[發(fā)明專利]葡激酶肌肉注射劑及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200610029365.2
• 申請(qǐng)日: 2006-07-26
• 公開（公告）號(hào): CN101112358A
• 公開（公告）日: 2008-01-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王家馴;李武軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): A61K9/08
• 分類號(hào): A61K9/08;A61K38/43;A61P7/02
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
• 代理人: 徐迅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，尤其涉及溶栓藥物肌肉注射劑及其制備方法。

背景技術(shù)

目前用于溶栓的藥物主要有尿激酶(uk)，鏈激酶(sk)和組織型血纖溶酶原激活劑(t-PA)。其使用于溶栓的治療，都是采用靜脈滴注或推注，或推注與滴注相結(jié)合。也有直接注入血管的栓體周邊等方法，使血藥濃度短時(shí)間內(nèi)達(dá)到高峰。對(duì)急性血栓如心肌梗死治療可及時(shí)發(fā)揮作用，搶得寶貴的時(shí)間，得到治療效果。但對(duì)慢性的動(dòng)靜脈血栓治療，由于長(zhǎng)時(shí)間滴注不方便而不適用。

溶栓新藥葡激酶(Staphylokinase，Sak)具有纖維蛋白特異性，在臨床上，使用推注與滴注結(jié)合，將其用于急性心肌梗死血栓病人，再通率可達(dá)到80％。文獻(xiàn)報(bào)道，Steen?Vandersdueren等用r-sak治療周身動(dòng)脈血栓，血管內(nèi)先推注1mg或2mg，隨后以每小時(shí)0.5或1.0mg滴注給藥8個(gè)多小時(shí)，再通率達(dá)67.5％。但上述治療方法煩瑣、過程長(zhǎng)，而且不適于需較長(zhǎng)時(shí)間給藥的病人。目前，市售的r-sak為冷凍干燥針剤，用于治療急性心肌梗死血栓病人時(shí)，滴注給藥30鐘分完成；用于動(dòng)靜脈血栓治療時(shí)，需滴注給藥8個(gè)多小時(shí)。

Sak是異體蛋白，用于人體有較強(qiáng)的免疫原性。大多數(shù)病人給藥兩周后出現(xiàn)中和抗體，并且抗體水平逐漸上升，可以維持?jǐn)?shù)月之久，從而阻礙了Sak的反復(fù)使用(Declerck?PJ?et?al.Thromb?Haemost.71.129-133(1994))。

因此，本領(lǐng)域迫切需要提供一種免疫原性低的重組葡激酶及其新劑型，它使用方便，適于需長(zhǎng)時(shí)間給藥的病人，從而能避開長(zhǎng)時(shí)間滴注的煩瑣過程，并能提供更有效的預(yù)防治療。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種葡激酶的新劑型及其制備方法和用途。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種免疫原性低的重組葡激酶。

在本發(fā)明的第一方面，提供了一種葡激酶肌肉注射劑，它含有：

(a)0.5-40mg/ml葡激酶；

(b)藥學(xué)上可接受的溶劑或輔料。

在另一優(yōu)選例中，所述的葡激酶肌肉注射劑含有：1-10mg/ml葡激酶。

在另一優(yōu)選例中，所述的注射劑還含有5-12mM磷酸鹽，較佳地含有3-15mM磷酸鹽。

在另一優(yōu)選例中，上述注射劑的規(guī)格為1ml、2ml、或4ml。

在另一優(yōu)選例中，所述的注射劑的pH為6.5-7.5。

在另一優(yōu)選例中，所述的注射劑是固體形式，它含有0.5-400mg葡激酶和3-150mmol磷酸鹽，在加入肌肉注射用溶劑后，會(huì)復(fù)溶形成含有(a)0.5-40mg/ml葡激酶；(b)3-15mM磷酸鹽的溶液劑型。

在另一優(yōu)選例中，上述葡激酶肌肉注射劑中所含的葡激酶是天然葡激酶或重組葡激酶。

在另一優(yōu)選例中，上述葡激酶肌肉注射劑中所含的葡激酶是低抗原性重組葡激酶或其PEG化衍生物。

在另一優(yōu)選例中，上述的葡激酶肌肉注射劑中所含的葡激酶是缺失了野生型葡激酶N端的17-22個(gè)氨基酸。

在另一優(yōu)選例中，上述的葡激酶肌肉注射劑中所含的葡激酶與野生型葡激酶相比，其免疫原性為野生型葡激酶的10％或更低，所述的免疫原性的測(cè)定方法為：將一定量活性相當(dāng)?shù)囊吧推霞っ福偷涂乖凅w葡激酶與不同量野生型葡激酶的抗體在體外作中和試驗(yàn)，中和后計(jì)算殘存量。

在另一優(yōu)選例中，上述的葡激酶肌肉注射劑中所含的低抗原性重組葡激酶的核酸序列為SEQ?ID?NO：1，SEQID?NO：2或SEQ?ID?NO：3，其相應(yīng)的氨基酸序列為SEQ?ID?NO：4，SEQ?ID?NO：5或SEQ?ID?NO：6。

在另一優(yōu)選例中，所述的低抗原性重組葡激酶的核酸序列為SEQ?ID?NO：2，其相應(yīng)的氨基酸序列為SEQ?ID?NO：5。

在另一優(yōu)選例中，所述的低抗原性重組葡激酶的分子量為5,000-25,000道爾頓。

在本發(fā)明的第二方面，提供了一種上述的葡激酶肌肉注射劑的制備方法，它包括步驟：

(i)將葡激酶溶于藥學(xué)上可接受的注射用溶劑中，形成含0.5-40mg/ml葡激酶的葡激酶肌肉注射溶液；

(ii)將上述的注射溶液分裝于容器中，形成葡激酶肌肉注射劑。

在另一優(yōu)選例中，在步驟(i)和(ii)之間還包括步驟：調(diào)節(jié)pH為6.5-7.5和進(jìn)行除菌處理。