[發(fā)明專利]一種檢測血清中乙肝病毒核心抗原的酶聯(lián)免疫測定試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200610030783.3
• 申請日: 2006-09-04
• 公開（公告）號: CN101140285A
• 公開（公告）日: 2008-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 龔育平
• 申請（專利權(quán)）人: 上海復(fù)星醫(yī)藥（集團(tuán)）股份有限公司;上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/576
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司
• 代理人: 王巍

1.一種檢測血清中乙肝病毒核心抗原的酶聯(lián)免疫測定試劑盒，其特征在于該試劑盒是由單克隆乙肝核心抗體預(yù)包被的微孔板、樣本處理劑、辣根過氧化物酶標(biāo)記的多克隆乙肝核心抗體、陽性對照液、陰性對照液、20倍濃縮洗滌液、底物液A、底物液B及終止液組成的。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測血清中乙肝病毒核心抗原的酶聯(lián)免疫測定試劑盒，其特征在于所述的樣本處理劑是由1～10％質(zhì)量百分比的SDS、0.5～5％體積百分比的Tween-60、0.1～1％體積百分比的巰基乙醇、0.05～0.2M及pH7.4的磷酸鹽緩沖液組成的。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測血清中乙肝病毒核心抗原的酶聯(lián)免疫測定試劑盒，其特征在于包被微孔板的單克隆乙肝核心抗體可在含1～10％質(zhì)量百分比的SDS、0.5～5％體積百分比的Tween-60、0.1～1％體積百分比的巰基乙醇、0.05～0.2MpH7.4的磷酸鹽緩沖液中特異性結(jié)合變性的乙肝病毒核心抗原。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測血清中乙肝病毒核心抗原的酶聯(lián)免疫測定試劑盒，其特征在于所述的陽性對照液是用HBV?DNA陽性的人血清制備的。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測血清中乙肝病毒核心抗原的酶聯(lián)免疫測定試劑盒，其特征在于所述的陰性對照液是用HBV?DNA陰性的人血清制備的。

6.一種檢測血清中乙肝病毒核心抗原的方法，包括下列步驟：

(1)將50ul樣本處理劑加入到50ul待檢血清樣本中，混勻，70℃水浴1小時，然后置于室溫環(huán)境下平衡5分鐘；

(2)取出單克隆乙肝核心抗體預(yù)包被的微孔板，加入50ul預(yù)處理過的待檢血清樣本，各板設(shè)陽性對照1孔50ul、陰性對照1孔50ul及空白對照1孔加PBS?50ul，置于37℃環(huán)境中反應(yīng)30分鐘；

(3)取出反應(yīng)板甩去孔內(nèi)液體，將各孔注入洗滌液，即20倍濃縮洗滌液1ml+19ml去離子水，停留30秒鐘后甩去洗滌液、拍干，重復(fù)洗滌5次；

(4)每孔加入酶標(biāo)多克隆乙肝核心抗體工作液50ul，置于37℃環(huán)境中反應(yīng)30分鐘；

(5)重復(fù)步驟3，各孔滴加底物液A、B各1滴，置于37℃環(huán)境中避光顯色10-15分鐘后再每孔滴加終止液1滴，置酶標(biāo)儀中450nm波長讀數(shù)。