[發明專利]可將生物活性化合物遞送到反芻動物腸道的細菌的培養方法

無效

• 申請號: 200580041808.3
• 申請日: 2005-12-06
• 公開（公告）號: CN101072864A
• 公開（公告）日: 2007-11-14
• 發明（設計）人: 萊爾·M·羅得;詹姆士·C·紐勃得
• 申請（專利權）人: 賽格生物科學有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K1/18;C12N1/36;C12Q1/04;A23K1/16;C12R1/15
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所
• 代理人: 江鎮華

1.一種提高產賴氨酸革蘭氏陽性細菌菌株的瘤胃滅活抗性的方法，該方法包括以下步驟：

在生長培養基中使細菌菌株培養物生長至少傳代一次，所述培養基包含溶菌酶，溶菌酶的含量可以有效地誘導抵抗原生動物攝食的細菌細胞壁的生長；并且

從含溶菌酶的培養基中回收細菌菌株。

2.權利要求1的方法，其中所述細菌菌株是谷氨酸棒狀桿菌的菌株。

3.權利要求2的方法，其中所述谷氨酸棒狀桿菌菌株是選自13058、13825、14066、14067、14068、21127和700239的ATCC菌株。

4.權利要求2的方法，其中所述谷氨酸棒狀桿菌菌株過量產生賴氨酸。

5.權利要求4的方法，其中所述谷氨酸棒狀桿菌菌株經過遺傳修飾以過量產生賴氨酸。

6.權利要求1的方法，其中所述生長培養基中溶菌酶濃度為約0.01至約100μg/ml。

7.權利要求6的方法，其中所述溶菌酶濃度為約0.1至10μg/ml。

8.權利要求1的方法，其中在含有溶菌酶的生長培養基中進行多次傳代。

9.權利要求8的方法，其中在含有溶菌酶的生長培養基中進行約2至約10次傳代。

10.一種抗瘤胃的賴氨酸飼料添加劑，其包含用權利要求1的方法培養的產賴氨酸細菌菌株。

11.權利要求10的抗瘤胃的賴氨酸飼料添加劑，其中所述細菌菌株是谷氨酸棒狀桿菌的菌株。

12.權利要求11的抗瘤胃的賴氨酸飼料添加劑，其中所述谷氨酸棒狀桿菌菌株過量產生賴氨酸。

13.權利要求12的抗瘤胃的賴氨酸飼料添加劑，其中所述谷氨酸棒狀桿菌菌株經過遺傳修飾以過量產生賴氨酸。

14.權利要求10的抗瘤胃的賴氨酸飼料添加劑，其中所述細菌菌株的瘤胃降解速率低于每小時約8％，所述速率是根據Wallace等的方法，通過C¹⁴標記的亮氨酸的釋放而測定的。

15.權利要求14的抗瘤胃的賴氨酸飼料添加劑，其中所述降解速率低于每小時約6％。

16.一種抗瘤胃的賴氨酸飼料添加劑，其包含產賴氨酸細菌菌株，所述細菌菌株的瘤胃降解速率低于每小時約8％，所述速率是根據Wallace等的方法，通過C¹⁴標記的亮氨酸的釋放而測定的。

17.權利要求14或16的抗瘤胃的賴氨酸飼料添加劑，其中瘤胃的降解速率使得每天給反芻動物喂食的細菌劑量中超過20％被完好地遞送通過網胃-瘤胃(reticulo-rumen)。

18.權利要求14或16的抗瘤胃的賴氨酸飼料添加劑，其中所述細菌菌株是選自13058、13825、14066、14067、14068、21127和700239的谷氨酸棒狀桿菌ATCC菌株。

19.一種提高反芻動物飼料配給(ration)的代謝可利用賴氨酸含量的方法，其包括向所述飼料配給中添加有效量的權利要求10或16的抗瘤胃的賴氨酸飼料添加劑。

20.權利要求19的方法，其中所述飼料添加劑被添加到所述飼料配給中，其添加量可以有效地為每公斤反芻動物體重提供約5至150mg的代謝可利用賴氨酸。

21.權利要求19的方法，其中所述反芻動物是奶牛。

22.一種評估產賴氨酸細菌菌株對體內瘤胃滅活的體外方法，該方法包括以下步驟：

在營養培養基中體外培養革蘭氏陽性產賴氨酸細菌菌株，所述營養培養基含有天然或合成的瘤胃液；并且測定細菌培養物中蛋白降解，作為時間的函數。

23.權利要求22的方法，其中所述細菌菌株是谷氨酸棒狀桿菌的菌株。

24.權利要求23的方法，其中所述谷氨酸棒狀桿菌菌株是選自13058、13825、14066、14067、14068、21127和700239的ATCC菌株。

25.權利要求23的方法，其中所述谷氨酸棒狀桿菌菌株過量產生賴氨酸。