[發明專利]具有植酸酶活性的多肽和編碼多肽的核苷酸序列

有效

• 申請號: 200580042928.5
• 申請日: 2005-10-14
• 公開（公告）號: CN101080491A
• 公開（公告）日: 2007-11-28
• 發明（設計）人: K·Q·源;B·溫特爾
• 申請（專利權）人: AB酶有限公司
• 主分類號: C12N9/16
• 分類號: C12N9/16;C12N15/63;C12N15/55
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所
• 代理人: 黃革生;林柏楠

1.重組DNA分子，在原核或真核宿主細胞中表達時，其編碼具有植 酸酶活性的多肽，其中，所述重組DNA分子由選自如下的DNA序列組成：

(a)由SEQ?ID?NO：5所示的成熟的野生型大腸桿菌植酸酶序列變異 得到的DNA序列，其特征在于，與野生型序列比較，在位置200或207 處的氨基酸發生突變，所述突變選自Val?200→Leu、Val?200→Pro、Val 200→Tyr、或Leu?207→Phe，

(b)由于遺傳密碼的簡并性而與a)中序列相關的DNA序列，

其中所述重組DNA分子在合適的宿主細胞中表達時，伴隨著培養上 清中所編碼蛋白質活性的增加。

2.根據權利要求1的重組DNA分子，特征在于其由SEQ?ID?NO：1 的序列組成。

3.具有植酸酶活性的多肽，由根據權利要求1-2中任一項的重組DNA 分子編碼，或通過由之轉化的宿主細胞表達獲得。

4.根據權利要求3的多肽，特征在于其由SEQ?ID?NO：2的序列組成。

5.DNA構建體，其在引入到合適的宿主細胞中時，能夠控制突變的植 酸酶基因在宿主中表達，特征在于，其含有任選的啟動子、任選的信號序 列和標記序列、根據權利要求1-2中任一項的DNA序列、終止子和任選的 5，和3，側翼序列。

6.根據權利要求5的DNA構建體，其特征在于，啟動子是纖維二糖 水解酶I、纖維二糖水解酶II、淀粉酶、木聚糖酶或烯醇化酶的啟動子。

7.根據權利要求5的DNA構建體，其特征在于，啟動子是葡萄糖淀 粉酶啟動子。

8.根據權利要求5的DNA構建體，其特征在于，信號序列是任選修 飾的來自黑曲霉的植酸酶信號序列。

9.具有轉化宿主細胞能力的載體，特征在于，所述載體含有根據權利 要求5的構建體。

10.根據權利要求9的載體，特征在于，它是質粒Da2pUC3，保藏號 為DSM?16396。

11.轉化的宿主細胞，選自真菌、細菌和哺乳動物細胞，含有根據權 利要求1-2中任一項的重組DNA分子，并具有表達具有植酸酶活性多肽的 能力。

12.根據權利要求11的轉化的宿主細胞，特征在于，其為酵母細胞。

13.根據權利要求11的轉化的宿主細胞，特征在于，它屬于曲霉菌屬、 根霉菌屬、木霉菌屬、脈孢菌屬、毛霉菌屬或青霉菌屬。

14.生產植酸酶的方法，特征在于，在有利于形成植酸酶的條件下培 養根據權利要求11或12或13的轉化的宿主細胞，并分離所產生的植酸酶。

15.組合物，包含根據權利要求3或4的多肽，任選地還包含其他輔 劑。

16.權利要求15的組合物，還包含其它活性劑。

17.根據權利要求15的組合物，特征在于它是食品或飼料組合物。

18.根據權利要求15-17之任一項的組合物，特征在于組合物是烘焙 助劑。

19.根據權利要求3或4的多肽在制備改善動物和人類營養中磷利用 的制品中的用途。

20.根據權利要求3或4的多肽在改善用于生產烘焙產品的生面團的 流變學特性中的用途。