[發明專利]制備旋光醇的方法

有效

• 申請號: 200580038467.4
• 申請日: 2005-11-15
• 公開（公告）號: CN101056984A
• 公開（公告）日: 2007-10-17
• 發明（設計）人: R·施蒂默爾;B·豪爾;D·德魯;M·布羅伊爾;H·施羅德
• 申請（專利權）人: 巴斯福股份公司
• 主分類號: C12P7/16
• 分類號: C12P7/16;C12N9/04;C12P41/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所
• 代理人: 黃革生;隗永良

描述

本發明涉及通過在醇脫氫酶存在時還原丁-2-酮來制備(S)-丁-2-醇的方法。

現有技術

已經描述了使用多種生物催化劑將丁-2-酮還原成丁-2-醇[J.Org.Chem.(1992)57：1526，Chemistry?Letters(1987)2089，Arch.Biochem?Biophys.(1992)292：539]。

但是，這些研究沒有報道任何對映選擇性。此外，還公開了R-丁-2-醇的制備[J.Am.Chem.Soc.(1986)108：162]。但是在此情形中，得到了只有48％ee的對映選擇性。

Nakamura等人[Tetrahedron：Asymmetry(2003)14：2659，Tetrahedron：Asymmetry(2002)13：971]已經闡明了S-丁-2-醇的生物催化合成已經達到了94％ee的對映選擇性。在這些研究中，使用干燥的白地霉(Geotrichumcandidum)細胞。但是沒有詳細描述催化上述反應的酶。

發明目標

目標是提供通過丁-2-酮的對映選擇性還原制備(S)-丁-2-醇的方法，所述方法生產了高化學產量的具有最大對映純度的(S)-丁-2-醇。

發明描述：

本發明涉及通過在醇脫氫酶存在時還原丁-2-酮來制備(S)-丁-2-醇的方法，所述醇脫氫酶

(i)具有多肽序列SEQ?ID?NO：2，或者

(ii)具有與SEQ?ID?NO：2的序列有至少80％同一性的多肽序列。

適合于本發明方法的醇脫氫酶(在下文中縮寫為ADH)是那些能夠在依賴NAD⁺的反應中氧化2-丙醇以提供2-丙酮的ADH。

另外，適合于本發明方法的ADH具有SEQ?ID?NO：2的多肽序列或與SEQ?ID?NO：2的序列有至少80％、優選是至少90％、特別優選是至少95％并且特別是至少97％、98％或99％同一性的序列。

具有SEQ?ID?NO：2的多肽是可從大腸桿菌(Escherichia?coli)中得到的丙醇脫氫酶[Swissprot：基因座ADHP_ECOLI，登錄P39451；GenBank?ID48994873區：互補序列(1550852到1551892；[Science(1997)277：1453]。在實驗部分中描述了此酶的分離。

其它適當的ADH是它們的多肽序列與SEQ?ID?NO：2有上述一種序列同一性的那些。

為了在本文中描述的目的，通過University?of?Wisconsin的GeneticsComputer?Group(GCG)的“GAP”計算機程序確定序列同一性，所述程序使用版本10.3，使用GCG所建議的標準參數。