[發明專利]一種禽用三聯滅活疫苗及制備方法

無效

• 申請號: 200610048422.1
• 申請日: 2006-07-18
• 公開（公告）號: CN101108249A
• 公開（公告）日: 2008-01-23
• 發明（設計）人: 張許科;孫進忠;喬榮岑;習向峰;榮駿弓;孟照國
• 申請（專利權）人: 洛陽普萊柯生物工程有限公司
• 主分類號: A61K39/235
• 分類號: A61K39/235;A61K39/215;A61K39/12;A61P11/00
• 代理公司: 洛陽市凱旋專利事務所
• 代理人: 陸君

技術領域：

本發明涉及家禽類生物制藥技術領域，一種禽用三聯滅活疫苗及制備方法

背景技術：

雞減蛋綜合癥，簡稱EDS-76是一種腺病毒引起的傳染性疾病，可使雞群產蛋率下降30％～50％，蛋殼破損率達40％以上；新城疫俗稱雞瘟，是由雞新城疫病毒引起的一種高度接觸性傳染病，主要經呼吸道和消化道感染，各種年齡的雞均可感染，以雛雞最為嚴重發病率和死亡率可達80％以上；雞傳染性支氣管炎的病原為冠狀病毒屬傳染性支氣管炎病毒，本病只感染雞，各種日齡及品種雞都可發病，40日齡以內的雞多發，尤以雛雞發病嚴重，本病一年四季都可發生，但冬季為甚，雞群過密，天氣突變，通風不良，維生素及礦物質缺乏，飼料供應不足，均可促使本病發生；雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合癥，有人將該病列為給養雞業帶來巨大經濟損失的三大主要病毒性傳染病。

聯苗是指不同種微生物或其代謝產物組成的疫苗，聯苗可簡化接種程序，減少接種動物應激反應的次數，此外對于產蛋雞，尤其是種雞應盡可能避免或減少在產蛋期間做免疫接種，而雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯滅活疫苗主要是在開產前使用，使用劑量與單苗相當，但其效力與單苗相同，具有使用簡便、接種程序簡單等優點，減少疫苗的免疫次數，避免家禽產生不必要的應激，達到事半功倍的效果，聯苗復配最關鍵的是抗原最佳配比問題。

一般情況下，菌苗中細菌抗原濃度的提高，可在培養過程中注意，也可通過濃縮的方法。常用的濃縮方法有離心沉淀法、氫氧化鋁吸附沉淀法和羧甲基纖維沉淀法，可使菌液濃縮1倍以上。

一般情況下，滅活是指破壞微生物的生物學活性、繁殖能力及致病性，但應盡可能地不影響或少影響其免疫原性。滅活的方法包括物理方法和化學方法。物理法如加熱、射線照射等方法，化學法是用化學滅活劑進行的，是目前常用的滅活方法。常用的滅活劑有甲醛、乙酰乙烯基亞胺、乙烯亞胺、β-丙酸內酯等。甲醛的滅活原理是它能使微生物的蛋白質、核酸變性，導致死亡，但不明顯影響其免疫原性。

一般情況下，佐劑屬于免疫增強劑中的一類，單獨使用時一般沒有免疫原性，與抗原物質合并使用時，能增強抗原物質的免疫原性，增強機體的免疫應答，或者改變機體免疫應答類型。選擇佐劑的同時應考慮其免疫增強作用和安全性。世界衛生組織及一些專家認為，生物制品的佐劑，應符合以下條件：一是無致癌性和輔助致癌作用；二是無毒性；三是吸附力強、易于吸收；四是不含與機體有交叉免疫反應的物質，本身不引起機體的超敏反應，也不會與機體自身物質結合引起不良反應導致損傷；五是能經1～2年保存不變質、不明顯降低效力、不出現不良反應。佐劑的類型一般由氫氧化鋁膠、弗氏佐劑、白油佐劑、礦物油、水花生油乳劑、吐溫-80、司盤、左旋咪唑、脂質體等，與抗原混合成懸濁狀態，盡可能延長在注射部位的貯留時間，從而持續不斷地刺激機體免疫系統，以產生較強的免疫應答；可出現免疫增強的作用。

發明內容：

為了解決目前雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合癥引起的發病率高，死亡率高的問題，本發明的目的是提供一種禽用三聯滅活疫苗及制備方法，使三種抗原間的免疫干擾盡最大可能降低，降低畜擒死亡率，減少養殖專業戶的損失，造福于人類。

為了實現上述發明目的，本發明采用如下技術方案：

所述的禽用三聯滅活疫苗及制備方法，其采用生物組合配比，其中：滅活的3倍濃縮NDV?La?Sota株病毒液重量比：8.0～12.0％；滅活的3倍濃縮IBV?M41株病毒液8.0～12.0％；滅活的EDSAV127株病毒液9.0～14.0％；并配合以白油50～70％，吐溫-801～3％，司本-802～4％，硬脂酸鋁1～3％，采用了纖維膜超濾濃縮法，采用低溫滅活，采用新的佐劑，制成滅活疫苗的油苗。

該禽用三聯滅活疫苗及制備方法，采用了纖維膜超濾濃縮法，可提高免疫抗原在疫苗終產品的濃度達3倍以上，纖維膜超濾濃縮裝置，設有二級孔徑不同的纖維濾柱，一級濾柱的纖維可濾除部分細菌和雜質，二級超濾株的中空纖維可截留病毒粒子。

該禽用三聯滅活疫苗及制備方法，IBV?M41病毒液創新采用低溫滅活，2-8℃經120-145小時，并將濃縮后的DNV?La?sota和EDSAV127病毒液，分別加入0.05～0.15％甲醛溶液，經35～38℃滅活12～17小時，可徹底滅活病毒，并不影響其免疫原性。