[發明專利]高山被孢霉C16/18脂肪酸延伸酶

有效

• 申請號: 200580051888.0
• 申請日: 2005-11-04
• 公開（公告）號: CN101563356A
• 公開（公告）日: 2009-10-21
• 發明（設計）人: D·J·馬庫爾;Z·薛;Q·Q·朱
• 申請（專利權）人: 納幕爾杜邦公司
• 主分類號: C07H21/04
• 分類號: C07H21/04;C12N15/82;C12P7/64;C12N15/74
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 劉 健;梁 謀

1.一種編碼C_16/18脂肪酸延伸酶的分離的核酸分子，所述分離的 核酸分子選自：

(a)編碼SEQ?ID?NO：2所示氨基酸序列的分離的核酸分子； 或

(b)與(a)完全互補的分離的核酸分子。

2.權利要求1的分離的核酸分子，其中所述分離的核酸分子是 SEQ?ID?NO：1。

3.由權利要求1的分離的核酸分子編碼的多肽。

4.一種嵌合基因，其包含與適合的調節序列可操縱地連接的權利 要求1的分離的核酸分子。

5.一種產生硬脂酸的方法，所述方法包括

a)提供產油酵母，所述產油酵母包含處在適合的調節序列的控制 下的、編碼如SEQ?ID?NO：2中所示的具有C_16/18脂肪酸延伸酶活性的 多肽的分離的核酸，

b)提供包含棕櫚酸的延伸酶底物源，

c)在一定條件下與(b)的延伸酶底物一起生長步驟(a)的產油 酵母，在所述條件中步驟(a)(i)或步驟(a)(ii)的核酸分子被表達 并且產生硬脂酸，和

d)任選地回收步驟(c)的硬脂酸。

6.一種生產多不飽和脂肪酸的方法，所述方法包括

a)提供產油酵母，其包含

(i)編碼如SEQ?ID?NO：2中所示具有C_16/18脂肪酸延伸 酶活性的多肽的分離的核酸，

(ii)編碼功能性多不飽和脂肪酸生物合成途徑的基因，

b)提供包含棕櫚酸的延伸酶底物源，和

c)在一定條件下與(b)的延伸酶底物一起生長步驟(a)的產油 酵母，在所述條件下產生多不飽和脂肪酸，和

d)任選地回收步驟(c)的多不飽和脂肪酸。

7.根據權利要求6的方法，其中所述多不飽和脂肪酸選自亞油酸、 γ-亞麻酸、二十碳二烯酸、二高-γ-亞麻酸、花生四烯酸、α-亞麻酸、 stearidonic?acid、二十碳三烯酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸、二十 二碳五烯酸和二十二碳六烯酸。

8.根據權利要求6的方法，其中所述編碼功能性多不飽和脂肪酸 生物合成途徑的基因編碼選自Δ9脫飽和酶、Δ12脫飽和酶、Δ6脫飽 和酶、C_18/20脂肪酸延伸酶、Δ5脫飽和酶、Δ17脫飽和酶、C_20/22脂肪 酸延伸酶、Δ4脫飽和酶、Δ15脫飽和酶、Δ9脂肪酸延伸酶和Δ8脫 飽和酶的酶。

9.根據權利要求5或6的任一項的方法，其中所述產油酵母選自 耶羅維亞酵母屬物種(Yarrowia?sp.)、假絲酵母屬物種(Candida?sp.)、紅 酵母屬物種(Rhodotorula?sp.)、紅冬孢酵母屬物種(Rhodosporidium?sp.)、 隱球菌屬物種(Cryptococcus?sp.)、絲孢酵母屬物種(Trichosporon?sp.)和 油脂酵母屬物種(Lipomyces?sp.)。

10.根據權利要求9的方法，其中所述耶羅維亞酵母屬物種 (Yarrowia?sp.)選自解脂耶羅維亞酵母(Yarrowia?lipolytica)ATCC #20362、解脂耶羅維亞酵母(Yarrowia?lipolytica)ATCC#18944、解脂耶 羅維亞酵母(Yarrowia?lipolytica)ATCC#76982和解脂耶羅維亞酵母 (Yarrowia?lipolytica)LGAM?S(7)1。