[發明專利]解脂耶氏酵母的高花生四烯酸酸生產菌株

無效

• 申請號: 200580045910.0
• 申請日: 2005-11-03
• 公開（公告）號: CN101437952A
• 公開（公告）日: 2009-05-20
• 發明（設計）人: H·G·達穆德;P·J·吉利斯;D·J·馬庫爾;S·K·皮卡塔吉奧;D·M·W·波拉克;J·J·拉希安蒂;薛志雄;N·S·亞達夫;張宏祥;朱群
• 申請（專利權）人: 納幕爾杜邦公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12N9/10;C12P21/06;C12N1/18;C07H21/04;C12N15/74
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 李 波;黃可峻

1.用于生產花生四烯酸的重組生產宿主細胞，包括背景耶氏酵母 種，其中包含基因集合，所述集合包含ω-3/ω-6脂肪酸生物合成途徑 的以下基因：

a)至少一種編碼Δ6去飽和酶的基因；

b)至少一種編碼C_18/20延伸酶的基因；和

c)至少一種編碼Δ5去飽和酶的基因。

2.用于生產花生四烯酸的重組生產宿主細胞，包括背景耶氏酵母 種，其中包含基因集合，所述集合包含ω-3/ω-6脂肪酸生物合成途徑 的以下基因：

a)至少一種編碼Δ9延伸酶的基因；

b)至少一種編碼Δ8去飽和酶的基因；和

c)至少一種編碼Δ5去飽和酶的基因。

3.權利要求1或2的重組生產宿主，其中該基因集合任選包含至 少一種編碼Δ12去飽和酶的基因。

4.權利要求3的重組生產宿主，其中該背景耶氏酵母種不含任何 編碼具有Δ12去飽和酶活性的多肽的天然基因。

5.權利要求1或2的重組生產宿主，其中所述ω-3/ω-6脂肪酸生 物合成途徑基因的至少一種基因處于具有選自SEQ?ID?NOs：158-168 和364的核酸序列的啟動子序列的控制下。

6.權利要求3的重組生產宿主，其中所述Δ12去飽和酶具有選自 SEQ?ID?NOs：24、26、28、30、31、32、34、36、38、358、359、361、 362和363的氨基酸序列。

7.權利要求1的重組生產宿主細胞，其中所述Δ6去飽和酶具有 選自SEQ?ID?NOs：2和5的氨基酸序列；并且其中所述C_18/20延伸酶 具有選自SEQ?ID?NOs：18和21的氨基酸序列。

8.權利要求2的重組生產宿主細胞，其中所述Δ9延伸酶具有選 自SEQ?ID?NOs：40和18的氨基酸序列，并且其中所述Δ8去飽和酶 具有選自SEQ?ID?NOs：45、47和49的氨基酸序列。

9.權利要求1或2的重組生產宿主細胞，其中所述Δ5去飽和酶 具有選自SEQ?ID?NOs：7、9和12的氨基酸序列。

10.權利要求1或2的重組生產宿主，其中該基因集合任選包含 選自下組的ω-3/ω-6脂肪酸生物合成途徑基因：

a)至少一種編碼Δ9去飽和酶的基因；

b)至少一種編碼C_16/18延伸酶的基因；和

c)至少一種編碼C_14/16延伸酶的基因。

11.權利要求10的重組生產宿主，其中所述C_16/18延伸酶具有選 自SEQ?ID?NOs：51、54和62的氨基酸序列，并且其中所述C_14/16延 伸酶具有SEQ?ID?NO：65所示的氨基酸序列。

12.權利要求1或2的重組生產宿主，其中該基因集合任選包含 至少一種編碼選自下組的酰基轉移酶的基因：

(1)二酰基甘油酰基轉移酶(DGAT1)；

(2)二酰基甘油酰基轉移酶(DGAT2)；

(3)磷脂：二酰基甘油酰基轉移酶(PDAT)；

(4)酰基-CoA：1-酰基溶血磷脂酰膽堿酰基轉移酶(LPCAT)；

(5)甘油-3-磷酸酰基轉移酶(GPAT)；和

(6)溶血磷脂酸酰基轉移酶(LPAAT)。