₂O)清洗干凈后高溫滅菌(高壓蒸汽滅菌鍋121℃、0.105MPa下滅菌15分鐘)，冷卻備用。