[發明專利]血液樣本傷寒桿菌增菌培養基

無效

• 申請號: 200610044870.4
• 申請日: 2006-06-16
• 公開（公告）號: CN101089191A
• 公開（公告）日: 2007-12-19
• 發明（設計）人: 闞方琦;曲奕
• 申請（專利權）人: 闞方琦;曲奕
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;G01N33/50
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域??本發明涉及一種血液樣本傷寒桿菌增菌培養基，其主要成分是牛肉膏、蛋白胨、膽鹽、硫酸鋁鉀、氯化鈉、小牛血清、葡萄糖、枸櫞酸鈉經一定的工藝制成。供血液增菌培養傷寒，副傷寒桿菌用。利用培養試驗鑒別細菌的種類，其關鍵在于準確、快速、簡便。而細菌接種量大小，會直接影響檢測結果。往往需要將樣本通過不同方法進行增菌培養，來進行細菌種類的鑒別，這是目前微生物實驗室最常用的手段。由于目前培養條件的應用范圍所限，供血液樣本傷寒桿菌增菌培養的培養基沒有特效的，存在所需接種量大、培養時間長、特異性差，易出現假陽性或假陰性等問題。隨著生物研究的進展，國內外對細菌鑒別的增菌培養基研究也在不斷的發展中。生物工作者一直希望能有一種能克服上述不足的增菌培養基----血液樣本傷寒桿菌增菌培養基。

背景技術??本發明的目的在于提供一種能克服已有培養基不足的血液樣本傷寒桿菌增菌培養基。與其它同類培養基相比具備下列特點：所需接種量小，少量細菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37℃培養7天即可觀察結果；特異性強，不易出現假陽性和假陰性。

發明內容??本發明的要點在于選擇合適的組分，并進行合理混配，經加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成一種血液樣本傷寒桿菌增菌培養基。

本發明選擇的配方如下(組分及其重量百分比％)：牛肉膏(0.4-0.6)、小牛血清(0.4-0.6)、蛋白胨(0.8-1.0)、氯化鈉(0.4-0.6)、膽鹽(0.2-0.4)、硫酸鋁鉀(0.2-0.3)、葡萄糖(1.8-2.0)、20％枸櫞酸鈉2.0-3.0ml、蒸餾水加至100ml。

本培養基含有枸櫞酸鈉、膽鹽可抑制大多數革蘭氏陰性桿菌，而對傷寒桿菌無抑制作用或抑制力很小；硫酸鋁鉀可激活傷寒桿菌活性，使生長數量大大增加；氯化鈉用于調整滲透壓；牛肉膏、蛋白胨、小牛血清、葡萄糖是培養基中的營養和支持成分。

本發明產品的制備方法是：

1)、將牛肉膏、蛋白胨、膽鹽、硫酸鋁鉀、氯化鈉混合于水中，加熱溶解，矯正pH至7.8，分裝于鹽水瓶中，包扎瓶口，高壓滅菌1.05kg30分鐘；

2)、用虹吸法取上清液，按量其總量，按上述比例加入葡萄糖及枸櫞酸鈉，矯正pH至7.6；

3)、上述成分混合溶解后，高壓滅菌0.70kg20分鐘；

4)、無菌條件下，加入無菌小牛血清，分裝安培瓶，每瓶約5ml，存于冰箱中備用。

無菌操作采取病人靜脈血液立即注入血液樣本傷寒桿菌增菌培養基中，進行增菌培養，在室溫或37℃培養箱中，每天將增菌物移種到血瓊脂平板和鑒別血瓊脂平板培養基上，并且繼續進行培養和鑒定，增菌培養7天后報告結果。

本發明具有以下優點：(1)所需接種量小，少量細菌可迅速繁殖；(2)特異性強，不易出現假陽性或假陰性。

具體實施方式??下面結合實施例對本發明作進一步的詳細說明：

按照下表所列數據(重量百分比％)及其所述步驟進行配置：

配方一：

牛肉膏?????????????0.4-0.6

小牛血清?????????????0.4-0.6

蛋白胨???????????????0.8-1.0

氯化鈉???????????????0.4-0.6

膽鹽?????????????????0.2-0.4

硫酸鋁鉀?????????????0.2-0.3

葡萄糖???????????????1.8-2.0

20％枸櫞酸鈉?????????2.0-3.0ml

蒸餾水???????????????加至100ml

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配方二.

牛肉膏???????????????0.5-0.6

小牛血清?????????????0.5-0.6

蛋白胨???????????????0.9-1.0

氯化鈉???????????????0.5-0.6

膽鹽?????????????????0.3-0.4

硫酸鋁鉀?????????????0.25-0.3

葡萄糖???????????????1.9-2.0

20％枸櫞酸鈉?????????2.5-3.0ml

蒸餾水???????????????加至100ml