[發明專利]超高通量篩選天然產物的方法及組合物

無效

• 申請號: 200580048121.2
• 申請日: 2005-12-16
• 公開（公告）號: CN101120084A
• 公開（公告）日: 2008-02-06
• 發明（設計）人: R·H·巴爾茲;C·莫納汗;C·莫菲;J·彭;D·里茲;S·里格雷
• 申請（專利權）人: 卡比斯特制藥公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N5/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所
• 代理人: 黃革生;凌立

1.包含多抗藥性基因的細胞，其中至少兩個不同的抗藥性基因人工重 組至所述細胞的染色體。

2.權利要求1的細胞，其中至少兩個不同的抗藥性基因的第一個抗藥 性基因人工重組至必需染色體基因座。

3.權利要求1的細胞，其中至少兩個不同的抗藥性基因的第一個抗藥 性基因人工重組至非必需染色體基因座。

4.權利要求2的細胞，其中至少兩個不同的抗藥性基因的第二個抗藥 性基因人工重組至非必需染色體基因座。

5.權利要求2的細胞，其中重組前所述細胞必需染色體基因座編碼至 少一種參與必需營養物生物合成的基因產物，并且所述第一個抗藥性基因 人工重組至必需染色體基因座，因此使得所述細胞是營養缺陷型的。

6.權利要求1的細胞，其另外包含至少一種營養缺陷型突變。

7.權利要求1的細胞，其另外包含受到啟動子基因調控的報道基因， 所述啟動子基因應答于所述細胞的生理條件。

8.權利要求1的細胞，其中通過對所述細胞基因型的人工改造改變了 所述細胞的外膜通透性。

9.權利要求7的細胞，其中所述人工改造增加了外膜通透性。

10.權利要求7的細胞，其中所述人工改造減少了外膜通透性。

11.權利要求1的細胞，其中通過所述細胞基因型人工改造改變了所 述細胞對細胞毒性劑的敏感性。

12.權利要求11的細胞，其中人工改造增加了所述細胞對細胞毒性劑 的敏感性。

13.權利要求11的細胞，其中人工改造減少了所述細胞對細胞毒性劑 的敏感性。

14.權利要求1的細胞，其中所述細胞是細菌、真菌細胞、哺乳動物 細胞、植物細胞或昆蟲細胞。

15.權利要求12的細胞，其中所述細胞是革蘭氏陽性細菌或革蘭氏陰 性細菌。

16.權利要求15的細菌，其中所述細菌是大腸桿菌、沙門氏菌屬、克 雷伯氏菌屬(Klebsiella)、不動桿菌屬、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、 肺炎鏈球菌、糞腸球菌、屎腸球菌、鏈霉菌屬、擬無枝酸菌屬、糖多孢菌 屬(Saccharopolyspora)、小棘孢菌屬(Micromonospora)或鏈孢囊菌屬 (Streptosporangium)的菌株。

17.權利要求15的細菌，其中至少一種抗藥性基因賦予了對氨芐青霉 素、氨基糖苷、阿布拉霉素、博來霉素、β-內酰胺、氯霉素、萘啶酮酸、 新霉素、壯觀霉素、鏈霉素、鏈絲菌素、四環素、甲氧芐啶或萬古霉素的 抗性。

18.權利要求15的細菌，其中至少一種抗藥性基因是pbp5、blaZ、 aph(2”)-Ib、aac(6′)-Im、aac(3′)-IV、TEM-1?bla、cat、nalA37、neo、aadA1、 rpsL150、sat、dhfrI、dfrB2、tetA、ble或vanA。

19.權利要求15的細菌，其中所述報道基因受到應答于所述細菌生理 條件的啟動子基因的調控。

20.權利要求19的細菌，其中所述報道基因是lacZ、熒光素酶報道基 因、GFP報道基因或RFP報道基因。

21.權利要求19的細菌，其中所述生理條件是細胞應激。

22.權利要求21的細菌，其中所述細胞應激是DNA損傷。

23.權利要求19的細菌，其中所述啟動子是PsulA或PsecN。

24.權利要求15的細菌，其中所述細菌基因型的人工改造改變了所述 細菌的外膜通透性。

25.權利要求24的細菌，其中所述基因型的人工改造增加了所述細菌 的外膜通透性。