[其他]胸腺因子Ｄ的制備工藝

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 101986000001579
• 申請(qǐng)日: 1986-03-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN86101579B
• 公開(kāi)（公告）日: 1987-12-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳紫榕;李龍洋;劉小朋;陳仁英
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)人民解放軍空軍福州醫(yī)院
• 代理公司: 福建省專(zhuān)利代理事務(wù)所
• 代理人: 林有為;丁秀麗

胸腺因子Ｄ藥物的制備，以動(dòng)物胸腺組織為原料，通過(guò)勻漿、抽提、加熱、透析、滅菌等步驟制成，較其他同類(lèi)藥物的制備方法簡(jiǎn)便。工藝簡(jiǎn)單，使用安全，成本低廉，適于工業(yè)上大規(guī)模生產(chǎn)。本品穩(wěn)定性好，有效期長(zhǎng)，運(yùn)輸、貯存和使用方便。對(duì)急、慢性病毒性肝炎，難治性肺結(jié)核、銀屑病、惡性腫瘤和免疫性疾病的療效較其他藥物為優(yōu)。

本發(fā)明屬于胸腺激素藥物的制備工藝。

現(xiàn)有的胸腺激素類(lèi)藥物，一般以動(dòng)物的胸腺組織為原料，經(jīng)過(guò)勻漿，用酸性生理鹽水?dāng)嚢璩樘幔^(guò)濾或離心去殘?jiān)亚逡簆H調(diào)至中性，加熱到80℃～90℃，保持15分鐘，而后冷卻，過(guò)濾或離心去除雜蛋白，清液用丙酮沉淀，硫酸銨鹽析，再用透析袋或透析紙透析，以去除硫酸銨，再經(jīng)超濾器超濾，葡聚糖層析等步驟得到較純的物質(zhì)后，經(jīng)除菌過(guò)濾才能灌封制成。該方法的缺點(diǎn)在于：丙酮沉淀需用大量丙酮，價(jià)格昂貴、有毒、不易操作。用透析法去除硫酸銨時(shí)，會(huì)丟失大量很高生物活性的小分子成分，使最終提取得到的胸腺激素較天然成分相差甚遠(yuǎn)，影響醫(yī)療效果。此外熱變性時(shí)雜蛋白凝固不完全，去除不徹底，需用高速離心機(jī)和進(jìn)口的超濾器等大型設(shè)備，工藝復(fù)雜，生產(chǎn)周期長(zhǎng)，易污染，且超濾時(shí)不能解決高分子物質(zhì)分離的濃差極化問(wèn)題。再者，整個(gè)胸腺激素的制備過(guò)程都是在無(wú)菌條件下進(jìn)行的，產(chǎn)品不滅菌，這樣，不僅不易生產(chǎn)，也不利于運(yùn)輸、貯藏和使用。有些制劑是收集透析外液而制備的，但分子量幾千的部分又被去除，影響生物活性和臨床療效。

本發(fā)明的目的在于設(shè)計(jì)一種工序簡(jiǎn)單，成本低廉，活性強(qiáng)，穩(wěn)定性好的胸腺因子D的制備工藝。

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的：首先，與現(xiàn)有技術(shù)一樣，經(jīng)過(guò)原料勻漿、抽提、過(guò)濾或離心去殘?jiān)亚逡簆H調(diào)至中性，而后加熱至81℃～121℃，保持10～15分鐘，冷卻。過(guò)濾或離心去除雜蛋白。所得清液直接用人工腎透析器透析，將透析液除菌過(guò)濾，灌封分裝，加熱滅菌，得到胸腺因子D的滅菌制劑。

采用人工腎透析器，是本發(fā)明的主要特征之一：該透析器是上海醫(yī)用診察儀器廠從日本硝公司引進(jìn)全套透析器生產(chǎn)設(shè)備，并用進(jìn)口空心纖維生產(chǎn)的TX-110空心纖維透析器，具有良好的透析和超濾作用（醫(yī)療器械1985，9（6）：59），其用途本來(lái)是進(jìn)行血液透析，以去除中、小分子的體內(nèi)代謝產(chǎn)物和水份，治療尿毒癥性體液潴留、心力衰竭（上海第一醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)1982，9（3）：161）和急、慢性腎功衰竭（中華內(nèi)科雜志1981，20（6）：326）。后來(lái)，又有人用它來(lái)回收腹水，以治療肝硬化，難治性腹水（中華內(nèi)科雜志1984，23（5）：306）。

人工腎透析器的使用方法是已知的，在上述文獻(xiàn)中都有明顯記載。本發(fā)明使用該透析器制備胸腺因子D時(shí)，將加熱去蛋白后的清液連接上孔，通過(guò)中空纖維內(nèi)腔，上側(cè)孔塞住。下側(cè)孔接一收集瓶，并連接一吸引器成負(fù)壓，保持在100mmHg左右，即可使中、小分子量物質(zhì)通過(guò)中空纖維膜透析和超濾而出，并收集之，而不能透過(guò)中空纖維膜的大分子物質(zhì)仍由內(nèi)腔通過(guò)，從下孔流出而去除之。

采用人工腎透析器，不但省去了傳統(tǒng)方法制備胸腺素的四個(gè)程序，即丙酮沉淀，硫酸銨鹽析，超濾器超濾和葡聚糖層析，大大簡(jiǎn)化了工藝流程，縮短了生產(chǎn)周期，而且因?yàn)樵撏肝銎饔袃蓚€(gè)出口，一個(gè)是下側(cè)孔，收集了分子量小于15.0Kd的全部有效胸腺激素，另一個(gè)是下孔，去除了分子量大于15.0Kd，無(wú)明顯活性，易引起過(guò)敏反應(yīng)的全部胸腺激素前體，使產(chǎn)品得率比胸腺肽增加2.5倍，生物活性提高10倍。由于上述透析器的兩條管。使收集和清除得以同時(shí)進(jìn)行，因此解決了高分子物質(zhì)分離純化的濃差極化問(wèn)題，在胸腺激素的制備史上是從未有過(guò)的。

此外，本發(fā)明的另一特征是：在制備工藝中把加熱去蛋白的溫度由80℃提高到90℃。現(xiàn)有技術(shù)已經(jīng)證明，豬胸腺激素F₅在37℃～90℃加熱15分鐘，活性完全不受影響（南京大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）1979，(1):121)，但尚無(wú)人將其用于胸腺激素的制備工藝中，將加熱溫度提高到90℃，不僅活性不受影響，而且因?yàn)闇囟忍岣撸墒沟鞍啄掏耆阌谟闷胀x心機(jī)去除之。