[發明專利]二酰甘油酰基轉移酶測定法

無效

• 申請號: 200580042578.2
• 申請日: 2005-12-13
• 公開（公告）號: CN101084319A
• 公開（公告）日: 2007-12-05
• 發明（設計）人: K·A·G·J·M·德韋佩奈爾特;D·C·G·彼得斯;G·M·R·范赫克;P·G·I·韋爾莫朗;M·J·M·貝韋爾
• 申請（專利權）人: 詹森藥業有限公司
• 主分類號: C12Q1/61
• 分類號: C12Q1/61
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 程淼;劉玥

1.測量DGAT活性的方法，所述方法包括：將包含至少一種DGAT底物的膠束與包含DGAT的微粒體接觸，并測定所得反應混合物中的甘油三酯產量。

2.根據權利要求1的方法，其中包含DGAT底物的膠束選自：

-包含磷脂酰絲氨酸或者磷脂酰膽堿的膠束；

-包含磷脂酰絲氨酸和磷脂酰膽堿的膠束；或

-包含重量比為1∶1的磷脂酰絲氨酸和磷脂酰膽堿的膠束。

3.根據權利要求1的方法，其中反應混合物還包含輔酶A活化的脂肪酸。

4.根據權利要求3的方法，其中輔酶A活化的脂肪酸選自棕櫚酰-CoA或者油酰基-CoA。

5.根據權利要求3或4的方法，其中所述輔酶A活化的脂肪酸的部分被可檢測性地標記。

6.根據權利要求5的方法，其中所述輔酶A活化的脂肪酸的部分被放射性標記。

7.根據權利要求3到6任一項的方法，其中輔酶A活化的脂肪酸是油酰基-CoA，并且所述油酰基-CoA的部分是[³H]-油酰基-CoA。

8.根據權利要求1的方法，其中DGAT底物由硬脂酰-2-花生四烯酰-sn-甘油或者1，2-二油酰基-sn-甘油組成。

9.根據權利要求1的方法，其中包含DGAT的微粒體是表達人DGAT1(SEQ?ID?No.2)蛋白質的昆蟲細胞的膜制備物。

10.根據權利要求1的方法，其中使用閃爍固相支持體介質測定甘油三酯的生產。

11.鑒定測試化合物是否能夠調節DGAT活性的方法，所述方法包括：在存在和不存在測試化合物時，將包含至少一種DGAT底物的膠束與包含DGAT的微粒體接觸，并測定所得到的反應混合物中的甘油三酯產量，并且其中存在測試化合物時甘油三酯產量的改變表明所述化合物能夠調節DGAT活性。

12.根據權利要求11的方法，其中包含DGAT底物的膠束選自：

-包含磷脂酰絲氨酸或者磷脂酰膽堿的膠束；

-包含磷脂酰絲氨酸和磷脂酰膽堿的膠束；

-包含的磷脂酰膽堿濃度小于或等于磷脂酰絲氨酸濃度的膠束；

-包含3∶1摩爾比的磷脂酰絲氨酸和磷脂酰膽堿的膠束；

-包含3.5∶1.3摩爾比的磷脂酰絲氨酸和磷脂酰膽堿的膠束。

13.根據權利要求11的方法，其中反應混合物還包含輔酶A活化的脂肪酸。

14.根據權利要求13的方法，其中輔酶A活化的脂肪酸選自棕櫚酰-CoA或者油酰基-CoA。

15.根據權利要求13或14的方法，其中所述輔酶A活化的脂肪酸的部分被可檢測性地標記。

16.根據權利要求15的方法，其中所述輔酶A活化的脂肪酸的部分被放射性標記。

17.根據權利要求13到16任一項的方法，其中輔酶A活化的脂肪酸是油酰基-CoA并且所述油酰基-CoA的部分是[³H]-油酰基-CoA。

18.根據權利要求11的方法，其中DGAT底物由硬脂酰-2-花生四烯酰-sn-甘油或者1，2-二油酰基-sn-甘油組成。

19.根據權利要求11的方法，其中包含DGAT的微粒體是表達人DGAT1(SEQ?ID?No.2)蛋白質的昆蟲細胞的膜制備物。

20.根據權利要求11的方法，其中使用閃爍固相支持體介質測定甘油三酯產量。

21.治療病理特征是DGAT酶的作用的疾病，尤其是肥胖癥和高三酰甘油相關疾病的方法，所述方法包括對需要其的受試者施用治療有效量的使用根據權利要求11到20任一項的方法鑒定的化合物。