[發明專利]增加癌細胞程序性細胞死亡的組合物和方法

有效

• 申請號: 200580038257.5
• 申請日: 2005-11-09
• 公開（公告）號: CN101090730A
• 公開（公告）日: 2007-12-19
• 發明（設計）人: 林耀忠;克勞迪亞·布杜
• 申請（專利權）人: 切爾泰克生物科學有限公司
• 主分類號: A61K38/00
• 分類號: A61K38/00;G01N33/574;A01N37/18
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司
• 代理人: 王旭

相關申請的交叉參考

本申請要求2004年11月9日提交的美國專利申請號60/626,163的優 先權利益。

發明領域

本發明涉及細胞透過性肽以及這些肽運載功能性貨物(cargo)從組 織進入細胞的應用。本發明還涉及抑制NF-κB活化的因子。

關于國家權利的陳述

本發明部分由美國政府提供的資金(授予號CA99340，由國立衛生研 究所，國立癌癥研究所資助)而進行的。因此，美國政府可以擁有本發明 中的某些權利。

發明背景

前列腺癌(PCA)是美國癌癥相關的死亡的第二主要起因。由于在雄激 素-依賴性前列腺癌細胞中刺激程序性細胞死亡，雄激素切除術通常用作 治療法。PCA細胞通常是雄激素-不依賴性的，并且有一些隨著時間變成 雄激素-不依賴性的。在雄激素切除術治療過程中最終剩下了雄激素-不依 賴性細胞，并且向雄激素-不依賴性狀態的進展是患有前列腺癌的男性死 亡的主要起因。雄激素-不依賴性腫瘤細胞更難被消滅，已經表明其對許 多抗癌藥物和腫瘤壞死因子α(TNF-α)治療法不敏感。雄激素-不依賴性 RCA細胞與高劑量的化學治療藥物諸如順鉑和依托泊苷反應，但是這些 藥物本身具有不理想的系統性毒性水平。倘若水平足夠高足以影響顯著數 目的腫瘤細胞，那么可能對患者構成不可接受的威脅。

已經證明雄激素-不依賴性前列腺癌細胞(例如PC-3和DU145)對 TNF-α不敏感，而雄激素-敏感性前列腺癌細胞(例如LNCaP)是TNF-α敏 感性的。在許多癌細胞中，對TNF-α和許多已知的化學治療劑的促凋亡 作用的抗性與NF-κB的組成型活化相關。Muenchen等.，(Clin.Cancer?Res. 2000，6：1969-1977)證明用IκBα“超級抑制劑”(p6R-IκB_S32A+S36A)抑制 NF-κB使得先前對TNF-α作用不敏感的前列腺癌細胞變得敏感。在大多 數細胞類型中，NF-κB以潛在的、沒有活性的形式組成型地存在于細胞質 中，它通過與IκB蛋白相互作用而保留在細胞質中，所述IκB蛋白與NF-κB 結合并且掩飾其核定位序列(NLS)。在一些細胞類型中，NF-κB被組成型 地活化。NF-κB在細胞中的活化包括IκB的遍在蛋白化作用，以致它被 26S蛋白酶體降解。去除IκB暴露了NLS，并且導致NF-κB向細胞核的 移動，在這里它起作用保護細胞免受程序性細胞死亡。

NF-κB的組成型活化已經在各種組織中得到報道，包括，例如，胸腺、 胰腺、肝臟、膀胱、肺、腎和卵巢。成神經細胞瘤、霍奇金淋巴瘤、急性 淋巴母細胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性淋巴細胞白血病、伯基特淋 巴瘤和多發性骨髓瘤是與NF-κB的組成型活化相關的癌癥。還已經證明 對NF-κB核移動的抑制在使得多發性骨髓瘤對多柔比星的促凋亡作用敏 感中具有某種作用(Mitsiades等，Blood，(June2002)99：4079-4086)。因此， NF-κB活化成為提高癌癥治療的靶點。

對于癌癥治療，優選地應用靶點特異性藥劑，并且開發增加癌細胞的 破壞而對正常細胞沒有類似影響的藥劑。特別需要的是用于對目前的治療 模式表現出抗性并且因而具有增加的死亡率的那些癌癥的新型藥劑。

發明概述

本發明涉及包括大約6-大約50個殘基的細胞透過性(cell-permeable) 肽的多肽，所述細胞透過性肽包括至少SEQ?ID?NO：1的6個連續的殘基 和NF-κB核定位序列。本發明還涉及包括大約11-大約50個殘基的細胞 透過性肽的多肽，所述細胞透過性肽包括SEQ?ID?NO：2的至少11個連續 的殘基和NF-κB核定位序列。NF-κB的核定位序列(NLS)可以包括，例如， p50、p65或它們的功能等價物。本發明還提供在細胞中抑制NF-κB核易 位的方法，其包括給細胞施用有效量的包括SEQ?ID?NO：3、SEQ?ID?NO：4 或其組合的肽。所述方法可以治療性地用于各種疾病狀態或代謝異常，其 中特別是NF-κB核易位和NF-κB的組成型活化起顯著作用。