[發明專利]均相分析物檢測

有效

• 申請號: 200580037985.4
• 申請日: 2005-11-03
• 公開（公告）號: CN101137758A
• 公開（公告）日: 2008-03-05
• 發明（設計）人: T·亞當斯;E·雅布隆斯基
• 申請（專利權）人: 意力速分子診斷股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 范征

1.一種結合對，其包含：

第一結合成員，其含有偶聯于第一核酸的第一特異性分子；和

第二結合成員，其含有偶聯于第二核酸的第二特異性分子，其中所述第一和第二核酸形成具有確定和有限的穩定性的雙鏈體。

2.如權利要求1所述的結合對，其特征在于，所述第一和第二特異性分子各自獨立地選自：受體、配體和抗體。

3.如權利要求所述的結合對，其特征在于，所述第一特異性分子是第一抗體，所述第二特異性分子是第二抗體。

4.如權利要求3所述的結合對，其特征在于，所述第一和第二抗體是單克隆抗體。

5.如權利要求4所述的結合對，其特征在于，所述第一和第二抗體獨立地與同一抗原上的表位相互作用。

6.如權利要求4所述的結合對，其特征在于，所述第一和第二抗體包含夾心對。

7.如權利要求所述的結合對，其特征在于，所述第一和第二特異性分子與不同分子相互作用。

8.如權利要求7所述的結合對，其特征在于，所述不同的分子是同一細胞上的兩種受體。

9.如權利要求1所述的結合對，其特征在于，所述第一和第二核酸是單鏈核酸。

10.如權利要求1所述的結合對，其特征在于，所述第一核酸包含SEQ?IDNO.1，所述第二核酸包含SEQ?ID?NO.：2或SEQ?ID?NO.：3。

11.如權利要求1所述的結合對，其特征在于，所述第一和第二核酸各自獨立地選自DNA、RNA或PNA。

12.如權利要求1所述的結合對，其特征在于，所述第一和第二核酸中的至少一個是嵌合DNA/RNA分子。

13.如權利要求9所述的結合對，其特征在于，所述第一特異性分子偶聯于所述第一核酸的5’端，所述第二特異性分子偶聯于所述第二核酸的5’端。

14.如權利要求13所述的結合對，其特征在于，在所述第一核酸的3’末端和所述第二核酸的3’端之間形成所述雙鏈體。

15.如權利要求9所述的結合對，其特征在于，所述第一特異性分子偶聯于所述第一核酸的5’端，所述第二特異性分子偶聯于所述第二核酸的3’端。

16.如權利要求15所述的結合對，其特征在于，在所述第一核酸的3’末端和所述第二核酸的內部序列之間形成所述雙鏈體。

17.如權利要求1所述的結合對，其特征在于，所述核酸雜合體適于用PCR、LCR、SDA或TMA擴增。

18.一種檢測分析物的方法，包括：

(a)提供分析物；

(b)提供結合對，其包含：

(i)第一結合成員，其含有偶聯于第一核酸的第一特異性分子；和

(ii)第二結合成員，其含有偶聯于第二核酸的第二特異性分子，其中所述第一和第二核酸形成具有確定和有限的穩定性的雙鏈體；

(c)使所述結合對與所述分析物接觸，從而形成復合物；

(d)使所述雙鏈體解離；

(e)允許所述第一和第二核酸重新結合，從而重新形成雙鏈體；

(f)延伸所述重新形成的雙鏈體的3’端；和

(g)檢測重新形成的雙鏈體，從而檢測所述分析物。

19.如權利要求18所述的方法，其特征在于，步驟(d)包括加熱所述復合物至超過所述雙鏈體解鏈溫度的溫度。

20.如權利要求18所述的方法，其特征在于，在含有鹽的水溶液中形成所述復合物，步驟(d)包括降低所述水溶液鹽濃度。

21.如權利要求18所述的方法，其特征在于，步驟(d)還包括稀釋所述復合物。

22.如權利要求18所述的方法，其特征在于，步驟(g)包括擴增含有重新形成的雙鏈體的核酸分子并檢測擴增產物。

23.如權利要求22所述的方法，其特征在于，所述擴增用PCR、LCR、SDA或TMA完成。