[發明專利]可特異識別血管內皮細胞生長因子的重組免疫球蛋白的表達生產及其應用

無效

• 申請號: 200610030168.2
• 申請日: 2006-08-17
• 公開（公告）號: CN101125888A
• 公開（公告）日: 2008-02-20
• 發明（設計）人: 周群敏;陶飛龍;胡紅群;馬玲莎;徐一清
• 申請（專利權）人: 蘇州思坦維生物技術有限責任公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C12N15/09;C12N15/85;G01N33/53;G01N33/68;A61K39/395;A61P35/00
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1.一種可特異識別與結合血管內皮細胞生長因子的人源化的重組免疫球蛋白S2345。其特征在于a)該重組免疫球蛋白具有如基因序列表1所示的氨基酸序列；b)該重組免疫球蛋白保持有與VEGF特異相結合的活性，并可抑制VEGF介導的促血管內皮細胞增生作用；c)該重組免疫球蛋白為重組基因工程與細胞培養的方法生產出抗體蛋白。

2.一種制備權利要求1的重組免疫球蛋白S2345的方法；其步驟包括：a)以多聚酶鏈式反應(PCR)及重組基因工程方法構建含有重組免疫球蛋白S2345基因的表達載體；該表達載體的特征在于其具有如基因序列表2所示的重組基因核苷酸序列；b)表達載體轉染入晡乳動物細胞及鑒定、檢測重組免疫球蛋白S2345在轉染細胞中的分泌性表達；c)重組免疫球蛋白S2345表達陽性細胞的篩選、擴增培養及上清液的收集；d)以免疫親和層析柱法從收集的細胞培養上清液中分離提取重組免疫球蛋白S2345。

3.用權利要求1的重組免疫球蛋白S2345為試劑盒成分進行體內或體外檢測VEGF表達水平的方法；其特征在于被檢測的VEGF是以流離降級的可溶性物質形式存在于體液(如血清、血漿、唾液等)與細胞培養上清液中或以膜蛋白形式表達于細胞/組織中。

4.用權利要求1所述的的重組免疫球蛋白S2345為吸附劑，體外分離或清除VEGF及VEGF表達陽性細胞或組織的方法。

5.用權利要求1所述的的重組免疫球蛋白S2345作為VEGF的中和吸附劑在體外拮抗抑制VEGF介導的促血管內皮細胞增生。

6.用權利要求1所述的重組免疫球蛋白S2345作為體內VEGF的中和吸附劑以拮抗抑制腫瘤區域的血管增生。