[發明專利]視網膜肌養蛋白轉基因及其應用方法

無效

• 申請號: 200580030456.1
• 申請日: 2005-07-15
• 公開（公告）號: CN101065487A
• 公開（公告）日: 2007-10-31
• 發明（設計）人: R·懷特;R·加伊迪克;K·菲茨杰拉德－古斯塔夫松
• 申請（專利權）人: 兒童慈善醫院
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63;C12N15/85;A01K67/00;A61K31/711
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 范征

1.一種轉化的載體，其包含：

編碼肌養蛋白的核酸序列，所述載體在轉化前不包含所述核酸序列。

2.如權利要求1所述的轉化的載體，其特征在于，所述載體還包含至少一種選自下組的調節元件：啟動子、增強子和poly?A信號位點。

3.如權利要求1所述的轉化的載體，其特征在于，所述核酸序列是能夠表達所述肌養蛋白的轉基因。

4.如權利要求1所述的轉化的載體，其特征在于，所述核酸序列與SEQ?ID?No.10至少有80％的序列相同性。

5.如權利要求1所述的轉化的載體，其特征在于，所述載體選自質粒或病毒載體。

6.如權利要求1所述的轉化的載體，其特征在于，所述肌養蛋白是視網膜肌養蛋白。

7.一種細胞，該細胞包含：

插入到細胞基因組內從而轉化所述細胞的核酸序列，所述核酸序列編碼肌養蛋白。

8.如權利要求7所述的細胞，其特征在于，所述核酸序列與SEQ?ID?No.10至少有80％的序列相同性。

9.如權利要求7所述的細胞，其特征在于，所述核酸序列還包含至少一種選自下組的調節元件：啟動子、增強子和poly?A信號位點。

10.如權利要求7所述的細胞，其特征在于，所述細胞選自成肌細胞、骨髓細胞或骨髓細胞邊緣群。

11.如權利要求7所述的細胞，其特征在于，所述肌養蛋白是視網膜肌養蛋白。

12.一種轉基因動物，所述動物具有穩定整合到其基因組內的外源核酸序列，所述核酸序列編碼肌養蛋白。

13.如權利要求12所述的轉基因動物，其特征在于，所述動物選自小鼠、人、犬或馬。

14.如權利要求12所述的轉基因動物，其特征在于，所述核酸序列與SEQ?ID?No.10至少有80％的序列相同性。

15.如權利要求12所述的轉基因動物，其特征在于，所述核酸序列還包含至少一種選自下組的調節元件：啟動子、增強子和poly?A信號位點。

16.如權利要求12所述的轉基因動物，其特征在于，所述肌養蛋白是視網膜肌養蛋白。

17.一種其中含有權利要求1所述載體的轉化細胞。

18.一種降低動物的進行性假肥大性肌營養不良的至少一種臨床癥狀的嚴重性的方法，該方法包括如下步驟：

將一種遺傳插入片段引入所述動物的基因組內，所述插入片段編碼肌養蛋白。

19.如權利要求18所述的方法，其特征在于，所述插入片段是與SEQ?ID?No.10至少有80％序列相同性的核酸。

20.如權利要求18所述的方法，其特征在于，所述插入片段還包含至少一種選自下組的調節元件：啟動子、增強子和poly?A信號位點。

21.如權利要求18所述的方法，其特征在于，所述肌養蛋白是視網膜肌養蛋白。

22.如權利要求18所述的方法，其特征在于，所述引入步驟包括將載體穩定轉染入所述基因組內的步驟，所述載體包含所述遺傳插入片段。

23.如權利要求22所述的方法，其特征在于，所述載體選自質粒或病毒載體。

24.如權利要求18所述的方法，其特征在于，所述臨床癥狀選自復合性重復放電、脊柱后凸、壞死、姿態松弛、生長遲緩或嚴重的肌無力。

25.如權利要求18所述的方法，其特征在于，所述動物選自人、小鼠、馬或犬。

26.一種降低動物的進行性假肥大性肌營養不良的至少一種臨床癥狀的嚴重性的方法，該方法包括如下步驟：

將細胞施用于所述動物，所述細胞已用編碼肌養蛋白的遺傳插入片段轉染。

27.如權利要求26所述的方法，其特征在于，所述方法還包括在所述施用步驟前從所述動物取出細胞并用所述遺傳插入片段轉染所述細胞的步驟。

28.如權利要求27所述的方法，其特征在于，所述轉染步驟利用載體或裸DNA電穿孔進行。