[發明專利]高產耐高溫蛋白酶的蘇云金芽孢桿菌篩選及培養方法有效
| 申請號： | 200610069339.2 | 申請日： | 2006-10-12 |
| 公開（公告）號： | CN101161811A | 公開（公告）日： | 2008-04-16 |
| 發明（設計）人： | 關雄;鄭毅;黃志鵬;黃必旺;黃天培;沙莉;李今煜;張群林;吳昌標;余潔;張靈玲 | 申請（專利權）人： | 福建農林大學 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12N9/56;A01N63/02;C12R1/125 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 350002福建*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 高產 耐高溫 蛋白酶 蘇云金 芽孢 桿菌 篩選 培養 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種高產耐高溫蛋白酶的蘇云金芽孢桿菌篩選方法，包括以下步驟：
(1)初篩：在55℃的條件下，利用酪蛋白瓊脂鑒定平板對供初篩Bt菌株的菌落瓊脂塊與其初始發酵液分別進行檢測，選取水解酪蛋白形成透明圈較大且水解圈明顯的菌株為初篩菌株；
(2)復篩：對所述初篩菌株進行發酵驗證，以酪蛋白為底物，采用紫外分光測定法進行酶活測定，選取高酶活的菌株Bt140為高產耐高溫蛋白酶的菌株。
2.一種利用高產耐高溫蛋白酶的蘇云金芽孢桿菌制備產酶發酵液的方法，其特征在于
(1)采用如權利要求1所述的高產耐高溫蛋白酶的Bt140菌株為生產菌株；
(2)采用黃豆餅粉培養基，按重量百分比配方如下：黃豆餅粉1.8％、酵母粉0.36％、葡萄糖0.14％、KH2PO4?0.25％、MgSO4·7H2O?0.035％、CaCO30.05％，其余為水；
(3)發酵產酶培養條件為：培養基裝量35mL/250mL三角瓶，培養溫度31℃，搖瓶轉速為250r/min，菌懸液濃度為7×106個/mL，每瓶接種量為0.75mL，初始pH7.0，發酵時間為24h。
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