[發明專利]適體藥物化學

無效

• 申請號: 200580034801.9
• 申請日: 2005-09-07
• 公開（公告）號: CN101356284A
• 公開（公告）日: 2009-01-28
• 發明（設計）人: 安東尼·多米尼克·克費;查爾斯·威爾遜;約翰·L·戴納;馬庫斯·庫爾茨
• 申請（專利權）人: 阿切埃米克斯有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司
• 代理人: 過曉東

1.鑒別被取代的單鏈適體的方法，包括下列步驟：

a)用硫代磷酸或二硫代磷酸取代單鏈適體內核苷酸內連 接部位上的磷酸；

b)分析被取代的單鏈適體對靶點的親合力；和

c)鑒別出相對于起始適體，對靶點具有更高親合力的單鏈 適體，其中起始適體除了其無硫代磷酸取代之外同源于被修 飾的單鏈適體。

2.根據權利要求1所述的方法，其中取代步驟進一步包括通過 化學合成在核苷酸內連接部位上加入硫代磷酸取代。

3.根據權利要求2所述的方法，其中取代步驟不包括在單鏈適 體的3′或5′末端處的兩個核苷酸之間的核苷內連接處的硫代 磷酸取代。

4.根據權利要求2所述的方法，其中取代步驟包括在單鏈適體 內加入單一硫代磷酸取代。

5.根據權利要求4所述的方法，其中被取代單鏈適體包括的靶 點結合親合力比起始適體的結合親合力至少高兩倍。

6.由權利要求5所述的方法鑒別的被取代單鏈適體。

7.根據權利要求4所述的方法，進一步包括向被取代單鏈適體 中加入一種附加取代而導致產生二次取代單鏈適體。

8.根據權利要求7所述的方法，進一步包括分析二次取代單鏈 適體對靶點親合力并鑒別該二次取代單鏈適體具有與起始未 取代單鏈適體的親合力相等或更高的親合力。

9.根據權利要求7所述的方法，進一步包括分析二次取代單鏈 適體對靶點的親合力并鑒別該二次取代單鏈適體具有與硫代 磷酸取代單鏈適體的親合力相等或更高的親合力。

10.由權利要求9所述的方法鑒別的二次取代單鏈適體。

11.根據權利要求7所述的方法，其中附加取代為附加的硫代磷 酸取代，該取代發生在不同于首個硫代磷酸取代位點的磷酸 位點處。

12.根據權利要求7所述的方法，其中附加的取代選自：在堿基 位點取代一種被修飾核苷酸、在糖基位點取代一種被修飾核 苷酸、和在磷酸位點取代一種被修飾核苷酸。

13.根據權利要求12所述的方法，其中附加的取代選自：在磷酸 位點處的二硫代磷酸取代、肌苷取代另一種核苷酸；2′-脫氧 二氫尿嘧啶核苷取代尿嘧啶核苷，2′-脫氧-5-甲基核苷酸取代 另一種核苷酸，2′-脫氧核苷酸取代2′-OMe核苷酸，2′-OMe 核苷酸取代2′-脫氧核苷酸，和2-氨基嘌呤取代一種嘌呤。

14.根據權利要求13所述的方法，其中附加的取代選自：2′-脫氧 肌苷或2′-OMe肌苷取代另一種核苷酸、2′-脫氧二氫尿嘧啶核 苷取代尿嘧啶核苷，2′-脫氧-5-甲基胞嘧啶取代胞嘧啶，和一 種2′-脫氧核苷酸取代2′-OMe核苷酸。

15.鑒別被取代適體的方法，其包括下列步驟：

a)向起始適體中加入一種取代物，其中該取代選自由肌苷 取代另一種核苷，2′-脫氧二氫尿嘧啶核苷取代尿嘧啶核苷、2 ′-脫氧-5-甲基胞嘧啶取代胞嘧啶，2-氨基嘌呤取代嘌呤和2′- 脫氧核苷酸取代2′-OMe核苷酸；

b)分析被取代適體對靶點的親合力；和

c)鑒別相對于起始適體對靶點親合力，對靶點具有增強的 親合力的被取代適體，其中，除了其無取代核苷酸之外，該 起始適體與被取代適體同源。

16.根據權利要求15所述的方法，其中加入步驟進一步包括通過 化學合成向起始適體中加入取代物。

17.根據權利要求16所述的方法，其中鑒別出的取代適體是單鏈 的。

18.根據權利要求15所述的方法，其中方法進一步包括向被取代 適體中加入另外取代物的步驟，其中另外的取代物與第一取 代的類型不同，從而產生二次取代適體。