[發(fā)明專利]生產(chǎn)膠原的植物及其生成和使用方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200580040821.7
• 申請(qǐng)日: 2005-09-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101065491A
• 公開(kāi)（公告）日: 2007-10-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: O·肖塞約夫;H·斯泰恩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 膠原植物有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/82
• 分類號(hào): C12N15/82;A01H5/00
• 代理公司: 中國(guó)專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 權(quán)陸軍;黃可峻

1.在植物或被分離的植物細(xì)胞中生產(chǎn)膠原的方法，其包括使至少 一種類型的膠原α鏈和哺乳動(dòng)物脯氨酰-4-羥化酶(P4H)靶向所述植 物或所述被分離的植物細(xì)胞的液泡，從而允許所述至少一種類型的所 述膠原α鏈由所述哺乳動(dòng)物P4H羥基化，且不由內(nèi)源性P4H羥基化， 從而在所述植物或被分離的植物細(xì)胞中生產(chǎn)膠原。

2.權(quán)利要求1的方法，其進(jìn)一步包括在所述缺乏內(nèi)源性P4H活 性的亞細(xì)胞區(qū)室中表達(dá)外源性賴氨酰羥化酶(LH3)。

3.權(quán)利要求1的方法，其中所述至少一種類型的所述膠原α鏈包 括用于靶向液泡的信號(hào)肽。

4.權(quán)利要求1的方法，其中所述至少一種類型的所述膠原α鏈缺 乏ER靶向序列或保留序列。

5.權(quán)利要求1的方法，其中所述至少一種類型的所述膠原α鏈表 達(dá)于包含DNA的植物細(xì)胞器中。

6.權(quán)利要求1的方法，其中所述外源性哺乳動(dòng)物P4H包括用于 靶向液泡的信號(hào)肽。

7.權(quán)利要求1的方法，其中所述外源性哺乳動(dòng)物P4H缺乏ER 靶向序列或保留序列。

8.權(quán)利要求1的方法，其中所述外源性哺乳動(dòng)物P4H表達(dá)于包 含DNA的植物細(xì)胞器中。

9.權(quán)利要求1的方法，其中所述至少一種類型的所述膠原α鏈?zhǔn)? α1鏈。

10.權(quán)利要求1的方法，其中所述至少一種類型的所述膠原α鏈?zhǔn)? α2鏈。

11.權(quán)利要求1的方法，其中所述至少一種類型的所述膠原α鏈包 括C-末端和/或N-末端前肽。

12.權(quán)利要求1的方法，其中所述植物選自煙草、玉米、苜蓿、稻、 馬鈴薯、大豆、番茄、小麥、大麥、低芥酸菜子、胡蘿卜和棉花。

13.權(quán)利要求1的方法，其中所述至少一種類型的所述膠原α鏈或 所述外源性P4H只表達(dá)于所述植物的部分中。

14.權(quán)利要求13的方法，其中所述植物的所述部分是葉、種子、 根、塊莖或莖。

15.權(quán)利要求1的方法，其中所述外源性哺乳動(dòng)物P4H能夠使所 述至少一種類型的所述膠原α鏈的Gly-X-Y三聯(lián)體的Y位置特異性羥 基化。

16.權(quán)利要求14的方法，其中所述外源性哺乳動(dòng)物P4H是人P4H。

17.權(quán)利要求1的方法，其中對(duì)所述植物實(shí)施應(yīng)激條件。

18.權(quán)利要求17的方法，其中所述應(yīng)激條件選自干旱、鹽度、損 傷、寒冷和噴射應(yīng)激誘導(dǎo)化合物。

19.核酸構(gòu)建體，其包括置于在植物細(xì)胞中起作用的啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄 控制下、編碼人P4H的多核苷酸，所述人P4H包括用于靶向液泡的信 號(hào)肽。

20.權(quán)利要求19的核酸構(gòu)建體，其中所述啟動(dòng)子選自CaMV?35S 啟動(dòng)子、遍在蛋白啟動(dòng)子、rbcS啟動(dòng)子和SVBV啟動(dòng)子。