[實用新型]慶大霉素快速半定量檢測試紙

無效

• 申請號: 200520056965.9
• 申請日: 2005-04-15
• 公開（公告）號: CN200986547Y
• 公開（公告）日: 2007-12-05
• 發明（設計）人: 雷紅濤;孫遠明;黃曉鈺;王弘;潘科;吳青;肖治理;諶國蓮
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/52;G01N21/78
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司
• 代理人: 伍宏達

技術領域

本實用新型涉及動物性食品中一種抗生素殘留檢測試紙，特別涉及一種慶大霉素檢測試紙。

背景技術

抗生素殘留是全世界畜禽養殖中普遍存在的問題，其中慶大霉素是一種比較常見的殘留抗生素。慶大霉素是一種氨基糖苷類抗生素，其在治療家畜細菌感染性疾病中發揮了重要作用，但其殘留物毒副作用比較大，歐美國家多年前即以法規禁止抗生素殘留超限量的牛奶上市，發現有抗生素的奶場必須停產，甚至要收回產品銷毀。但據專家判斷，“有抗奶”目前仍流通于我國部分城市。為了加強獸藥殘留管理工作，保證畜產品質量安全，我國農業部于2002年修訂了《動物性食品中獸藥最高殘留限量》，其中規定牛奶中慶大霉素的最高殘留限量為200μg/kg，對羊、豬、雞等其他動物肌肉、脂肪、腎臟中慶大霉素殘留也有相應限量規定。

對慶大霉素殘留的檢測目前主要采用高效液相色譜法(HPLC)。然而，由于氨基糖苷類抗生素缺少發色基團，應用到HPLC時常要對其衍生化，樣品前處理繁瑣，測定方法相當復雜，需受過專門訓練的人員才能操作，檢測通量很小。在我國目前動物養殖分散經營的情況下，很難統一管理，因此造成動物源性食品的質量很難一致，單純采用大型儀器檢測監控產品質量，很不現實，而且儀器檢測費用高，很難普及使用。國外對慶大霉素殘留的檢測普遍采用快速篩選檢測結合儀器確證的方法，我國在大量樣品快速篩選檢測技術方面上研究不多。微生物抑制法是一種較為常用的抗生素篩選檢測方法，其主要原理是根據抗微生物藥對特異微生物的抑制作用來檢測受檢樣品中殘留的抗微生物藥，主要包括杯碟法、紙片法、瓊脂擴散法和氯化三苯基四氮唑法，雖然目前仍在使用，但這些方法特異性差，耗時費力，測定結果誤差很大。ELISA法是另一種目前研究較多的抗生素篩選檢測方法，具有靈敏度高、檢測量大、成本低等優點，但該方法也需酶標儀等部分實驗室設備，分析時間一般1-4小時，仍有一定局限性。因此，目前我國相應的慶大霉素檢測技術并不很完備，很有必要研制更加簡單快捷方便的檢測產品。

發明內容

本實用新型的目的即在于研制出簡便、靈敏、價格低廉的慶大霉素快速半定量檢測試紙。

慶大霉素快速半定量檢測試紙含有背襯、樣液吸收部分、膠體金標記部分、檢測反應部分，樣液吸收部分、膠體金標記部分、檢測反應部分及吸水部分，依次粘貼在背襯上。

膠體金標記部分為玻璃纖維或醋酸纖維或尼龍膜，其上標記的物質為第二種屬動物蛋白和慶大霉素抗體的混合物，或第二種屬動物蛋白與慶大霉素檢測用抗原的混合物。

檢測反應部分上面包被有慶大霉素檢測用抗原1-3條作為檢測線，或包被有慶大霉素抗體1-3條作為檢測線，同時還包被有抗第二種屬動物蛋白的IgG1-3條作為參考線。

檢測線和參考線組合時不能同時多于1條，組合線條數為2-4條，組合方式為1條檢測線+1條參考線、1條檢測線+2條參考線、1條檢測線+3條參考線、2條檢測線+1條參考線、3條檢測線+1條參考線五種形式。根據半定量檢測的準確度要求，組合線數越多，半定量越準確。

本實用新型中檢測用抗原是指慶大霉素與載體物質形成的偶合物，其中載體物質包括蛋白質、蛋白質片段、合成多肽、半合成多肽、多糖，如血清白蛋白、球蛋白、脂蛋白、多聚氨基酸、葡聚糖，示例性的載體物質包括牛血清白蛋白、卵清白蛋白、匙孔血藍蛋白、甲狀腺球蛋白、L-多聚賴氨酸等。另外，載體物質也可以是具有活性基團的其他合成或天然聚合物，如白喉毒素、破傷風毒素、酵母、尼龍、右旋葡聚糖、纖維素等，同樣也可以用來制備檢測用抗原。第二種屬動物蛋白指非抗體來源屬動物的蛋白，例如，抗體為鼠源性，則第二種屬動物蛋白可以是卵清白蛋白、兔血清白蛋白等雞、兔或其他非鼠源性動物蛋白。

本實用新型所描述的試紙的各部分處理與功能如下：

背襯：為一面涂有不干膠的不吸水的韌性材料，如PVC板，起固定支持試紙其他組成部分的作用。

樣液吸收部分制備：將濾紙或玻璃纖維紙浸入pH7.0-8.4的PBS中2min，取出，80℃烘干或其他方式干燥，即作為樣液吸收部分，檢測時起吸收樣品溶液的作用，便于樣品溶液向上移動。

膠體金標記部分的制備：該部分起固定膠體金標記的抗原或抗體的作用。制備步驟包括膠體金溶膠的制備、膠體金標記慶大霉素抗體或慶大霉素抗原、膠體金標記部分處理。