[發明專利]作為慢性肝炎治療性疫苗的穩定化HBc嵌合體顆粒

無效

• 申請號: 200480010557.8
• 申請日: 2004-02-20
• 公開（公告）號: CN101080239A
• 公開（公告）日: 2007-11-28
• 發明（設計）人: M·帕格;M·弗里德;A·E·施密德特;D·施托伯爾
• 申請（專利權）人: 洛倫蒂斯有限公司
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61K39/12;A61K39/29;A61K39/385;A61K38/00;C07K14/00;C07K14/005;C07K14/02;C12P21/00;C12N15/09;C12N15/31;C12N15/33;C12N15/51
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 王景朝

1.一種治療慢性肝炎的方法，所述方法包括：

(a)給予慢性感染乙型肝炎病毒的患者T細胞刺激量的疫苗，所述疫苗包含溶解或分散在藥物可接受的稀釋劑中的免疫原性顆粒，所述免疫原性顆粒包含重組乙型肝炎核心(HBc)嵌合蛋白分子，所述嵌合蛋白分子長度至多約為550個氨基酸殘基并且含有

(i)HBc分子N端165個氨基酸殘基中至少約125個氨基酸殘基的HBc序列，所述HBc分子包含4至約75位殘基和約85至約140位殘基的HBc序列，并且任選包含(a′)以肽鍵連接的免疫原性表位，所述免疫原性表位位于所述嵌合體的N末端、HBc優勢免疫環中和C末端中的一個或多個；或(b′)在HBc優勢免疫環中的插入序列，所述插入序列的長度為1個至約40個氨基酸殘基并且包含用于綴合半抗原的化學反應性接頭殘基，

(ii)以下(a′)和(b′)之一或它們兩者：(a′)序列中其氨基酸位置不同于HBc前核心序列的1-3個半胱氨酸殘基，所述半胱氨酸殘基在所述嵌合分子中的氨基酸位置對應于從SEQ?ID?NO：1的HBc序列N端計算的氨基酸位置-20至約+1，即N端半胱氨酸殘基；和(b′)位于從所述HBc序列C端殘基開始向所述嵌合分子C端方向并且位于所述嵌合分子C端的約30個殘基內的1個至約3個半胱氨酸殘基，即C端半胱氨酸殘基，

所述嵌合分子(a′)所含有的HBc序列中的保守取代氨基酸殘基不大于約20％，(b′)在宿主細胞中表達后自我裝配成顆粒，所述顆粒基本上不結合核酸，和

所述顆粒比由除了以下兩點不同之外其他方面都相同的HBc嵌合分子所形成的顆粒更穩定：不含任何上述C端半胱氨酸殘基或N端半胱氨酸殘基，或者其中所提出的嵌合分子中存在的C端半胱氨酸殘基或N端半胱氨酸殘基被其它殘基取代；和

(b)讓所述患者保持足夠時間以誘導出抗HBc的活化T細胞。

2.權利要求1的方法，其中所述以肽鍵連接的免疫原性表位或用于綴合表位的異源接頭殘基是免疫原性表位。

3.權利要求2的方法，其中所述免疫原性表位是B細胞表位。

4.權利要求3的方法，其中所述重組HBc嵌合蛋白分子含有第二免疫原性表位，所述第二免疫原性表位在不同于第一免疫原性表位所鍵合的位置上以肽鍵連接在所述嵌合體的N末端、HBc優勢免疫環中或C末端。

5.權利要求3的方法，其中所述B細胞表位以肽鍵連接在HBc序列氨基酸殘基76和85之間的位置上，并且存在HBc序列76至85位中的至少5個殘基。

6.權利要求5的方法，其中在氨基酸殘基76和85之間的HBc序列存在，但是被所述B細胞表位間隔開。

7.權利要求2的方法，其中所述重組HBc嵌合蛋白分子還包括以肽鍵連接的免疫原性T細胞表位，所述T細胞表位在不同于第一免疫原性表位所鍵合的位置上以肽鍵連接在所述嵌合體的N末端、HBc優勢免疫環中或C末端。

8.權利要求7的方法，其中所述T細胞免疫原性表位以肽鍵連接C端HBc氨基酸殘基。

9.權利要求8的方法，其中存在至少一個所述C端半胱氨酸殘基。

10.權利要求1的方法，其中所述嵌合體含有未被間隔的4位到至少140位的HBc氨基酸殘基序列和一個在HBc嵌合蛋白分子N端的半胱氨酸殘基。

11.權利要求10的方法，其中所述嵌合體含有未被間隔的4位至149位的HBc氨基酸殘基序列。

12.權利要求1的方法，其中所述嵌合體含有存在于HBc優勢免疫環中的用于綴合表位的異源接頭殘基。

13.權利要求12的方法，其中所述用于綴合表位的異源接頭殘基以肽鍵連接在HBc序列氨基酸殘基76和85之間的位置上，并且至少存在HBc序列76至85位中的4個殘基。

14.權利要求13的方法，其中氨基酸殘基76和85之間的HBc序列存在，但是被所述用于綴合表位的異源接頭殘基間隔開。

15.權利要求14的方法，其中所述重組HBc嵌合蛋白分子含有4位到至少140位的HBc氨基酸殘基序列。

16.權利要求15的方法，其中所述嵌合體含有4位至149位的HBc氨基酸殘基序列。