[發(fā)明專利]靶特異性復(fù)合體以及使用方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200580021007.0
• 申請日: 2005-06-22
• 公開（公告）號: CN101426932A
• 公開（公告）日: 2009-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馬蒂亞斯·埃里希;迪爾克·約翰內(nèi)斯·范德博姆
• 申請（專利權(quán)）人: 斯昆諾有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京康信知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 章社杲

1.一種確定樣品是否含有靶分子的方法，所述方法包括：

a.在反應(yīng)條件下，用靶檢測試劑接觸懷疑含有所述靶分 子的樣品，以形成試劑：靶復(fù)合物，其中所述靶檢測試劑包括： 與所述靶分子特異性反應(yīng)的靶結(jié)合部分；以及與所述靶結(jié)合部 分相連的復(fù)合體模板或其互補物，其中所述復(fù)合體模板是核 酸，所述核酸編碼切割底物，所述切割底物包括與所述靶分子 相關(guān)的復(fù)合體，所述復(fù)合體不直接結(jié)合于所述靶分子，所述切 割底物包括兩個區(qū)，即復(fù)合體區(qū)和其他區(qū)，所述復(fù)合體區(qū)包括 一種、兩種或三種核苷酸堿基而所述其他區(qū)包括不出現(xiàn)在所述 復(fù)合體中的一種或多種核苷酸堿基；

b.如果存在試劑：靶復(fù)合物，則利用它從所述復(fù)合體模 板轉(zhuǎn)錄切割底物；

c.切割所述切割底物以釋放復(fù)合體；以及

d.確定是否生成了復(fù)合體，從而確定所述樣品是否含有 所述靶分子。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述切割底物采用選自化 學(xué)、物理以及酶促過程的方法進(jìn)行切割。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述復(fù)合體模板包括含 有轉(zhuǎn)錄單位的核酸分子，所述轉(zhuǎn)錄單位包括可操作地連接于最 少編碼復(fù)合體的編碼區(qū)的啟動子區(qū)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述啟動子區(qū)選自細(xì)菌啟動 子區(qū)、噬菌體啟動子區(qū)、通用啟動子區(qū)、病毒啟動子區(qū)以及真 核啟動子區(qū)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所述啟動子區(qū)是噬菌體啟動 子區(qū)，所述噬菌體啟動子區(qū)選自T7啟動子區(qū)、SP6啟動子區(qū) 以及T3啟動子區(qū)。

6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述復(fù)合體是通 過質(zhì)譜分析確定的。

7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述靶分子是選 自等位基因變異體、單核苷酸多態(tài)性、缺失、重復(fù)、插入和重 排的遺傳變異體。