[發明專利]稻的鄰氨基苯甲酸合成酶基因OASA2的新改良基因及其用途

無效

• 申請號: 200580048702.6
• 申請日: 2005-10-11
• 公開（公告）號: CN101128584A
• 公開（公告）日: 2008-02-20
• 發明（設計）人: 戶澤讓;菅野拓也;若狹曉
• 申請（專利權）人: 國立大學法人愛媛大學;獨立行政法人科學技術振興機構;獨立行政法人農業和食物綜合產業技術研究機構
• 主分類號: C12N15/60
• 分類號: C12N15/60;A01H5/00;C12N5/10;C12N9/88;C12Q1/02
• 代理公司: 北京邦信陽專利商標代理有限公司
• 代理人: 黃澤雄;崔華

1.一種多肽，其特征在于，所述多肽在序列號1中所示的氨基酸序列的第126位、第367位或第369位中的至少一個位置上具有變異，且對色氨酸生物合成途徑中色氨酸產生的反饋抑制具有抗性。

2.根據權利要求1所述的多肽，所述多肽在序列號1中所示的氨基酸序列的第351位、第522位或第530位的至少一個位置上具有變異，其特征在于，所述多肽具有野生型稻鄰氨基苯甲酸合成酶至少0.7倍以上的酶活性。

3.根據權利要求1或2所述的多肽，其特征在于，所述多肽在所述序列號1中所示的氨基酸序列的第126位的變異為將絲氨酸取代為苯丙氨酸的變異，在所述序列號1中所示的氨基酸序列的第367位的變異為將酪氨酸取代為丙氨酸或異亮氨酸的變異，在所述序列號1中所示的氨基酸序列的第369位的變異為將丙氨酸取代為亮氨酸的變異。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的多肽，其特征在于，所述多肽在所述序列號1中所示的氨基酸序列的第351位的變異為將天冬酰胺取代為天冬氨酸的變異，在所述序列號1中所示的氨基酸序列的第522位的變異為將甘氨酸取代為酪氨酸的變異，在所述序列號1中所示的氨基酸序列的第530位的變異為將亮氨酸取代為丙氨酸或天冬氨酸的變異。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的多肽，其特征在于，所述多肽為序列號2至7和序列號29至32中的任一項所示的氨基酸序列構成的多肽，或序列號2至7和序列號29至32中任一項所示的氨基酸序列中缺失、取代或添功加了1個或多個氨基酸的氨基酸序列構成的多肽。

6.一種多肽，所述多肽在鄰氨基苯甲酸合成酶的色氨酸結合區域有變異，其特征在于，所述多肽在序列號26中所示的氨基酸序列的第5位有變異，并且對色氨酸生物合成途徑中色氨酸產生的反饋抑制具有抗性。

7.根據權利要求6所述的多肽，其特征在于，所述多肽在所述序列號26中所示的氨基酸序列的第5位的變異為將酪氨酸取代為丙氨酸或異亮氨酸的變異。

8.編碼根據權利要求1至7中任一項所述的多肽的多核苷酸。

9.根據權利要求8所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸為序列號9至14和序列號33至36任一項所示的堿基序列構成的多核苷酸，或與序列號9至14和序列號33至36任一所示的堿基序列構成的多核苷酸相互補的堿基序列構成的多核苷酸在嚴謹條件下雜交的多核苷酸。

10.根據權利要求8或9所述的多核苷酸構成的轉化體選擇用標記基因。

11.含有根據權利要求8或9所述的多核苷酸的重組表達載體。

12.導入了根據權利要求8或9所述的多核苷酸或根據權利要求11所述的重組表達載體，并且表達對色氨酸生物合成途徑中色氨酸產生的反饋抑制具有抗性的多肽的轉化體。

13.根據權利要求12所述的轉化體，其特征在于，所述轉化體是植物細胞或植物體。

14.從根據權利要求13所述的植物體獲得的種子。

15.一種轉化細胞的選擇方法，其特征在于，所述方法由以下步驟構成：通過在細胞中導入根據權利要求10所述的標記基因或根據權利要求11所述的重組表達載體，賦予細胞對抑制細胞增殖的色氨酸類似化合物的抗性，并且選擇表達對該色氨酸類似化合物的抗性的細胞。

16.一種轉化試劑盒，其特征在于，所述試劑盒至少含有根據權利要求8或9所述的多核苷酸、或根據權利要求11所述的重組表達載體中的任意一種。

17.一種篩選方法，所述方法為篩選只與根據權利要求1至5中任一項中所述的多肽和野生型稻鄰氨基苯甲酸合成酶中的任意一個結合的物質的方法，其特征在于，所述方法包括篩選與根據權利要求1至5中任一項所述的多肽結合的物質的步驟，篩選與野生型稻鄰氨基苯甲酸合成酶結合的物質的步驟，和比較上述兩步驟的結果的步驟。

18.一種用于實施根據權利要求17所述的篩選方法的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒至少含有根據權利要求1至5中任一項所述的多肽和野生型稻鄰氨基苯甲酸合成酶。