[發明專利]雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯滅活疫苗的制備方法

無效

• 申請號: 200610048423.6
• 申請日: 2006-07-18
• 公開（公告）號: CN101108248A
• 公開（公告）日: 2008-01-23
• 發明（設計）人: 張許科;孫進忠;喬榮岑;榮駿弓;習向峰
• 申請（專利權）人: 洛陽普萊柯生物工程有限公司
• 主分類號: A61K39/215
• 分類號: A61K39/215;A61K39/12;A61P11/00
• 代理公司: 洛陽市凱旋專利事務所
• 代理人: 陸君

技術領域：

本發明涉及禽用生物藥劑，一種雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯滅活疫苗的制備方法。

背景技術：

預防和控制傳染病的發生對現代養禽業具有非常重要的意義。目前，一般采用的方法主要是加強衛生和消毒，但僅靠這些并不能使現代養禽業集約化大規模生產抵抗得住傳染病的傳播，給養禽業造成很大的損失的事是經常的事；事實證明，養禽業控制其傳染性疾病最主要的手段應該是以預防為主，而接種疫苗被認為是最行之有效的措施。

疫苗是將病原微生物(如細菌、立克次氏體、病毒等)及其代謝產物，經過人工減毒、滅活或利用基因工程等方法制成的用于預防傳染病的自動免疫制劑。疫苗保留了病原菌刺激動物體免疫系統的特性。當動物體接觸到這種不具傷害力的病原菌后，免疫系統便會產生一定的保護物質，如免疫激素、活性生理物質、特殊抗體等；當動物再次接觸到這種病原菌時，動物體的免疫系統便會依循其原有的記憶，制造更多的保護物質來阻止病原菌的傷害。滅活疫苗俗稱“死疫苗”，是將病原微生物滅活后使其失去致病能力但仍保留免疫原性而制成的，進入機體后可直接引起免疫應答，但不能繁殖，比較安全、穩定。具有生產方便，使用安全，易于保存的特點。

雞新城疫俗稱“雞瘟”，是由雞新城疫病毒引起的一種高度接觸性傳染病。主要經呼吸道和消化道感染，各種年齡的雞均可感染，以雛雞最為嚴重發病率和死亡率可達80％以上。雞傳染性支氣管炎是由傳染性支氣管炎病毒引起雞的一種急性、高度接觸性呼吸道疾病，傳播途徑主要是經呼吸道感染；發病多集中在冬、春季；6周齡死亡率高，可達20％左右。

目前，濃縮可提高免疫抗原在疫苗終產品的濃度，常用的濃縮方法有離心沉淀法、氫氧化鋁吸附沉淀法和羧甲基纖維沉淀法，但上述幾種方法均有其缺點，濃縮可提高免疫抗原在疫苗終產品的濃度，常用的濃縮方法有離心沉淀法、氫氧化鋁吸附沉淀法和羧甲基纖維沉淀法，但上述幾種方法均有其缺點，本公司經過長期實驗采用纖維膜超濾濃縮法，本方法可使效價提高.

現在的制備方法中，滅活是指破壞微生物的生物學活性、繁殖能力及致病性，但盡可能地不影響或少影響其免疫原性。滅活的方法包括物理方法和化學方法。物理法如加熱、射線照射等方法，化學法是用化學滅活劑進行的，是目前常用的滅活方法。常用的滅活劑有甲醛、乙酰乙烯基亞胺、乙烯亞胺、β-丙酸內酯等。甲醛的滅活原理是它能使微生物的蛋白質、核酸變性，導致死亡，但不明顯影響其免疫原性

現在的制備方法中，佐劑的類型一般由氫氧化鋁膠、弗氏佐劑、白油佐劑、礦物油、水花生油乳劑、吐溫-80、司盤、左旋咪唑、脂質體等，與抗原混合成懸濁狀態，盡可能延長在注射部位的貯留時間，從而持續不斷地刺激機體免疫系統，以產生較強的免疫應答；可出現免疫增強的作用。

發明內容：

為了解決雞新城疫與傳染性支氣管炎嚴重影響養禽業尤其是雞的呼吸道傳染性疾病的問題，本發明的目的是提供一種雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯滅活疫苗的制備方法，使其可有效地防止這兩種禽病的發生，具有生產方便，使用安全，易于保存的優點。

該雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯滅活疫苗的制備方法，主要提出了新城疫與傳染性支氣管炎二聯滅活疫苗的組和，采用NDVLaSota株病毒液，含重量比：10～22％，IBVM41株病毒液，含重量比：10～22％；分別濃縮、滅活；再加入佐劑白油，免疫助劑吐溫、司本、硬脂酸鋁制成聯苗。

該雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯滅活疫苗的制備方法，生產用毒種的制備，NDV?La?Sota株和IBV?M₄₁株毒種分別適當稀釋，分別接種SPF雞胚，孵育，收獲；制苗用病毒液的制備，NDV?La?Sota株和IBV?M₄₁株毒種分別適當稀釋，分別接種易感雞胚，孵育；收活毒種：分別濃縮、滅活.取制苗用NDV?La?Sota毒株液15％和IBV?M₄₁毒株液15％加吐溫-80制成水相.用白油、司本-80、硬脂酸鋁制成油相.水相與油相之比為1∶1.5一起乳化，分裝，帖簽，裝箱，入庫。