[發(fā)明專利]豬生殖與呼吸綜合征分離株及其使用方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200580038053.1
• 申請日: 2005-09-21
• 公開（公告）號(hào): CN101090981A
• 公開（公告）日: 2007-12-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邁克爾·魯夫;埃里克·沃恩;韋斯利·約翰遜
• 申請（專利權(quán)）人: 貝林格爾·英格海姆維特梅迪卡有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/70
• 分類號(hào): C12Q1/70;C12N7/00;C12N7/02;C12N7/04;C12N7/08
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務(wù)所
• 代理人: 康健

相關(guān)申請案

本專利申請案為2004年12月24日所提出的申請案(其申請案號(hào)為11/022,262)的部分接續(xù)申請案，其主張2004年9月21日所提出的臨時(shí)申請案(其申請案號(hào)為60/611,824)的利益。這些先前申請案的教示及內(nèi)容以引用方式包含入本文中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明是關(guān)于新的野生型PRRS病毒分離株及其相應(yīng)的改良型減毒PRRS病毒，該減毒病毒在疫苗及免疫組合物中的用途，以及檢測該病毒分離株病毒血癥水平，生長速度，抗體反應(yīng)，或其組合的方法。更具體的，本發(fā)明提供一種預(yù)測新的或先前未表征的PRRS分離株的致病性的方法，減毒該分離株的方法，以及該病毒分離株在疫苗與免疫組合物中的用途。

背景技術(shù)

豬生殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)是一種具包膜的單鏈RNA病毒，是屬于披衣病毒科(Arteriviridae)(Cavanaugh，1997年)。該病毒會(huì)造成一種普遍性的豬疾病，此癥在1987年首先出現(xiàn)于美國(Hill，1990年)并被稱為神秘豬病(mystery?swine?disease)。其臨床病征在于造成各年齡層豬的呼吸道疾病，而導(dǎo)致某些較年輕豬的死亡，以及對處于生殖年齡的母豬造成嚴(yán)重的生殖問題。

PRRSV的動(dòng)態(tài)特性使其在疾病中持續(xù)地改變，為新的病毒分離株的出現(xiàn)充分提供了的機(jī)會(huì)(Andreyev等人，1997年；Murtaugh等人，1998年；Meng，2000年)。由于PRRSV不斷地演變，加上對豬農(nóng)造成破壞性難題的能力，使其成為一個(gè)重要的主題而得到研究(Mengeling等人，1998年；Pejsak等人，1997年)、開發(fā)疫苗以及尋找其它降低傳染力的方法。病毒分離株致病性標(biāo)準(zhǔn)的差異，已在豬的肺部損傷及死亡情形中得以證明(Halbur等人，1996年)，但將這些生物學(xué)及免疫學(xué)上的差異與特定基因變異的相關(guān)的嘗試則多半失敗(Albina等人，1998年；Key等人，2001年；Yuan等人，2001年；Murtaugh等人，2002年；Grebennikova等人，2004年)。Labarque等人(2003年)，Mengeling等人(2003年a)及Nodelijik等人(2001年)的研究中，測試了PRRS疫苗的安全性及效率。這些研究證明，在實(shí)驗(yàn)情況下，改良的PRRS活疫苗可降低病毒血癥的量和持續(xù)性，以及減輕病毒侵襲后造成的熱病和肺部損傷。

Opriessing等人(2002年)證明，當(dāng)病毒分離株在開放讀框5(open?readingframe?5，簡稱ORF5)具有高度氨基酸序列相似時(shí)，會(huì)造成豬有顯著不同程度的肺炎(pneumonia)產(chǎn)生。宿主差異也會(huì)影響豬對于PRRSV有不同反應(yīng)(Mengeling等人，2003b)。研究已證明，致病性與PRRSV在豬中的復(fù)制速率和分布(Hayne等人，1997年)、巨噬細(xì)胞的銅離子清除能力(Thanawongnuwech等人，1998年)、以及宿主動(dòng)物的貧血程度(Halbur等人，2002年)有關(guān)。然而，這些方法并無法提供有效預(yù)測新的或先前未表征的PRRS病毒分離株的致病性的方法。

根據(jù)前述，本領(lǐng)域需要一種預(yù)測PRRS病毒分離株致病性的方法。本領(lǐng)域進(jìn)一步需要將病毒分離株給予或暴露或至既往無PRRS的豬后，根據(jù)豬體內(nèi)PRRS病毒的生長速率和/或病毒血癥水平，來預(yù)測病毒分離株的致病性的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明克服上述問題，并且提供新的野生型PRRS病毒分離株，和該病毒分離株的減毒型，及其對應(yīng)疫苗，該疫苗是含有減毒型PRRS病毒的藥物組合物。具體而言，本發(fā)明的野生型病毒分離株名稱為SDSU73、17198-6、MN?184，及其混合株。這些病毒分離株的減毒型，及包含減毒型分離株的完整疫苗，都能提供豬體內(nèi)對抗PRRS的免疫力，而不會(huì)產(chǎn)生明顯的PRRSV臨床病征。

本發(fā)明的減毒型PRRS病毒分離株的另一特征為，它們大部分保留了野生型或未減毒病毒分離株產(chǎn)生病毒血癥的情況。因此，減毒型病毒產(chǎn)生的病毒血癥是野生型未減毒病毒所產(chǎn)生病毒血癥的至少50％，優(yōu)選至少約75％。以這種方式，減毒型病毒能夠賦予豬較快速且完全的PRRS免疫力。

附圖簡述

圖1是實(shí)施例1中的豬測試的圖，其為平均血清病毒效價(jià)對時(shí)間的變化，所述病毒效價(jià)以log10?TCID₅₀/ml表示；

圖2是實(shí)施例1中的豬測試的圖，其為利用實(shí)時(shí)RT-PCR測定的平均血清PRRSV病毒濃度；