[發明專利]一種制備純化柚苷酶的方法及其酶制劑的應用

無效

• 申請號: 200610068680.6
• 申請日: 2006-09-08
• 公開（公告）號: CN101092611A
• 公開（公告）日: 2007-12-26
• 發明（設計）人: 顏廷和
• 申請（專利權）人: 顏廷和
• 主分類號: C12N9/24
• 分類號: C12N9/24;C12N1/14;A23L2/66
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1、一種制備純化柚苷酶的方法，其特征在于：按如下步驟操作：

1)采用常規微生物接種方法接種：試管斜面培養，采用察式固體培養基；接種：將上述生長的菌株移接到產孢固體培養基中，25-35℃，培養3-5天，至孢子產生；步驟1)以真菌為菌種；

2)將所述菌株孢子按0.5-10％接種量投加到固體培養基中，控制碳氮比例在2-5∶1-3.5范圍內，保持濕度為30-70％，溫度25-35℃，自然PH值，柚苷酶的產生時間為40-90小時；提取，加料重的2-5倍純化水，過濾離心的清液；純化：采取鹽析法和有機溶劑沉淀法結合的方法，提純柚苷酶，鹽析，硫酸銨飽和度為30-80％，有機溶劑沉淀，有機溶劑濃度為40-90％。

2、根據權利要求1所述的一種制備純化柚苷酶的方法，其特征在于：所屬菌株孢子添加到固體培養基中的接種投加量為1-5％。

3、根據權利要求1所述的一種制備純化柚苷酶的方法，其特征在于：所屬保持濕度為50-60％。

4、根據權利要求1所述的一種制備純化柚苷酶的方法，其特征在于：所屬固體培養集中的碳為麥糠或麥麩；氮為豆餅或豆渣。

5、按根據權利要求1所述的一種制備純化柚苷酶的方法，其特征在于：所述真菌菌種為曲霉中的黑曲霉。

6、根據權利要求1所述的一種制備純化柚苷酶的方法，其特征在于：所述柚苷酶生產時間為60-90小時。

7、根據權利要求1所述的一種制備純化柚苷酶的方法，其特征在于：所述柚苷酶提取，加料重的2-5倍純化水，過濾離心的清液；純化采取鹽析法和有機溶劑沉淀法結合的方法，提純柚苷酶；鹽析硫酸銨飽和度為30-80％，有機溶劑沉淀有機溶劑濃度為40-90％。

8、一種如權利要求1所述的制備純化柚苷酶的酶制劑的應用，其特征在于：將柚苷酶應用于脫苦及天然藥物中黃酮類化合物生物轉化。

9、根據權利要求8所述的制備純化柚苷酶的酶制劑的應用，其特征在于：將所述柚苷酶純化后的純酶直接添加到壓榨后的柑橘類果汁中能有效的脫除其中的苦味，添加量為果汁量的0.1‰-2‰。

10、根據權利要求8所述的制備純化柚苷酶的酶制劑的應用，其特征在于：將所述柚苷酶純化后的純酶直接添加到黃酮類化合物水溶液中，酶的添加量為所含糖苷型黃酮量的1‰-10‰，在溫度為30-50℃，PH為3-5，時間為4-24小時反應.能夠將糖苷型黃酮生物轉化為苷元型黃酮，轉化率在30-80％。