[發明專利]微生物檢測與定量

有效

• 申請號: 200580042821.0
• 申請日: 2005-10-24
• 公開（公告）號: CN101080497A
• 公開（公告）日: 2007-11-28
• 發明（設計）人: J·G·麥唐納;S·M·馬丁;J·利
• 申請（專利權）人: 金伯利－克拉克環球有限公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12Q1/06
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 劉冬;梁謀

相關申請

本申請是2004年12月16日提交的PCT/US2004/042461號國際申請的部分繼續申請，該國際申請要求2003年12月16日提交的美國專利申請第10/737,574號的優先權。

發明背景

本發明涉及檢測微生物如細菌、酵母、霉菌和病毒的方法和產品。

在我們的日常生活中，我們不知不覺地暴露于受微生物污染的物體表面，這會導致發生疾病。已有研究表明，具體的細菌污染“熱點”包括公用電話、門把手、醫生候診室和兒童看護場所中的玩具、干手用熱風干燥機、廚房中使用的毛巾和海綿、進行日?；颊咦o理的醫護人員的手以及混合生肉和蔬菜的食品制作表面和刀具的交叉污染。

最近單在美國幾個地方發生的細菌污染爆發事件，就已導致一些兒童和老年人死亡和其它人得病。食品的微生物污染也是全世界的主要問題。沙門氏菌、大腸桿菌和其它食品傳染細菌每年造成數不清的病例。急性癥狀包括惡心、嘔吐、腹部絞痛、腹瀉、發燒和頭痛。急性癥狀發作后接著可能就是慢性后果。由于物體表面的交叉污染會引起細菌從肉、魚和家禽向未煮熟食品如蔬菜的轉移，容易地檢測出細菌在食品制作表面上的存在的能力將具有極大益處。

同樣，食品加工企業中對有害水平的微生物的檢測，對于保持各個家庭和消費者的健康是十分重要的。在食品加工工業中，細菌監測是至關重要的。幾乎所有的食品的加工，無論從肉類包裝到干酪生產，都涉及到監測微生物水平，以確保食品供應的安全性。

微生物污染帶來的災難不僅限于食品工業。最近幾十年見證了“超級細菌(superbug)”的急劇增多，這個問題就集中出現在醫院和保健機構中。抗生素的過度使用和醫院清潔的不足已催生了甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌(S.aureus)(MRSA)和艱難梭菌(Clostridiumdifficfle)以及萬古霉素耐藥腸球菌和其它革蘭氏陰性桿菌(Dancer，2004)。最近英國廣播公司(BBC)的報告說到，MRSA每年估計奪走5000條生命。報告文章接著斷言“清潔仍然是主要的患者關注問題，MRSA是個越來越嚴重的問題。”試想醫院里的許多患者已經無免疫應答作用，因此發生感染的風險更高，醫院環境中的惡毒細菌所造成的威脅會變得越加險惡。

有許多報告和研究在探討醫院清潔和醫院傳染防治的課題。

同樣，已知霉菌如麥角菌能在某些谷物如黑麥中生長，它們由于會產生與麥角酸相似的毒性生物堿而具有潛在的危害性。已知黑曲霉(Aspergillus?niger)和其它霉菌產生的孢子會造成過敏反應及加重呼吸道病癥如哮喘。如果黑曲霉在潮濕墻壁上或者在家庭或商業建筑中的空調設備中開始生長，就會特別成問題。

某些酵母如白色念珠菌(Candida?albicans)可代表另一類討厭的微生物。已將白色念珠菌與嬰兒尿布疹、兒童和無免疫應答成人的鵝口瘡以及陰道酵母感染聯系起來。酵母還會感染身體的口咽區以及胃腸道。

目前的細菌檢測方法涉及到從設備表面采集樣品。在食品加工環境中，設備可能是切肉機械，而在食品制作環境如餐館中或在家庭里，表面可能是桌子、砧板、冰箱內部或工作表面。然后將樣品溫育過夜以生長出培養物。過夜生長培養是讓樣品在瓊脂平板上于適當的溫度和濕度下生長，使細菌生長和繁殖至形成大得足以肉眼可見的菌落。在溫育了規定的時間和讓細菌菌落生長出來后，由經過訓練的技術人員人工檢查瓊脂平板樣品并估計菌落形成單位(CFU)。這個方法花費有些高，且時間上極大滯后；在滯后時間當中污染產品可能已被運輸出去或者人們已暴露于所存在的微生物。

由上可知，需要有便于快速檢測有害微生物的方法和產品。

發明概述

為應對本領域技術人員碰到的前述困難，我們開發出了一種指示組合物，它包括流動相和在微生物存在下會發生明顯可檢測變化的微生物靈敏色料(colorant)。所述組合物可施加到表面以顯示微生物的存在。流動相可以是消毒劑。色料在微生物存在下提供肉眼可見的顏色變化。流動性可以是液體或凝膠，色料可以是染料(dye)。在一些實施方案中，色料改變顏色的程度與微生物的濃度成比例。在其它實施方案中，所存在的微生物的數量與發生顏色變化的色料的量成比例。