[發明專利]雪膽甲素的制備方法和在制備治療癌癥的藥物中的應用

有效

• 申請號: 200610010906.7
• 申請日: 2006-05-19
• 公開（公告）號: CN101074255A
• 公開（公告）日: 2007-11-21
• 發明（設計）人: 張人偉;程惠佳;樊獻俄
• 申請（專利權）人: 樊獻俄
• 主分類號: C07J9/00
• 分類號: C07J9/00;A61K31/575;A61P35/00
• 代理公司: 云南派特律師事務所
• 代理人: 張怡

技術領域

本發明涉及一種藥用成份雪膽甲素的制備方法，以及在制備治療癌癥的藥物中的新應用。

背景技術

雪膽素為一種混合物，由雪膽甲素和雪膽乙素組成。最早由陳維新等人從園果雪膽植物(Hemsleya?amalils?Diels)的根部分離得到(化學學報，1975，33(1)，5)，雪膽甲素鑒定為19—失碳--9β-甲基-10-3-氫-2β，3，16，20，25-五羥基Δ5羊毛甾烯-11，20-雙酮-25-乙酸酯(IIa)即葫蘆素F(Ic)的23.24-cc雙氫-25-乙酸酯，乙素鑒定為葫蘆素F(Ic)的23，24-雙氫化合物，為二種新的化合物，并研制雪膽素片劑，于1974年已收載于云南省藥品藥品標準，用于治療菌痢腸炎、氣管炎、急性扁桃腺炎。

為了尋找提取雪膽素的植物資源，一些學者先后對本屬植物進行了資源化學的研究，先后從羅鍋底(Hemsleya?maerosperma?c.y.wu)，長果雪膽(H，dolichocarp?W.J.cheng)峨眉雪膽(H，emiensil?L.T.Sent)分離出雪膽甲素，乙素，其提取方法與陳氏的提取方法類同，均用乙醇提取生藥，提取浸膏在水中用醋酸乙酯提取，提出物上硅膠柱，用氯仿：丙酮：醋酸乙酯三種不同比例的混合溶劑洗脫，洗脫液回收得粗品，再用乙醇重結晶，可分別得到甲素、乙素(參考文獻：Rui-Lin-Nie?etal.planta?Medica?1984:322:施亞琴等云南動植物研究。1990。12(4)，460；中草藥1995，26(12)，619)。

中國專利申請CN01102620.0公開了一種“納米雪膽素制劑藥物及其制備方法”，是以納米雪膽素為原料，按比例配制，制成新的藥物制劑，其顆粒細度達1200—1500目，粒徑為0.1—200nm，其中絕大部分粒徑小于100nm，并具有新的物性。采用微波萃取、減壓濃縮、超音速射流技術噴霧干燥等步驟制成。中國專利申請CN03159197.3公開了一種“雪膽素滴丸及其制備方法”，其特征在于：將1重量份經超微粉碎的雪膽素細粉加入至1～10重量份熔融的基質中，充分混勻，滴制法在冷卻劑中冷凝成丸，除冷卻劑，干燥，即得。中國專利申請CN02134164.8公開了一種“雪膽素類衍生物及其制備方法和作為抗菌劑的應用”，提供一種與現有技術不同的雪膽素衍生物，其制備方法，以該化合物為有效成分的抗菌劑。

目前，尚未發現雪膽甲素在抗癌的藥物中應用的報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種雪膽甲素的制備方法。

本發明的另一目的是提供雪膽甲素在制備治療癌癥的藥物中的應用。

本發明所述的雪膽甲素的制備方法由以下步驟組成：

一、取雪膽屬植物塊根，粉碎，用18—26重量倍的丙酮為溶劑，采用滲漉法提取，提取液在60—75℃水浴鍋中回收，即得浸膏；

二、將提出的浸膏拌入1—2重量倍的硅膠，烘干，上硅膠柱，用氯仿:甲醇進行梯度洗脫，其中甲醇體積濃度為2-10％，回收洗脫液，得粗品；

三、用甲醇或乙醇對粗品在水浴中加熱溶解，濾過，置室溫，重結晶，得凌柱狀結晶，即純度為98％以上的雪膽甲素。

步驟一中所述的雪膽屬植物為羅鍋底、長果雪膽、峨眉雪膽等。步驟二中先用純氯仿洗脫雜質，再用氯仿:甲醇梯度洗脫；步驟三中所得雪膽甲素經高效液相(HPLC)分析純度在98％以上，熔點226-228℃，經紫外光譜、紅外光譜、核磁共振、質譜四譜分析，確認為雪膽甲素。其結構式為：

本發明涉及雪膽甲素在制備治療肝癌的藥物中的應用。

本發明涉及雪膽甲素在制備治療肺癌的藥物中的應用。

本發明涉及雪膽甲素在制備治療胃癌的藥物中的應用。

本發明涉及雪膽甲素在制備治療喉癌的藥物中的應用。

本發明涉及雪膽甲素在制備治療白血病的藥物中的應用。

藥效學試驗資料：

雪膽甲素單體成份經藥理體內外抗癌試驗，確認本品體外對人體實體癌細胞具有抑制或殺滅作用，對人體肺癌細胞A549生長的Ic50(μg/ml)為1.50，與順鉑的Ic50?1.60基本相同，小鼠體內抗癌試驗與制劑類型，及給藥途徑相關，相比之下，口服給藥比注射給藥稍差，其乳劑靜脈注射對肺癌抑制率最高可達59％。

抗癌試驗：

1、體外篩選試驗，采用抗癌物質活性的改良MTT法進行。

癌細胞株：

HL60???????人白血病細胞株

A549???????人肺癌細胞株