[發明專利]有缺陷的流感病毒顆粒

無效

• 申請號: 200580038694.7
• 申請日: 2005-11-08
• 公開（公告）號: CN101056976A
• 公開（公告）日: 2007-10-17
• 發明（設計）人: E·德維特;M·I·J·斯普隆肯;R·A·M·福切爾;A·D·M·E·奧斯特霍斯
• 申請（專利權）人: 索爾瓦藥物有限公司;伊拉斯謨大學鹿特丹醫藥中心
• 主分類號: C12N7/04
• 分類號: C12N7/04;A61K39/145;C12N5/10;A61K48/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 胡國群

本發明涉及流感病毒和針對流感的疫苗接種的領域。

流感病毒(正粘病毒科)是有包膜的具有分段的基因組的負鏈RNA病毒(Taubenberger和Layne，Molecular?Diagnosis?Vol.6?No.4?2001)。根據它們的核蛋白和基質蛋白之間的顯著的抗原差異，可以將它們分成2類：一類包含流感A和B，另一類包含流感C。這3個病毒類型也存在致病性和基因組組織的差異。發現類型A廣泛存在于恒溫動物中，但是類型B和C主要是人病原體。通過從病毒粒子表面伸出的血細胞凝集素(HA)和NA表面糖蛋白的抗原特征，進一步細分流感A病毒。目前，有15種HA和9種NA亞型。流感A病毒能感染廣泛種類的動物，包括鳥、豬、馬、人和其它哺乳動物。水鳥是所有已知亞型的流感A的自然宿主，且可能是人流行流感株的遺傳物質源。

不同于相關的副粘病毒，流感病毒具有分段的RNA基因組。流感A和B病毒具有類似的結構，而流感C是更離散的。A和B類病毒都含有8個離散的分別編碼至少一種蛋白的基因片段，C類型含有7個離散的片段，它組合了A和B類型的片段4和6。流感A和B病毒覆蓋著3種蛋白的突出部分：HA，NA，和基質2(M2)。流感C病毒僅僅具有一種表面糖蛋白。每種流感RNA片段由核蛋白(NP)包裹成殼，形成核糖核苷酸核蛋白(RNP)復合物。這3種聚合酶蛋白與RNP復合物的一端相連。RNP被膜圍繞，所述的膜含有作為組成部分的基質蛋白(基質1)。包膜的磷脂部分源自宿主細胞膜。在病毒顆粒內，還發現了非結構性蛋白2(NS2)。

世界衛生組織(WHO)關于流感病毒命名法的規則如下。首先，指定病毒的類型(A，B，或C)，然后為宿主(如果非人)，分離地，分離數目，和分離的年(以斜線分隔)。對于流感A，在括號中注明了HA和NA亞型。例如，包含在近期的2000至2001季的三價疫苗中的株是：A/巴拿馬/2007/99(H3N2)，A/新喀里多尼亞/20/99(H1N1)，和B/Yamanashi/16/98。自1977年以來，已經有2種流感A亞型共存于人類：H1N1和H3N2。

流感病毒能積累復制過程中的點突變，因為它們的RNA聚合酶復合物不具有校對活性。能改變表面糖蛋白的抗原部分中的氨基酸的突變能通過逃避預先存在的免疫而為病毒株提供選擇優勢。通過結合某些宿主細胞上的受體，HA分子能啟動感染。針對HA蛋白的抗體可以阻止受體結合，能非常有效地預防相同株的再次感染。通過抗原性漂移(其中目前循環的HA基因的突變會破壞抗體結合)或抗原性轉變(其中病毒獲得新亞型的HA)，HA可以逃避以前獲得的免疫。抗原性漂移壓力在HA分子中是不均等的，陽性選擇變化主要發生在HA蛋白的球形頭上。這些變化在HA中的積累程度也大于在NA中的。在其它流感蛋白中更慢產生變化。同樣地，抗原性漂移壓力在人-適應的流感株中最大，在豬-和馬-適應的株中中等，在鳥-適應的株中最小。

因為流感病毒具有分段的基因組，2種不同株在同一宿主中的共感染可以導致生成新的重新組合的流感株，其含有親本基因片段的不同組合。已知15種HA亞型存在于野鳥中，并提供了HA的來源，所述HA對于人類而言是新的。含有新的亞型(通過抗原性轉變)的流感株在人循環中的出現，已經成為1957和1968年的最近2次流感大流行的原因，且極有可能是1918年流感大流行的原因。為了與已知的關于流行性流感病毒的出現相一致，流行株必須具有在抗原性上不同于目前流行的HA；該HA不得已經在人類中循環了60至70年；且該病毒必須是可以在人間傳播的。在1957和1968年，HA的轉變導致了大流行，且在2種情況下，流行株的HA與鳥毒株密切相關。盡管大流行的一個絕對條件是HA必須變化，尚不清楚病毒的其它部分可以或必須變化的程度。僅僅可以得到1957和1968年的流行性病毒用于直接研究，使用分子考古學，表征了1918年的流行性流感病毒。在1957年，3個基因被替換為鳥類基因：HA，NA，和聚合酶復合物的亞基(PB1)。在1968年，僅僅替換了HA和PB1。

通過病毒分離、血凝抑制(HI)實驗、免疫測定法檢測抗原、血清學實驗、驗證分泌物中的NA活性或基于分子的實驗，可以特異性地診斷流感感染。可以將試樣收集為唾液、鼻咽拭子或通過口漱緩沖鹽水溶液得到的鼻咽洗液。流感診斷的標準是培養后進行免疫學表征。血清學分析能提供精確的、但是可追溯的流感感染方法，因為它需要收集急性期和漸愈期的血清。