[發明專利]以動物膽汁為原料高效提取膽紅素和膽汁酸技術

無效

• 申請號: 200610015697.5
• 申請日: 2006-09-19
• 公開（公告）號: CN101148468A
• 公開（公告）日: 2008-03-26
• 發明（設計）人: 胡祥正;劉安軍;劉玉江
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C07J9/00
• 分類號: C07J9/00;C07D207/44;A61K35/413
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及從豬、牛、羊的膽汁中提取膽酸、去氧膽酸、膽紅素方法。其特征在于用于制備人工牛黃和其它功能藥物和材料。

背景技術

膽汁是在膽道中流動的一種特殊的體液，由哺乳動物肝臟分泌產生。在肝臟中形成后經膽囊管進入膽囊，并在那里儲存起來；進食后從膽囊中釋放出來，消化食物中的脂肪和類脂。膽汁中極大部分是水(約占97％)，在水中溶有許多種物質，其中包括能幫助脂肪消化和吸收的膽汁酸(約占2.5％)，以及與消化無關的肝的排泄物膽紅素(約占0.4％)。此外，膽汁中含有磷脂、膽固醇、鈉、鉀、鈣、磷酸鹽、碳酸鹽以及極少量蛋白質等成分。

天然牛黃是?？苿游锔稍锏哪懡Y石，其主要成分為膽紅素、膽酸、去氧膽酸、膽固醇、無機鹽等，是傳統名貴中藥材。由于其產量低，不能夠滿足市場需求，目前以牛黃做原料的藥物絕大多數是用人工牛黃代替天然牛黃。由于膽汁酸和膽紅素是制備人工牛黃的原料，促使從膽汁中提取膽汁酸和膽紅素的研究與生產技術的提高。國外從上個世紀60年代開始膽汁酸和膽紅素的提取工作，現在是技術成熟、設備先進、產品純度高、質量好；我國從上個世紀80年代展開膽汁酸和膽紅素的提取工作，現在有幾家企業進行這方面的生產，但是沒有高純度的膽汁酸和膽紅素商品，同時產品的產量也難以滿足日益擴大的市場需求。本發明提出了一種從豬、牛、羊的膽汁中聯合提取膽紅素和膽汁酸的方法，應用此種方法可以制備高純度膽紅素和膽汁酸；此種方法生產成本低，沒有污染和有毒物質排放。產品可以用于制備人工牛黃等藥物，為制藥行業提供必要的原料，解決市場供需缺口大的矛盾。

發明內容

本發明的目的是提供一種從豬、牛、羊的膽汁中提取膽酸、去氧膽酸、膽紅素方法。本發明從豬、牛、羊的膽汁中提取膽酸、去氧膽酸、膽紅素方法包括下述步驟：脫脂，水解，萃取，皂化與濃縮，酸化與沉淀，分離與純化。

具體實施方式

本發明合成所用的原料：新鮮膽汁(天津市肉類聯合加工廠提供)，濃鹽酸，氯仿，氫氧化鈉，乙醇(天津化學試劑公司)。熔點用X-4熔點儀測定。IR用Bio-RAD?FTS?135型傅立葉變換紅外光譜儀測定，KBr壓片。¹HNMR用Varian?Unity?Plus-300核磁共振儀測定，CDCl₃為溶劑，TMS為內標。元素分析用FOSSHeraeus元素分析儀測定。

實施操作

1)脫脂：將新鮮的膽汁冷卻，至其中析出的固體物不再增加，過濾，除去固體物。

2)水解：向除酯后的膽汁中加入氫氧化納，調節pH值為9～10，加熱至沸，保持沸騰10分鐘，冷卻。

3)萃?。合蛩饫鋮s后的膽汁中加入少量的亞硫酸氫鈉，攪勻后再加入約膽汁量四分之一體積的氯仿，攪拌下向其中滴加鹽酸，調節pH到5～6，充分攪拌后倒入分液漏斗靜置；分層后放出下層的氯仿，將中間層固體取出，將其溶于等量氯仿，再放入分液漏斗靜置，分層后將氯仿放出，與第一次等到的氯仿合并，旋蒸，得到膽紅素粗品，氯仿回收循環利用。分液后的上層膽汁備提取膽汁酸用。

4)膽紅素純化：將膽紅素粗品溶解于乙醇中，蒸發部分溶劑使膽紅素析出，過濾，將得到的固體物避光下真空干燥，得精品膽紅素(IR(cm^-1)：3411，3262，2918，2852，1696，1613，1441，1220，991，698)。

5)皂化與濃縮：向提取膽紅素后的膽汁中加入氫氧化納，調節pH值為10～11，加熱濃縮至大部分水分被蒸出，得固化物。

6)酸化與沉淀：將固化物溶于適量的乙醇中，向其中滴加鹽酸，調節pH至3～4，有沉淀析出，過濾，得固體膽汁酸混合物。

7)分離與純化：將得到的固體膽汁酸混合物溶解于適量的熱乙醇中，室溫冷卻，待析出固體物不增加，過濾，將得到的固體真空干燥，得膽酸純品(m.p.：196～198℃；IR(cm-1)：3352，2936，2868，1726，1464，1376，1177，981；1H-NMR(400MHz，DMSO3)：δ/ppm＝0.60(s，3H，18-H₃)，0.81(s，3H，19-H₃)，0.94(d，J＝6.0Hz，3H，21-H₃)，3.38(m，1H，3α-H)，3.61(s，7α-H)，3.78(s，12α-H))：濾液旋蒸，回收乙醇，得到的固體用氯仿重結晶，得去氧膽酸精品(m.p.：172～174℃；跟(cm-1)：IR(cm-1)：3371，2935，1734，1466，1447，1370，1078，9914；1H-NMR(400MHz，CDCl3)：6/ppm＝0.65(s，3H，18-H₃)，0.85(s，3H，19-H₃)，0.92(d，J＝6.0Hz，3H，21-H₃)，3.39(m，1H，3α-H)，3.82(s，12α-H))。