[發明專利]用于經皮給藥的藥物組合物

無效

• 申請號: 200580037223.4
• 申請日: 2005-11-03
• 公開（公告）號: CN101072566A
• 公開（公告）日: 2007-11-14
• 發明（設計）人: 李承揆;李尚揆;李東鎬
• 申請（專利權）人: 為人技術株式會社
• 主分類號: A61K31/519
• 分類號: A61K31/519
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司
• 代理人: 周建秋;王鳳桐

技術領域

本發明是關于一種含有甲氨蝶呤和蛋白轉導結構域(PTD)的綴合物的 新型藥物組合物。

背景技術

一般地，普遍知道甲氨蝶呤(Methotrexate)能夠抑制細胞中DNA合成 所需葉酸的新陳代謝以及細胞的生長和分裂。特別地，甲氨蝶呤抑制有關葉 酸新陳代謝的酶中的一種—二氫葉酸還原酶(dihydrofolate?reductase，DHFR) 的酶活性。因而，甲氨蝶呤是通過抑制細胞增殖而可用于各種疾病的藥物， 并顯示給藥后約2周內減輕疾病癥狀的非常快速的效果。所述抑制細胞增殖 對各種自身免疫病如類風濕性關節炎和牛皮癬非常有效。然而，因為已經連 續報道的各種副作用如引起嚴重肝毒性、胃腸紊亂以及腎和造血器官的損 傷，因而甲氨蝶呤很難長期使用。而且，甲氨蝶呤主要制成用于口服或注射 給藥的劑型，但甲氨蝶呤的口服給藥存在明顯不便，例如以每次2.5毫克的 給藥劑量，12小時間隔，每周3次給予活性藥物。因為這個原因，一直需要 開發一種能夠提高甲氨蝶呤藥物給藥效率以減少該藥的給藥劑量從而減少 副作用以及能夠消除注射和口服給藥不便的新型的藥物給藥方法。

同時，蛋白轉導結構域(protein?transduction?domain，PTD)是用于將生 理活性分子滲透到宿主細胞的低分子量肽。首次報道的PTD是1998年在 HIV病毒的表面蛋白中發現的TAT。據報道，TAT?PTD能夠在短時間內有效 將分子量大于120千道爾頓的大型蛋白質傳送給細胞。此后，發現了具有與 TAT?PTD類似功能的不同氨基酸序列的多種PTD蛋白質，并提議使用這些 肽進行新型藥物開發研究和藥物傳輸系統(Drug?Delivery?System，DDS)研 究。因此，在醫藥和制藥領域中領先的國家進行了各種努力，試圖發現新型 PTD和使用PTD開發新型藥物。本發明的發明人也進行了開發PTD的研究， 結果，開發出了顯示比以前報道的PTD具有明顯更高效率的將大分子(如 蛋白質)傳遞到體內及體外的細胞內的新型PTD(參見PCT/KR2003/000121 和PCT/KR2003/000122)。

發明內容

因而，本發明的發明人制備了用于甲氨蝶呤有效局部給藥的PTD和甲 氨蝶呤的綴合物，以及將用于經皮給藥的含有該綴合物的新型藥物組合物用 于皮膚，并觀察了結果。結果，我們驚奇地發現，甲氨蝶呤通過表皮傳遞到 身體損害位點，以顯示藥理效果，從而完成了本發明。

本發明的目的是提供一種含有甲氨蝶呤和蛋白轉導結構域(PTD)的綴 合物的新型藥物組合物。

本發明的另一個目的是提供一種通過經皮給藥局部給予甲氨蝶呤的方 法。

附圖說明

圖1示出了通過肽鍵連接的MTX(甲氨蝶呤)和PTD(蛋白轉導結構 域)的綴合物(MTX-PTD)的制備；

圖2示出了根據本發明的MTX-PTD綴合物的高效液相色譜 (High-performance?Liquid?Chromatography，HPLC)分析結果；

圖3和4為示出用于本發明的PTD經皮給藥的共焦顯微照片；

圖5為示出了根據本發明的MTX-PTD綴合物的細胞增殖-抑制效果的 圖表；

圖6為示出了通過使用本發明的MTX-PTD綴合物進行治療引起的關節 炎指數變化的圖表；

圖7為示出了使用本發明的MTX-PTD綴合物治療后血液中IL-4和 IFN-γ水平的圖表；

圖8為示出了使用本發明的MTX-PTD綴合物治療后血液中IL-6和 TFN-α水平的圖表；

圖9為示出了使用本發明的MTX-PTD綴合物治療后血液中類風濕性關 節炎(RA)因子水平的圖表；

圖10為示出了使用本發明的MTX-PTD綴合物治療后炎癥組織的照片；

圖11為示出了在具有TPA誘導炎癥的動物模型中MTX-PTD綴合物腫 脹抑制效果的示意圖。

具體實施方式

為實現上述目的，本發明提供了一種由式I表示的肽PTD(蛋白轉導結 構域)和甲氨蝶呤(MTX)的綴合物。本發明的綴合物可以通過固相合成法 合成PTD、然后將MTX的-COOH基團通過肽鍵連接到合成的PTD的N- 端而制得(參見圖1)。

[式I]