[發(fā)明專利]純化羅漢果苷并提取生物活性物質(zhì)的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200610051256.0
• 申請(qǐng)日: 2006-10-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101168556A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周英;黃赤夫
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 周英
• 主分類號(hào): C07J9/00
• 分類號(hào): C07J9/00;C07G17/00;A61K36/42;A61K131/00
• 代理公司: 貴陽(yáng)中工知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所
• 代理人: 劉安寧

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及天然調(diào)味物的純化，具體而言，涉及羅漢果苷的純化并同時(shí)提取具有生物活性物質(zhì)的方法。

背景技術(shù)

羅漢果為葫蘆科多年生宿根攀援藤本植物羅漢果(Siraitiagrosvenorii)的果實(shí)。羅漢果通常是指植物(Siraitia?grosvenorii)的果實(shí)，但也包括相關(guān)的類似的植物種類：S.siamensis，S.silomaradjae，S.sikkimensis，S.siraitia，S.borneensis?and?S.taiwaniana。羅漢果中的甜味成分羅漢果苷為三萜類化合物，其葡萄糖環(huán)與mogrol基相連。羅漢果提取物是一種粉末，其羅漢果苷的含量為在60％～99％，目前已被廣泛用作甜味劑。然而，目前生產(chǎn)的羅漢果提取物仍然含有一定程度的回苦味，這影響了羅漢果提取物的口感并且限制了其作為天然甜味劑的應(yīng)用。羅漢果鮮果壓碎制成的羅漢果濃縮果汁是近年來(lái)才開(kāi)發(fā)出來(lái)的產(chǎn)品，記載在美國(guó)專利US?Patent?20060003053之中，同樣也含有一定程度的回苦味，也會(huì)影響飲料質(zhì)量。長(zhǎng)期以來(lái)，人們認(rèn)為回苦味可能是羅漢果苷的一種特有性質(zhì)。發(fā)明人通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)羅漢果，羅漢果提取物和濃縮果汁中回苦味的化學(xué)物質(zhì)具有與羅漢果苷相類似的化學(xué)結(jié)構(gòu)，因此它們常被混合在一起而不易被分離，以至以前的實(shí)驗(yàn)室及工業(yè)上都未能檢測(cè)和分離出回苦味物質(zhì)；從而證明了回苦味不是羅漢果苷的一種特有性質(zhì)。在此前，發(fā)明人發(fā)明了除去羅漢果提取物回苦味的方法，并就此申請(qǐng)了專利，申請(qǐng)?zhí)枮镃N200610051186.9。發(fā)明人同時(shí)還發(fā)現(xiàn)苦味物質(zhì)具有抗微生物的活性。然而，迄今為止，還沒(méi)有人提出純化羅漢果苷、同時(shí)提取具有抗微生物的活性物質(zhì)的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就在于提供一種純化羅漢果苷并提取具生物活性物質(zhì)的方法，使純化過(guò)的羅漢果苷成為一種應(yīng)用更廣、甜味更濃，口感更純的甜味劑，同時(shí)得到具有抗微生物活性的物質(zhì)。

發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)可將羅漢果，羅漢果提取物和濃縮果汁中的回苦味物質(zhì)分離出來(lái)，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)回苦味物質(zhì)具有很好的抗微生物活性。經(jīng)測(cè)試，得知含80％的甜苷的羅漢果提取物大約含有7％的回苦味物質(zhì)；發(fā)明人經(jīng)過(guò)研究，發(fā)現(xiàn)并認(rèn)定羅漢果提取物中的回苦味主要是類似葫蘆科植物生長(zhǎng)過(guò)程中自然產(chǎn)生的一種或多種回苦味物質(zhì)或是化學(xué)結(jié)構(gòu)類似苦味劑的物質(zhì)產(chǎn)生的，發(fā)明人暫將這些物質(zhì)命名為“羅漢果素”；而且發(fā)現(xiàn)“羅漢果素”存在于整個(gè)羅漢果植株即羅漢果葉、藤、根、莖和果實(shí)中，它具有抑制微生物的活性，如對(duì)部分革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌及真菌等有抑制作用。

發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)利用極性及溶解性的差別，可以將“羅漢果素”和羅漢果苷分開(kāi)；這樣，可以在純化羅漢果苷的同時(shí)提取具有生物活性物質(zhì)“羅漢果素”。因此，本發(fā)明提供的解決方案是采用溶劑提取法純化羅漢果苷、同時(shí)提取“羅漢果素”，即除去和收集苦味物質(zhì)同時(shí)進(jìn)行。

本發(fā)明提供的方法是如下實(shí)現(xiàn)的：

①將羅漢果干果實(shí)進(jìn)行機(jī)械粉碎得到粗粉，或?qū)⑿迈r的羅漢果果實(shí)壓碎得到濕的碎塊，用水、或不同濃度的醇溶液浸泡所述粗粉和碎塊，并加熱到至少80℃，進(jìn)行60min以上的提取，得到提取物液；重復(fù)提取3次，將羅漢果提取液過(guò)濾得到濾液，蒸發(fā)乙醇而得到水溶液；或?qū)⒘_漢果提取物溶于水直接得到水溶液；

②以非極性的溶劑提取至少1次以除去脂肪酸、蛋白質(zhì)以及其它一些雜質(zhì)，分離有機(jī)層和水層；

③合并水層并通過(guò)水平衡的非極性的大孔吸附樹(shù)脂，用水洗滌以除去未吸附的物質(zhì)；再用3倍柱體積的10％～95％的乙醇進(jìn)行梯度洗脫；將40％～70％的洗脫液合并除去乙醇得到羅漢果水溶液；將80％～95％的洗脫液合并除去乙醇，干燥得到“羅漢果素”；

④以極性的溶劑萃取羅漢果水溶液三次得到有機(jī)層，此有機(jī)層即含有“羅漢果素”，而水層含有羅漢果苷；分離有機(jī)層和水層，干燥有機(jī)層得到“羅漢果素”，噴霧干燥水層得到羅漢果苷。

步驟①～③用于從羅漢果干果或新鮮的羅漢果果實(shí)中提純羅漢果苷；如果將羅漢果干果機(jī)械粉碎成羅漢果粗粉，以步驟④處理，可直接得到“羅漢果素”和含羅漢果苷的羅漢果粉。

如果原料是用羅漢果提取物制成的水溶液或是用羅漢果濃縮果汁，則直接進(jìn)入步驟④，得到純化的羅漢果苷和“羅漢果素”。

發(fā)明人指出，由于蠟質(zhì)、色素(如葉綠素、葉黃素等)、高沸點(diǎn)的萜類、非極性的脂肪酸和脂等可能會(huì)干擾“羅漢果素”的純化，所以首先以非極性的溶劑提取來(lái)除去它們，溶劑為正己烷和、石油醚和四氯化碳等，也可使用它們的混合物。