[發明專利]鞭毛蛋白在腫瘤免疫療法中的用途

無效

• 申請號: 200580045667.2
• 申請日: 2005-12-16
• 公開（公告）號: CN101094686A
• 公開（公告）日: 2007-12-26
• 發明（設計）人: S·B·米策爾
• 申請（專利權）人: 韋克福里斯特大學健康科學院
• 主分類號: A61K39/02
• 分類號: A61K39/02
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 程淼;梁謀

相關申請信息

本申請要求2004年12月16日提交的美國臨時申請序號60/636,635和2005年8月19日提交的美國臨時申請序號60/709,609的優先權，將這些臨時申請的公開內容通過引用完整并入本文作為參考。

聯邦政府支持聲明

本發明得到來自國家健康研究所(National?Institutes?of?Health)的根據授權號R01-AI051319和T32-AI007401的政府支持。美國政府擁有本發明的某些權利。

發明領域

本發明涉及鞭毛蛋白佐劑、腫瘤抗原和其融合蛋白用于產生腫瘤的免疫應答(例如，在預防或者治療方法中)的用途。

發明背景

當前接受的治療乳腺癌的治療包括手術、化學療法和放射療法。免疫療法代表相對新的療法，人們對其已經產生了極大興趣(Ribas等人(2003)J.Clin.Oncol.21：2415-2432；Scanlan等人(2001)BreastCancer?Res.3：95-98；Jager等人(2002)Curr.Opin.Immunol.14：178-182；Ko等人(2003)Clin.Cancer?Res.9：3222-3234)。免疫學方法的主要優點是它不是侵入性的并且它選擇性靶定乳腺癌細胞，不傷害正常的細胞。近年來，研究人員已經確定了許多突變的或者被乳腺癌細胞不適當表達的蛋白質，它們可以作為免疫療法的有用靶標。例如，已經用粘蛋白(MUC-I)、HER-2/neu、CEA和hTERT疫苗啟動了I/II期臨床試驗(綜述見Ko等人(2003)Clin.Cancer?Res.9：3222-3234)。盡管許多這些研究已經揭示了增強的免疫反應性的例子，例如，T細胞增殖或者細胞毒性T細胞活性，但是臨床結果已經局限于相對小部分患者。

對腫瘤疫苗缺少強的臨床應答可能是由于幾種因素的組合。因為多數靶標腫瘤抗原過表達，但不是突變的，可能自身耐受性阻礙了強烈應答。然而，對于這些抗原的突變形式，可能不是這樣的情況。備選地，已經用于免疫患者的方案可以促進產生低親合力而非高親合力(avidity)的T細胞(討論見Ko等人(2003)Clin.Cancer?Res.9：3222-3234)；高親合力細胞在腫瘤細胞清除中最有效。最后，腫瘤細胞過量產生轉化生長因子β(TGF-β)可以顯著限制可能有效的接種策略的有效性。

在其它系統中的工作已經建立了佐劑在增強弱免疫應答中的價值。從而，可能需要有效的佐劑來允許免疫系統不僅克服腫瘤來源的TGFβ的免疫抑制作用，而且促進產生高親合力抗腫瘤T細胞、NK細胞、或者抗體。應該注意到許多疫苗方案已經使用了多種佐劑：從各細胞因子(例如，IL-2、IL-12、γ干擾素、或者GM-CSF)到微生物細胞組分(例如，Detox?B或者BCG)。盡管各細胞因子具有一定的佐劑活性，但是它們的有效性可能受到它們各自的生物活性范圍的限制。明顯需要開發和測試促進更有效的抗腫瘤應答的新的佐劑。

人們希望提供用于產生針對癌癥的免疫應答的改進的試劑、藥物制劑和方法。

發明概述

本發明的第一方面是融合蛋白，其組成為或者基本上為：(a)鞭毛蛋白佐劑，該鞭毛蛋白佐劑組成為或者基本上為(i)鞭毛蛋白N-末端恒定區；(ii)鞭毛蛋白C-末端恒定區；和(b)在N-末端恒定區和C-末端恒定區之間的腫瘤抗原(例如，插入到或者代替鞭毛蛋白高變區的部分或者全部，該鞭毛蛋白高變區任選被部分或者完全缺失)。

本發明的另一方面是編碼如上文所述的融合蛋白的核酸。在一些實施方案中，核酸可操作地連接啟動子。

本發明的另一方面是包含如上文所述的核酸的載體。

本發明的另一方面是包含如上文所述的核酸或者載體的宿主細胞。在一些實施方案中，宿主細胞表達所編碼的融合蛋白。

本發明的另一方面是制備如上文所述的融合蛋白的方法，該方法包括將包含編碼如上文所述的融合蛋白的核酸的宿主細胞在合適的培養基中足夠產生所述融合蛋白的條件下培養。任選地，從宿主細胞或者培養基收集融合蛋白。

本發明的另一方面是組合物，其包含、組成為或者組成基本上為：(a)鞭毛蛋白佐劑，和(b)腫瘤抗原(腫瘤抗原和鞭毛蛋白佐劑是分開的，或者相互連接的，即融合蛋白的形式，例如，如本文描述的融合蛋白)。

本發明的另一方面是藥物制劑，其包含可藥用載體中的如上文所述的融合蛋白或者組合物。